Фосфорилирование и дефосфорилирование белков в клетках являются регуляторными переключателями для многих важных биологических видов деятельности, таких как передача сигнала, пролиферация клеток, дифференцировка клеток и апоптоз. Поэтому контроль действия фосфатаз имеет важное физиологическое значение в исследовании белков. Ткани и клетки заполнены большим количеством проферментов, которые полностью активируются после лизиса и начинают переваривать окружающие белки. Поэтому защита состояния фосфорилирования белков чрезвычайно важна при изучении путей фосфорилирования белков и передачи сигнала.

Этот продукт представляет собой специальную смесь множественных ингибиторов фосфатазы, которая широко ингибирует неспецифические кислые/щелочные фосфатазы, а также специфические протеинтирозинфосфатазы, серин/треонинпротеинфосфатазы (PPA, PP2A) и т. д.

Продукт выпускается в форме пробирок А и В, и оба раствора могут воздействовать на различные типы фосфатаз, оказывая синергическое ингибирующее действие.

Пробирка A содержит кантаридин, бромтетрамизол и микроцистин-LR, поставляемые в виде готового к использованию раствора в ДМСО, ингибирующие L-изофермент щелочной фосфатазы и серин/треониновые протеинфосфатазы, такие как протеинфосфатаза 1 и 2A (PP1 и PP2A). Пробирка B содержит ортованадат натрия, молибдат натрия, тартрат натрия, имидазол и фторид натрия, поставляемые в виде готового к использованию раствора в ddH2O, ингибирующие тирозиновые протеинфосфатазы, кислые фосфатазы и щелочные фосфатазы.

Этот продукт можно использовать для WB, Co-IP, анализа Pull-down, IF, IHC, исследования киназы и различных других анализов.

Компоненты

Доставка и хранение

Продукт поставляется с пакетом льда и может храниться при температуре от -15 до -25°C.℃ в течение 1 года или хранить при температуре от 2 до 8℃ на 2 месяца.

Инструкции

Перед использованием достаньте продукт из холодильника и дайте ему нагреться до комнатной температуры. Добавьте раствор A и раствор B к образцу в соотношении 1:100 (об./об.) и тщательно перемешайте после каждого добавления.

1. Растворителем для пробирки A является ДМСО, а для пробирки B — ddH2O. ДМСО растворяется медленнее, поэтому для полного растворения раствора A требуется больше времени по сравнению с раствором B. При более низких температурах раствор A можно поместить в 25℃ водяная баня для растворения.

2.Смешивание растворов A и B перед использованием может легко привести к образованию осадка, поэтому этого метода следует избегать. Рекомендуется добавлять соответствующие количества раствора A и раствора B по отдельности к образцу.

3. Этот продукт может выдерживать 1% SDS, Triton, NP-40.

Примечания

1. Рекомендуется аликвотировать и заморозить 100× исходный раствор, чтобы избежать повторных циклов замораживания-оттаивания. Рабочие растворы следует готовить свежими.

2. Этот продукт не содержит ингибиторов протеазы. Соответствующие ингибиторы протеазы могут быть добавлены к образцу для анализа в соответствии с экспериментальными потребностями.

3. Растворителем для пробирки А является ДМСО, обращайтесь с ним осторожно.

4. ДТТ, ЭДТА, ЭГТА и т. д. могут повлиять на ортованадат натрия, содержащийся в этом продукте, поэтому обращайтесь с ними осторожно.

5. Пожалуйста, надевайте необходимые СИЗ, такие как лабораторный халат и перчатки, для обеспечения вашего здоровья и безопасности.！

6. Только для исследовательских целей!

Документы:

Паспорт безопасности

20109-A-MSDS-CN20250110

20109-B-MSDS-CN20250110

Руководства

20109_Руководство_CN20250107_RU

Цитаты и ссылки:

[1] Чжу Р., Ян Т., Фэн И. и др. Лечение мезенхимальными стволовыми клетками улучшает исходы у пациентов с COVID-19 посредством множественных иммуномодулирующих механизмов. Cell Res. 2021;31(12):1244-1262. doi:10.1038/s41422-021-00573-y(IF:25.617)

[2] Лю Х., Чжоу И., Цю Х. и др. Rab26 подавляет миграцию и инвазию клеток рака молочной железы посредством опосредования аутофагической деградации фосфорилированного Src. Cell Death Dis. 2021;12(4):284. Опубликовано 17 марта 2021 г. doi:10.1038/s41419-021-03561-7(IF:8.469)

[3] Чен З., Се Дж., Ли К. и др. Кластогенность 2-этилгексилдифенилфосфата (антипирена), активируемая ферментом CYP человека, в клетках млекопитающих. Загрязнение окружающей среды. 2021;285:117527. doi:10.1016/j.envpol.2021.117527(IF:8.071)

[4] Sun J, Guo Y, Fan Y, Wang Q, Zhang Q, Lai D. Снижение экспрессии IDH1 из-за хронического непредсказуемого стресса подавляет пролиферацию и ускоряет старение клеток гранулезы через сигнальные пути MAPK, активированные ROS. Free Radic Biol Med. 2021;169:122-136. doi:10.1016/j.freeradbiomed.2021.04.016(IF:7.376)

[5] Ян Б.И., Дэн Г.Ю., Чжао Р.З. и др. пористый Se@SiO2 nanoКатетер со сферическим покрытием ускоряет заживление ран простатической уретры, модулируя поляризацию макрофагов посредством ингибирования пути реактивных форм кислорода-NF-κB. Acta Biomater. 2019;88:392-405. doi:10.1016/j.actbio.2019.02.006(IF:6.638)

[6] Чжан И, Ли Г, Чжан Х, Линь Л. Глико-наноплатформа, поглощающая ROS, для синергетической антибактериальной и ранозаживляющей терапии бактериального кератита. J Mater Chem B. 2022;10(24):4575-4587. Опубликовано 22 июня 2022 г. doi:10.1039/d2tb00667g(IF:6.331)

[7] Дэн Л., Ли Х., Су Х. и др. Хлорзоксазон, низкомолекулярный препарат, усиливает иммуносупрессивную способность мезенхимальных стволовых клеток посредством модуляции фосфорилирования FOXO3. Cell Death Dis. 2020;11(3):158. Опубликовано 2 марта 2020 г. doi:10.1038/s41419-020-2357-8(IF:6.304)

[8] Чжан X, Цай Z, У M, Хуанфу X, Ли J, Лю X. Экзосомы, полученные из жировых стволовых клеток, восстанавливают нарушенный матриксный метаболизм разорванных сухожилий вращательной манжеты плеча человека, поддерживая гомеостаз тканей. Am J Sports Med. 2021;49(4):899-908. doi:10.1177/0363546521992469(IF:6.203)

[9] Gao C, Wang SW, Lu JC и др. Комплекс KSR2-14-3-3ζ служит биомаркером и потенциальной терапевтической мишенью при гепатоцеллюлярной карциноме, устойчивой к сорафенибу. Biomark Res. 2022;10(1):25. Опубликовано 25 апреля 2022 г. doi:10.1186/s40364-022-00361-9(ЕСЛИ:6.148)

[10] Чэнь Л., Сюй В., Ян Цюй и др. Императорин облегчает раковую кахексию и предотвращает атрофию мышц посредством прямого ингибирования STAT3. Pharmacol Res. 2020;158:104871. doi:10.1016/j.phrs.2020.104871(IF:5.893)