Описание
Hifair™ Superior Universal Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit (UDG Plus) — это набор для проведения мультиплексной количественной ПЦР на основе РНК в качестве матрицы. В процессе эксперимента обратная транскрипция и количественная ПЦР проводились в одной и той же пробирке, что упростило экспериментальную операцию и снизило риск контаминации.
В этом наборе первая цепь ДНК была эффективно синтезирована с помощью термостойкого Hifair™ Обратная транскриптаза и количественная амплификация с помощью UNICON™ HotStart Taq DNA Polymerase. Набор в основном содержит оптимизированный буфер MP, смесь ферментов. Буферный раствор уже содержит Mg2+ и dNTP Mix. Кроме того, добавлены факторы, которые могут эффективно ингибировать неспецифическую амплификацию ПЦР и повышать эффективность амплификации множественных реакций qPCR, что может обеспечить эффективность амплификации и проводить до множественной реакции амплификации. Система dUTP/UDG была добавлена для эффективного предотвращения риска аэрозольного загрязнения.
Особенность
Функции
1. Гхорошая универсальность: Подходит для количественной ПЦР-амплификации и обнаружения нуклеиновых кислот патогенных микроорганизмов, геномов человека, растений и других видов..
2. Высокая чувствительность: Тщательно оптимизированная буферная система повышает чувствительность обнаружения шаблонов с низкой концентрацией до 250 копий/мл..
3. система dUP/UDG: Внедрена система защиты от загрязнения dUTP/термолабильный UDG для эффективного снижения аэрозольного загрязнения продуктов, снижения ложных срабатываний и обеспечения достоверных результатов..
4. Поддерживатьing быстрая программа: совместимо с 40-минутной быстрой программой.
5. Суперстабильность: stablе при температуре 37℃ в течение 14 дней, повторное замораживание и оттаивание 10 раз.
Технические характеристики
Номер компонента | 16901ЭС60 / 16901ЭС80 / 16901ES92 |
Размер | 100 Т / 1000 Т / 10000 Т |
Компоненты
Имя | 16901ES60 (100т) | 16901ES80 (1000т) | 16901ES92 (10 000 т) | |
16901-А | 500 мкл | 5 мл | 50 мл | |
16901-Б | Hifair™ Смесь ферментов | 100 мкл | 1 мл | 10 мл |
Примечание: 1) 5×Hifair™ MP Buffer — это аббревиатура Hifair™ Улучшенный мультиплексный одношаговый буфер зондов ОТ-ПЦР, включающий dNTP, dUTP, Mg2+, стабилизаторы и многое другое.
2) Hifair™ Смесь ферментов в основном содержит Hifair™ обратная транскриптаза, UNICON™ HotStart Taq ДНК-полимеры, ингибитор РНКазы, и УДГаза и тд.
Хранилище
Продукт следует хранить при температуре -25℃ ~ -15℃ в течение 1 года. Следует избегать повторного замораживания и размораживания.
Инструкции
Объем (мкл) | Конечная концентрация | |
5×Hifair™ Буфер MP | 5 | 1× |
Hifair™ Смесь ферментов | 1 | - |
Смесь праймеров (10 мкМ) | 0,4 каждый | 0,16 мкМ |
Смесь зондов (10 мкМ) | 0,2 каждый | 0.08 мкМ |
1-5 | - | |
Свободная от РНКазы H2О | до 25 | - |
1. Состав реакции:
Примечание:Перед использованием обязательно тщательно перемешайте, избегайте образования избыточных пузырьков из-за сильной вибрации.
а) Концентрация праймера: Праймер смесь, включающая мультиплексную грунтовку, В зависимости от ситуации оптимальная концентрация праймера может составлять от 0,1 до 1,0 мкМ.
б) Концентрация зонда: смесь зондов, включающая мультиплексную маркировку зонда, различающуюся флуоресцентной группой, в зависимости от ситуации оптимальная концентрация зонда может составлять от 0,05 до 0.5 мкМ.
с) Разбавление шаблона: qPCR очень чувствителен, и рекомендуется разбавлять шаблон. Контрольное значение Ct подходит между 20 и 35.
г) Подготовка системы: снимите головку с фильтрующим элементом. Избегайте перекрестного загрязнения и аэрозольного загрязнения.
2. Оптимизированный протокол велоспорта
(1) Стандартная процедура амплификации
Стадия реакции | Температура | Время | Цикл | |
1 | Обратная транскрипция | 50°Са | 1 | |
2 | Начальная денатурация | 95°С | 5 мин | 1 |
3 | Реакция амплификации | 95°С | 15 сек | 45 циклов |
60°Сб | 30 секс |
Примечание:
а) Обратная транскрипция: Температура может выбирать 50°С или 55°С на 10-15 минут.
б) Реакция амплификации: Температура регулируется в соответствии со значением Tm разработанных праймеров.
в) Получение сигнала флуоресценции: Пожалуйста, установите экспериментальную процедуру в соответствии с требованиями инструмент руководство.
(2) Программа быстрой амплификации
| Стадия реакции | Температура | Время | Цикл |
1 | Обратная транскрипция | 50°С | 5 мин | 1 |
2 | Начальная денатурация | 95°С | 30 сек | 1 |
3 | Реакция амплификации | 95°С | 5 сек | 45 циклов |
60°С | 20 сек |
Примечание:Если фактический детектор qPCR поддерживает быструю амплификацию, пожалуйста, проведите предварительное тестирование для подтверждения.
3. Оборудование для нанесения
АБИ 5700, 7000, 7300, 7700, 7900HT Fast, StepOne™, StepOne Plus™,ABI 7500, 7500 Fast, ViiA™7, QuantStudio™ 3 и 5, QuantStudio™ 6,7,12k Flex;
Стратагена MX3000P™, MX3005P™, MX4000P™;
Био-Рад CFX96™, CFX384™, iCycler iQ™, iQ™5, MyiQ™, MiniOpticon™, Opticon®, Opticon® 2, Chromo4™;
Эппендорф Mastercycler® ep realplex, realplex 2 с;
Цягень Корбетт Ротор-Ген® Q, Ротор-Ген® 3000, Ротор-Ген® 6000;
Рош Прикладная наука LightCycler® 480, LightCycler® 2.0; Lightcycler® 96;
Термо Научный циклер PikoReal; Цефеида SmartCycler®; Иллюмина Эко ПЦР; СЛАН 96С, 96П.
Примечания
Пожалуйста, надевайте необходимые СИЗ, такие как лабораторный халат и перчатки, для обеспечения вашего здоровья и безопасности.!
Пожалуйста, используйте расходные материалы без RNasefree. для эксперимент.
Этот продукт предназначен для исследовать использовать только!
Оплата и безопасность
Ваша платежная информация обрабатывается надежно. Мы не храним данные кредитной карты и не имеем доступа к информации вашей кредитной карты.
Расследование
Вам также может понравиться
Часто задаваемые вопросы
Продукт предназначен только для исследовательских целей и не предназначен для терапевтического или диагностического использования на людях или животных. Продукты и содержимое защищены патентами, товарными знаками и авторскими правами, принадлежащими Yeasen Biotechnology. Символы товарных знаков указывают на страну происхождения, а не обязательно на регистрацию во всех регионах.
Для некоторых приложений могут потребоваться дополнительные права интеллектуальной собственности третьих лиц.
Йесен привержен этической науке, полагая, что наши исследования должны затрагивать важнейшие вопросы, обеспечивая при этом безопасность и соблюдение этических стандартов.