(1) В: В чем разница между трансфекцией ДНК и трансфекцией siRNA?

A: 1. Поскольку существует всего 20 пар оснований, siRNA намного меньше ДНК, в ней тысячи или даже более 10 000 пар оснований.

2. Реагенты и методы трансфекции, используемые для трансфекции ДНК, не подходят для трансфекции siRNA.

3. Трансфекция siRNA предъявляет более строгие требования к цитотоксичности реагентов для трансфекции, чем трансфекция ДНК.

(2) В: Нужно ли менять реагент для трансфекции после трансфекции?

A: При изменении среды можно выделить две ситуации:

1. Если перед трансфекцией среда не менялась, ее следует заменить примерно через 6 часов после трансфекции, чтобы обеспечить наличие питательных веществ, необходимых для роста клеток;

2. Если перед трансфекцией произошли изменения, среду можно заменить обычным образом, если в ней недостаточно питательных веществ.

(3) В: Какова эффективность реагента трансфекции ПЭИ для трансфекции siRNA и плазмиды?

A: Этот трансфекционный реагент PEI специально разработан для siRNA, и трансфекция плазмидами не рекомендуется.

(4) В: Можно ли замораживать реагент для трансфекции?

A: Не замораживайте, так как реагент трансфекции является катионным реагентом трансфекции PEI. Замораживание при низкой температуре разрушит активность реагента трансфекции PEI. Поэтому лучше всего хранить его при температуре 4 градуса, чтобы поддерживать наилучшую эффективность трансфекции.

(5) В: Как повысить эффективность трансфекции?

A: a: Плотность клеток во время трансфекции 30%-50%.

б: Для разбавления siRNA и липосом во время трансфекции следует использовать среду Opti-MEM без сыворотки.

в: Среду можно менять через 4–6 часов после трансфекции.

[1] Чжан И., Ху Р., Си Б., Не Д., Сюй Х., Лю А. Механизмы высвобождения лигандов NKG2D, связанных со старением, и иммунного ускользания, вызванного химиотерапией в клетках нейробластомы. Front Cell Dev Biol. 2022;10:829404. Опубликовано 2 марта 2022 г. doi:10.3389/fcell.2022.829404(IF:6.684)

[2] Cui B, Wang Y, Jin J и др. Ресвератрол лечит фотостарение, вызванное УФ-B, с помощью экспрессии анти-ММП, благодаря противовоспалительным, антиоксидантным и антиапоптотическим свойствам, и лечит фотостарение, повышая экспрессию VEGF-B. Oxid Med Cell Longev. 2022;2022:6037303. Опубликовано 4 января 2022 г. doi:10.1155/2022/6037303(IF:6.543)

[3] Лю И., Цзэн И., Си Х.Б., Тан Л., Се Х.К., Шен Б. Экзосомы, полученные из стволовых клеток, полученных из мочи человека, с повышенной экспрессией miR-140-5p, облегчают остеоартрит коленного сустава посредством снижения регуляции VEGFA в модели крысы. Am J Sports Med. 2022;50(4):1088-1105. doi:10.1177/03635465221073991(IF:6.203)

[4] Чжан ЗД, Вэнь Б, Ли ДЖ и др. Фосфорилирование фасцина треонина 403, опосредованное серин/треониновой киназой 2 AKT, регулирует прогрессирование рака пищевода. Int J Biochem Cell Biol. 2022;145:106188. doi:10.1016/j.biocel.2022.106188(IF:5.085)

[5] Тан С., Чжоу И., Чжао Х. и др. Комплексный анализ транскриптома гипоталамуса выявляет гены, связанные с нарушениями полового развития у свиней. J Steroid Biochem Mol Biol. 2021;210:105875. doi:10.1016/j.jsbmb.2021.105875(IF:4.294)

[6] Niu M, Yi M, Dong B, Luo S, Wu K. Повышение активности оси STAT1-CCL5 является биомаркером рака толстой кишки и способствует пролиферации клеток рака толстой кишки. Ann Transl Med. 2020;8(15):951. doi:10.21037/atm-20-4428(IF:3.297)