D-люциферин является распространенным субстратом для фермента люциферазы Люцифераза и широко используется в биотехнологии, особенно в визуализации in vivo in vivo. Механизм действия заключается в том, что люциферин (субстрат) может окисляться для испускания света в присутствии АТФ и люциферазы. При избытке люциферина количество производимых квантов света положительно коррелирует с концентрацией люциферазы (см. рисунок ниже). После трансфекции клеток плазмидой, несущей ген, кодирующий люциферазу (Luc), и введения ее в подопытных животных, таких как мыши и крысы, люциферин вводится в клетки, и изменения интенсивности света обнаруживаются с помощью BLI, что позволяет в реальном времени контролировать состояние прогрессирования заболевания или терапевтическую эффективность препарата, например. Влияние АТФ на эту систему реакций также может быть использовано для индикации энергии или жизненно важных показателей на основе изменений интенсивности биолюминесценции.

D-люциферин также широко используется в исследованиях in vitro, включая анализ уровня люциферазы и АТФ, анализ гена-репортера, высокопроизводительное секвенирование и различные анализы на загрязнение. В настоящее время на рынке представлены три формы продукта: D-люциферин (свободная кислота), натриевая соль D-люциферина и калиевая соль D-люциферина. Основное различие между этими тремя продуктами заключается в их характеристиках растворимости; D-люциферин (свободная кислота) слабо растворим в воде и буферных системах, если только он не растворим в слабых основаниях, таких как растворы NaOH и KOH. D-люциферин в форме натриевых и калиевых солей очень легко и быстро растворяется в воде или буферах, прост в использовании, а растворители нетоксичны, что делает его особенно подходящим для экспериментов in vivo. При формулировании в виде жидкостей между тремя продуктами нет существенной разницы для большинства применений.

Функции

• Никакого излучения, практически безвреден для живых организмов.
• Биолюминесценция, без источника возбуждающего света.
• Настолько чувствителен, что его можно обнаружить в нескольких сотнях клеток.
• Хорошая проникающая способность, глубина обнаружения тканей составляет 3–4 см.
• Высокое отношение сигнал/шум, сильный флуоресцентный сигнал и хорошая помехоустойчивость.

Приложения

• В эксперименте по опухолеобразованию на голых мышах рост опухоли наблюдался без инвазии в режиме реального времени, без измерения степени удаления опухоли.
• Чтобы проверить влияние введения на рост опухоли или метастазирование, субстрат флуоресцеина может быть полностью выведен в течение 3 часов, без помех для эксперимента с препаратом.
• Выявлены локализация и распределение чужеродных клеток в организме животных.
• Целевой ген или промотор целевого гена сливается с геном люциферазы для обнаружения изменений в экспрессии гена во время лечения лекарственными средствами или прогрессирования заболевания.
• Мониторинг трансплантации, выживания и пролиферации стволовых клеток; Отслеживание распределения и миграции стволовых клеток in vivo.

Технические характеристики

Компоненты

Доставка и хранение

Транспортируется в пакетах со льдом; хранится при температуре -20°C в сухом и защищенном от света месте; годен для 1 год.

Цифры

Документы:

Паспорт безопасности

Руководства

Цитаты и ссылки:

[1] Цзи Ч., Чжао М., Ван Ч. и др. Биосовместимые наночастицы тантала как радиосенсибилизаторы для повышения эффективности терапии первичной опухоли и метастатических сторожевых лимфатических узлов [опубликовано онлайн до выхода в печать, 6 июня 2022 г.]. ACS Nano. 2022;10.1021/acsnano.2c02314. doi:10.1021/acsnano.2c02314(IF:15.881)
[2] Miao Z, Tian W, Ye Y и др. Hsp90 индуцирует Acsl4-зависимый глиомный ферроптоз посредством дефосфорилирования Ser637 в Drp1. Cell Death Dis. 2022;13(6):548. Опубликовано 13 июня 2022 г. doi:10.1038/s41419-022-04997-1(IF:8.469)
[3] Чжан Л., Сан И., Чжан XX и др. Сравнение мезенхимальных стволовых клеток CD146 +/- в улучшении преждевременной недостаточности яичников. Stem Cell Res Ther. 2022;13(1):267. Опубликовано 21 июня 2022 г. doi:10.1186/s13287-022-02916-x(IF:6.832)
[4] Fu RJ, He W, Wang XB и др. Поддерживаемое DNMT1 гиперметилирование фактора Крюппеля 5 участвует в прогрессировании светлоклеточного почечно-клеточного рака.Cell Death Dis. 2017;8(7):e2952. Опубликовано 27 июля 2017 г. doi:10.1038/cddis.2017.323(IF:5.965)
[5] Xu P, Wu L, Cao M и др. Идентификация компонентов комплекса MBW, участвующих в биосинтезе флавоноидов в лесной землянике. Front Plant Sci. 2021;12:774943. Опубликовано 8 ноября 2021 г. doi:10.3389/fpls.2021.774943(IF:5.754)
[6] Бай С., Тао Р., Инь Л. и др. Два белка B-box, PpBBX18 и PpBBX21, антагонистически регулируют биосинтез антоцианов посредством конкурентной ассоциации с УДЛИНЕННЫМ ГИПОКОТИЛЕМ 5 Pyrus pyrifolia в кожуре плода груши. Plant J. 2019;100(6):1208-1223. doi:10.1111/tpj.14510(IF:5.726)
[7] Yang SX, Wu TT, Ding CH, Zhou PC, Chen ZZ, Gou JY. SAHH и SAMS образуют комплекс донора метильной группы с CCoAOMT7 для метилирования фенольных соединений. Biochem Biophys Res Commun. 2019;520(1):122-127. doi:10.1016/j.bbrc.2019.09.101(IF:2.705)