Описание
РНК-полимераза T7 использует двухцепочечную ДНК, содержащую последовательность промотора T7 (5'-TAATACGACTCACTATAG*-3') в качестве шаблона и NTP в качестве субстратов для синтеза РНК, комплементарной обратной цепи ДНК ниже промотора. Как линейная двухцепочечная ДНК с тупыми концами, так и 5'-выступы могут служить в качестве субстратов-матриц для РНК-полимеразы T7, то есть линеаризованные плазмиды или продукты ПЦР могут использоваться в качестве шаблонов для синтеза РНК in vitro.
В этом наборе используется принцип иммуноферментного анализа сэндвичем (ELISA) для обнаружения остаточной РНК-полимеразы Т7. Стандарты РНК-полимеразы Т7 и тестовые образцы добавляются в лунки микропланшета, предварительно покрытые антителами к РНК-полимеразе Т7 (36705-A). Затем добавляются разведенные антитела для обнаружения РНК-полимеразы Т7, меченные биотином (36705-C), а затем стрептавидин-HRP (SA-HRP) (36705-D), образуя комплекс антитело + антиген + антитело-биотин + SA-HRP. После промывки для проявления цвета добавляется субстрат ТМБ (36705-H). ТМБ катализируется HRP, переходя из бесцветного в синий и, наконец, в желтый при добавлении стоп-раствора (36705-I). Интенсивность желтого цвета положительно коррелирует с количеством РНК-полимеразы Т7, обнаруженной в образце.
Компоненты
| Нет. | Имя | 36705ES48 | 36705ES96 |
| 36705-А | Микротитрационные полоски, покрытые РНК-полимеразой против антител к Т7 | 48 Т | 96 Т |
| 36705-Б* | Стандарт: РНК-полимераза Т7 | 1 флакон | 2 флакон |
| 36705-С | Обнаружение Антитело：Биотин-спрягаемый Антитела | 60 мкл | 120 мкл |
| 36705-Д | Стрептавидин-HRP | 30 мкл | 60 мкл |
| 36705-Е | Буфер для разбавления 1 | 25 мл | 45 мл |
| 36705-Ф | Концентрация промывочного буфераскорость (20×) | 25 мл | 50 мл |
| 36705-Г | Буфер для разбавления 2 | 15 мл | 30 мл |
| 36705-Н | Субстрат ТМБ | 8 мл | 15 мл |
| 36705-I | Стоп-решение | 5 мл | 10 мл |
| 36705-J | Запайщик пластин | 3 шт. каждый | 5 каждый |
*Стандарт 36705-B представляет собой лиофилизированный порошок.
Совместимость с РНК-полимеразой Т7: 10625, 10628 и 10629.
Данные проверки
Таблица 1. Диапазон линейности: 1～32 нг/мл ，R2=0,999 ，Коэффициент вариации≤5%。
| Стд | Конц.（ нг/мл) | СРЕДНИЙ（ нг/мл) | Восстановление（%） | РЕЗЮМЕ% |
| Стд1 | 32 | 31.965 | 99,9% | 2.2% |
| Стд2 | 16 | 16.070 | 100,5% | 5.0% |
| Стд3 | 8 | 7.812 | 97,7% | 2.1% |
| Стд4 | 4 | 4.192 | 104,8% | 0,8% |
| Стд5 | 2 | 2.020 | 101,8% | 3,5% |
| Стд6 | 1 | 1.173 | 117,3% | 0.0% |
| NC | 0 | / | / | / |
Таблица 2. Высокая специфичность
| Название белка | Конц. | Обнаружено или нет |
| Ппозитивный Сконтроль | 1 нг/мл | Обнаружено |
| Нотрицательный Сконтроль | 0 нг/мл | й |
| Ультрануклеаза | 10 мкг/мл | й |
| Соль Активная ультрануклеаза | 10 мкг/мл | й |
| ДНКаза я | 10 мкг/мл | й |
| Ингибитор мышиной РНКазы | 10 мкг/мл | й |
| Фермент, блокирующий вирус коровьей оспы | 10 мкг/мл | й |
| Неорганическая пирофосфатаза | 10 мкг/мл | й |
| мРНК Cap 2 ´-O-метилтрансфераза | 10 мкг/мл | й |
| 1%БСА | 10 мг/мл | й |
Таблица 3. LOQ: Предел количественного определения для этого продукта определяется путем разбавления самой низкой точки концентрации стандартной кривой, где коэффициент вариации (CV) при самой низкой концентрации составляет менее 20%. Это определяется как предел количественного определения, который составляет 1 нг/мл.
| Стд6 теоретическое значение (нг/мл) | Среднее значение теста Std 6 (нг/мл) | Тest повторения | РЕЗЮМЕ% | Восстановление |
| 1 | 0,858 | 24 | 12.6% | 85,8% |
Таблица 4. Уровень детализации: Предел обнаружения этого продукта определяется как стандартная концентрация, соответствующая среднему значению обнаружения отрицательного контроля (NC) плюс двукратное стандартное отклонение. Измерив 24 стандарта NC, вычислив среднее значение и стандартное отклонение, предел обнаружения определяется как 0,318 нг/мл.
| Среднее значение（ОД） | СД（ОД） | Среднее значение +2SD (OD) | Среднее значение +2SD (нг/мл) |
| 0,0527 | 0,0038 | 0,0604 | 0,3176 |
Доставка и хранение
Хранить при температуре 2-8°C. Срок годности — 1 год в закрытой упаковке и 6 месяцев после вскрытия.
После получения товара проверьте комплектность всех компонентов и немедленно поместите его на хранение при соответствующей температуре хранения.
Оплата и безопасность
Ваша платежная информация обрабатывается надежно. Мы не храним данные кредитной карты и не имеем доступа к информации вашей кредитной карты.
Расследование
Вам также может понравиться
Часто задаваемые вопросы
Продукт предназначен только для исследовательских целей и не предназначен для терапевтического или диагностического использования на людях или животных. Продукты и содержимое защищены патентами, товарными знаками и авторскими правами, принадлежащими Yeasen Biotechnology. Символы товарных знаков указывают на страну происхождения, а не обязательно на регистрацию во всех регионах.
Для некоторых приложений могут потребоваться дополнительные права интеллектуальной собственности третьих лиц.
Йесен привержен этической науке, полагая, что наши исследования должны затрагивать важнейшие вопросы, обеспечивая при этом безопасность и соблюдение этических стандартов.