Описание
ХайфайрТМ Lyo-Ready я Мультиплексный одношаговый набор ОТ-ПЦР(УДГ плюс) представляет собой набор для мультиплексной количественной ПЦР на основе РНК в качестве матрицы. В процессе эксперимента обратная транскрипция и количественная ПЦР проводились в одной и той же пробирке, что упростило экспериментальную операцию и снизило риск контаминации.The Уникальный дизайн буфера и фермента гарантирует возможность использования при подготовке и разработке продукта в одноэтапных системах лиофилизированных реакций ОТ-ПЦР в режиме реального времени..
В этом наборе первая цепь ДНК была эффективно синтезирована с помощью термостойкого HifairТМ Обратная транскриптаза и количественно амплифицированная с помощью UniconТМ HotStart Taq ДНК-полимераза. В состав набора в основном входят оптимизированные лйофилизуемый буфер, смесь ферментов и т. д. Кроме того, добавляются факторы, которые могут эффективно ингибировать неспецифическую амплификацию ПЦР и повышать эффективность амплификации множественных реакций qPCR, что может обеспечить эффективность амплификации и проводить вплоть до множественных реакций амплификации.
В этот комплект входит лйопротектор которые можно использовать для лиофилизации.
Технические характеристики
Номер компонента | 16645ЭС60 / 16645ЭС80 / 16645ES92 |
Размер | 100 Т / 1000 Т / 10000 Т |
Компоненты
Имя | 16645ES60 (100т) | 16645ES80 (1000т) | 16645ES92 (10 000 т) | |
16645-А | 4×HifairТМ Лио-буфер | 600 мкл | 6 мл | 60 мл |
16645-Б | ХайфайрТМ Лио-энзимная смесь | 100 мкл | 1 мл | 10 мл |
16645-С | Лиопротектор | 800 мкл | 8 мл | 80 мл |
Хранилище
The продукт следует хранить при температуре -25℃ ~ -15℃ в течение 1 года. Следует избегать повторного замораживания и размораживания.
Инструкции
1. Состав реакции:
Компоненты | Объем (мкл) | Конечная концентрация |
4×HifairТМ Лио-буфер | 6 | 1× |
ХайфайрТМ Лио-энзимная смесь | 1 | - |
Лиопротектор | 8 | - |
Смесь праймеров (10 мкМ) | 1 | |
Смесь зондов (10 мкМ) | 0,5 | 0,05-0,5 мкМ |
Шаблон РНК | 5 | - |
ДЕПК H2О | до 25 | - |
Примечание:Перед использованием обязательно тщательно перемешайте, избегайте образования избыточных пузырьков из-за сильной вибрации.
2. Оптимизированный протокол велоспорта
(1) Стандартная процедура амплификации
Стадия реакции | Температура | Время | Цикл | |
1 | Обратная транскрипция | 50°Са | 1 | |
2 | Начальная денатурация | 95°С | 5 мин | 1 |
3 | Реакция амплификации | 95°С |
| 45 циклов |
60°Сб | 30 секс |
(2) Программа быстрой амплификации
| Стадия реакции | Температура | Время | Цикл |
1 | Обратная транскрипция | 50°Са | 2 мин | 1 |
2 | Начальная денатурация | 95°С | 2 сек | 1 |
3 | Реакция амплификации | 95°С |
| 45 циклов |
60°Сб | 13 секс |
Примечание:
а) Обратная транскрипция: Температура может быть выбрана 42°C или 50°C. на 10-15 минут.
б) Реакция амплификации: Температура регулируется в соответствии со значением Tm разработанных праймеров.
в) Получение сигнала флуоресценции: Пожалуйста, установите экспериментальную процедуру в соответствии с требованиями руководства по эксплуатации прибора.
3. Приложение оборудование
Оборудование с Rox:ABI 5700, 7000, 7300, 7700, 7900HT Fast, StepOne™, StepOne Plus™
Оборудование с Low Rox:ABI 7500, 7500 Fast, ViiA™7, QuantStudio™ 3 и 5, QuantStudio™ 6,7,12k Flex
Stratagene MX3000P™, MX3005P™, MX4000P™
Оборудование без Rox:
Био-Раd CFX96™, CFX384™, iCycler iQ™, iQ™5, MyiQ™, MiniOpticon™, Opticon®, Opticon® 2, Chromo4™
Эппендорф Mastercycler® ep realplex, realplex 2 с; Цягень Корбетт Ротор-Ген® Q, Ротор-Ген® 3000, Ротор-Ген® 6000
Roche Прикладная наука LightCycler® 480, LightCycler® 2.0, Lightcycler® 96
Термо Научный циклер PikoReal; Цефеида SmartCycler®; Иллюмина Эко ПЦР
Примечания
Пожалуйста, надевайте необходимые СИЗ, такие как лабораторный халат и перчатки, для обеспечения вашего здоровья и безопасности!
Пожалуйста, используйте расходные материалы без RNasefree. для эксперимент.
Этот продукт предназначен для исследовать использовать только!
Процедура лиофилизации
Этот набор можно использовать непосредственно для лиофилизации, или же на его основе можно дополнительно изучить вспомогательные вещества для различных праймеров.Стандартная процедура лиофилизации этого реагента выглядит следующим образом:
Процесс | температура | установить время | продолжительность | Вакуум мбар |
предварительная лиофилизация | -45℃ | 10 мин. | 60 мин. | —— |
Начальная стадия сублимационной сушки | -45 ℃ | 10мин | 60мин | 0,01 мбар |
-40 ℃ | 10мин | 900мин | 0,01 мбар | |
-35 ℃ | 10мин | 60мин | 0,01 мбар | |
-30 ℃ | 20мин | 60мин | 0,01 мбар | |
-20 ℃ | 20мин | 60мин | 0,01 мбар | |
0 ℃ | 20мин | 60мин | 0.01мбар | |
испытание на повышение давления | ||||
Аналитическая стадия сушки | 5 ℃ | 10мин | 20мин | 0,01 мбар |
10 ℃ | 10мин | 20мин | 0,01 мбар | |
15 ℃ | 10мин | 20мин | 0,01 мбар | |
20 ℃ | 10мин | 20мин | 0,01 мбар | |
25 ℃ | 10мин | 240мин | 0,01 мбар | |
испытание на повышение давления |
Оплата и безопасность
Ваша платежная информация обрабатывается надежно. Мы не храним данные кредитной карты и не имеем доступа к информации вашей кредитной карты.
Расследование
Вам также может понравиться
Часто задаваемые вопросы
Продукт предназначен только для исследовательских целей и не предназначен для терапевтического или диагностического использования на людях или животных. Продукты и содержимое защищены патентами, товарными знаками и авторскими правами, принадлежащими Yeasen Biotechnology. Символы товарных знаков указывают на страну происхождения, а не обязательно на регистрацию во всех регионах.
Для некоторых приложений могут потребоваться дополнительные права интеллектуальной собственности третьих лиц.
Йесен привержен этической науке, полагая, что наши исследования должны затрагивать важнейшие вопросы, обеспечивая при этом безопасность и соблюдение этических стандартов.