UltraNuclease, также известная как нерестриктивная эндонуклеаза, нуклеаза широкого спектра действия, является неспецифической эндонуклеазой, полученной из Serratia Marcescen, которая гидролизует внутренние фосфодиэфирные связи между любыми нуклеотидами в нуклеиновых кислотах с образованием 5'-монофосфатных олигонуклеотидов длиной 2-5 оснований. Она может разрушать ДНК и РНК в различных формах (двухцепочечные, одноцепочечные, линейные, кольцевые, нативные или денатурированные) в очень широком диапазоне условий (6 M мочевины, 0,1 M гуанидина HCl, 0,4% Triton X-100, 0,1% SDS, 1 мМ ЭДТА, 1 мМ PMSF) и широко используется для удаления нуклеиновых кислот из биологических продуктов. UltraNuclease также может быть впоследствии удалена соответствующими методами.

В этом наборе используется принцип иммуноферментного анализа с двойным сэндвичем-антителами (сэндвич-ИФА) для обнаружения остатков денатурированной и неденатурированной UltraNuclease. Сначала покройте микропланшет поликлональным антителом кролика против UltraNuclease, чтобы сформировать твердофазное антитело. Затем добавьте стандарт UltraNuclease и тестовый образец в микропланшет с твердофазными антителами, затем добавьте поликлональное антитело против UltraNuclease, меченное биотином, и, наконец, добавьте стрептавидин, меченный пероксидазой хрена (SA-HRP), чтобы сформировать комплекс антитело + антиген + антитело-биотин + SA-HRP. Затем к комплексу добавляли субстрат TMB для наблюдения за цветной реакцией после промывки комплекса. TMB превращается в синий под действием фермента HRP и, наконец, превращается в желтый в присутствии кислоты, а оттенок цвета положительно коррелирует с количеством UltraNuclease в образце.

Диапазон количественного определения данного набора составляет 0,047–3 нг/мл; нижний предел обнаружения — 23,5 пг/мл.

Особенность

• Высокая чувствительность: обнаружение всего лишь 23 пг/мл остатков UltraNuclease в производственных и конечных биологических образцах.
• Гарантирует точность: остатки UltraNuclease могут быть точно обнаружены с извлечением 80%-110%.
• Специфичность: Совместимо с YEASEN UltraNuclease и позволяет точно определять остатки.
• Стабильный: разница между партиями незначительна, свойства набора не изменяются при температуре 37℃ в течение 6 дней.
• Простой сбор сигнала: с помощью системы биотин-стрептавидин сигнал можно стабильно усиливать.
• Полный комплект: все основные компоненты входят в комплект, он экономичен в использовании.

Приложение

• Тест на остаточную ультрануклеазу в биологических продуктах

Спецификация

Компоненты

Доставка и хранение

Набор UltraNuclease ELISA поставляется с пакетом со льдом и может храниться при температуре от 2°C до 8°C. Нераспечатанный продукт действителен в течение одного года. После вскрытия реагента он действителен в течение полугода. Никогда не замораживайте этот продукт.

Хранение приготовленных реагентов:

1. Разбавленный промывочный буфер и буфер для разбавления можно хранить при температуре 2°C ~ 8°C в течение 1 недели.

2. Стандарт 36701-C — жидкий и хранится при температуре 2°C ~ 8°C в течение 1 года.

3. Подготовленные антитела для обнаружения и стоп-буфер можно хранить при температуре от 2°C до 8°C в течение 1 месяца.

Цифры

• Демонстрация специфичности

Рисунки 1. Специфичность набора UltraNuclease ELISA показана на рисунке выше.

8 образцов-имитаторов были оценены для неспецифической реакции с антителами в наборе. Не было никакой значительной разницы между 8 образцами и отрицательным образцом. （*: Значительное отличие от отрицательного образца；NS: Нет существенного отличия от отрицательного образца）

• Точный дисплей

А)

Б)

Рисунки 2. Точность ИФА UCF.ME™ UltraNuclease была проанализирована, как указано выше. схема.

6 дубликатов были протестированы при каждой концентрации на стандартной кривой, и все CV% были ниже 5% (рисунок 2A). 3 аналитика провели эксперимент UCF.ME™ UltraNuclease ELISA, и CV% были ниже 15% (рисунок 2B).

• Проверка точности

А)

Б)

Рисунки 3. Точность UCF.ME™ Ультрануклеазный ИФА был анализировали по следующей схеме.

UltraNuclease добавляли в лизирующие растворы клеток 5 мкг/мл (HEK293, E.coli, CHO и Vero) независимо друг от друга с конечной концентрацией 1,5 нг/мл. Точность в различных образцах клеток была выше, чем у других поставщиков (рисунок 3A). UltraNuclease добавляли в реальный образец (предоставленный клиентом) и последовательно разбавляли в 2 раза от 3 нг/мл до 0,093 нг/мл. Восстановление после добавления составило от 80% до 110% (рисунок 3B).