Натуральный белок А — это белок поверхности клеточной стенки, обнаруженный в Staphylococcus aureus, он похож на белок G, выделенный из род Г или С Стрептококк, связывают большинство млекопитающий IgG к взаимодействующий в первую очередь с  ФК область иммуноглобулина (Ig), но отличаются по специфичности связывания. Его можно использовать для разделения и очистки различных антител (моноклональных антител и поликлональных антител). Протеин A и Протеин G отличаются по своим свойствам связывания с различными подклассами иммуноглобулинов (подробности см. в Приложении 1).
Этот продукт использует генетически модифицированный белок А, который не только сохраняет свои свойства сродства к Ig, но и удаляет неосновной связывающий домен самого природного белка, чтобы уменьшить неспецифическое связывание. Смола SuRi rProtein A Agarose Resin, которая представляет собой высокосшитый агарозный гель в качестве матрицы и модифицированный устойчивый к щелочи рекомбинантный белок А в качестве лиганда, обладает высокой физико-химической стабильностью. Высокоочищенные антитела можно получить из асцитов, сыворотки и образцов культуральной среды с помощью одноэтапной аффинной хроматографии с этим продуктом, который удобен в использовании и широко применяется.

Компоненты

Технические характеристики

Перевозки и Хранилище

Продукция поставляется с пакетом со льдом.   Его можно стабильно хранить при температуре 2~8℃. на 5 лет.

Инструкции

1. Приготовление буфера

Рекомендуется следующее: Перед использованием буферные растворы следует профильтровать через мембранный фильтр с размером пор 0,22 мкм или 0,45 мкм. Буфер балансировки/связывания/промывки: 0,15 М NaCl, 20 мМ Na2 HPO4, рН 7,0

Элюирующий буфер: 0,1 М глицин, pH 3,0

Нейтрализующий буфер: 1 MTris-HCl, pH 8.5

2. Подготовка образца

Гарантировать что  образец решение имеет  соответствующий ионный сила и рН до загрузка  столбец, или к разбавление образца сыворотки, асцита или раствора клеточной культуры буфером связывания/промывания или путем диализа образца с буфер для связывания/промывки.

3. Упаковка колонны

Загрузите SuRi rProtein А Агарозную смолу в подходящую хроматографическую колонку, следя за тем, чтобы не было пузырьков.

4. Очистка образца

1) Баланс: хроматографическая колонка является сбалансированный с обязательный Буфер из 5 раз  столбец объем, так что упаковка находится в той же буферной системе, что и целевой белок и играет роль защиты белка.

2) Образец загрузка: The образец был загружен к  хорошо сбалансированный rБелок А Агароза Смола к гарантировать полный контакт между целевым белком и смолой, улучшают восстановление скорость целевого белка и собрать сточные воды для быть проверенным.

3) Стирка: Стирать с в 10-15 раз больше столбец объем принадлежащий стирка Буфер, удалять  нечистота белок пока не специально адсорбируется, собирает промывочный раствор.

4) Элюирование: Элюция с 5-10 раз столбец объем принадлежащий элюирование Буфер, собирать элюент, что является,  цель белок компонент.

5) CIP-очистка и сохранение: В целом использовать 0,1-0,5 М NaOH больше 3CV, и  контакт время является 15 мин; Затем промыть балансировочным раствором 5CV до нейтральной реакции. Наконец, это сбалансированный с 20% этанол 5 раз столбец объем, и затем хранится  в 20%  этанол  из   такой же  объем  в  4°С  к  предотвращать    упаковка  от  существование загрязнены бактериями.

5. SDS-PAGE обнаружение

The образцы полученный в  очищение процесс (включая оригинальный образцы, сточные воды компоненты, стирка и компоненты элюирования и т. д.) были обнаружены с помощью SDS-PAGE для определения эффекта очистки.

Примечания

1. Не охлаждайте продукт.
2. rProteinAAgarose Resin необходимо полностью перемешаь несколько раз перед использованием, чтобы агарозная смола равномерно перемешалась.
3. Во время всех операций образец необходимо хранить при температуре 4°C или на льду.
4. Для вашей безопасности и здоровья, пожалуйста, надевайте лабораторный халат и одноразовые перчатки во время работы.
5. Только для исследовательских целей.

Прилагаемая таблица 1: Сводка по связывающей способности of белки A и G к Ig в разных разновидность

SuRi rProtein Агароза Смола