• Kolitmodell
  • Djurmodell av akut pankreatit
  • Diabetessjukdomsmodell
  • Modell för reumatoid artrit
  • Hypertoni modell

Kolitmodellering

jag. Historia av DSS gjutning

På presentera, det är olika djur modeller allmänt begagnad till studera de etiologi och patogenes av inflammatorisk tarm sjukdom (IBD) och för att testa effekten av nyutvecklade läkemedel etc. I synnerhet dextransulfatnatriumsaltet (DSS) MW:36000~50000) modell av ulcerös kolit (UC) är de mest allmänt begagnad. I särskild, de Dextran Sulfat Natrium Salt (DSS MW:36000~50000) modellen för ulcerös kolit (UC) är den mest använda.

II. Egenskaper av de UC modell konstruerad av DSS

Två modeller av akut och kronisk kolit kan göras genom att ge djur olika koncentrationer av DSS (MW:36 000~50 000) vattenlösning fritt, beroende på doseringstidpunkten och doseringscykeln. Symptomen på detta modell var mycket liknande till dessa av mänsklig UC, som var diarre, slemliknande avföring, fekal ockult blod, blodig avföring med blotta ögon, viktminskning, nedsatt rörlighet och försämring av pälsfärgen.

Tabell 1 Histologiska egenskaper av DSS kolitmodell

DSS Kolit Modell Kategorier

Akut fas kolit modell

Kronisk etapp kolit modell

histologiska ändra

Kolon trängsel, ödem, förkortning, sprödhet, ökade vikt till längd förhållande

Signifikant förkortning av de kolon

Utveckling av varierande grader av kolon sår

Slemhinna förtjockning, förstorad lymfa noder

Slemhinna ödem, kupade cell förlust, krypta svullnad avbrott

Frånvaro av kupade celler, frånvaro av krypta fossa

De slemhinna och submucosa visa varierande

grader av inflammatorisk cell infiltration, skada på epitelceller

Adenomatösa polyper, tumörliknande förändringar i a små procentsats av djur

III. Fördelar av de DSS UC modell

1, de symptomatisk manifestationer är ytterst liknande till mänsklig UC, som burk vara begagnad till studera de mekanism av förekomst och utveckling av akut och kronisk kolit, såväl som för studier av läkemedelseffekt.

2.Modelleringen metod av gratis drickande DSS vattenhaltig lösning är enkel och lätt, med hög modellering hastighet och hög repeterbarhet.

3.Med olika koncentrationer av DSS, doseringstider och doseringsfrekvenser kan två modeller av kolit, akut och kronisk, realiseras. lång varaktighet av de modell reflekterar de dynamisk behandla av akut till kronisk omvandling och löser de problem av kronisering och underhåll av UC, vilket är ojämförligt med många tidigare modeller.

4, en mängd olika släkten kan modelleras: möss, råttor, zebrafiskar, grisar, fruktflugor och så vidare.

5. I kombination med azoximetan (AOM) (Cat # 60751ES) kan den användas för att inducera kolitassocierad cancer (CAC) i en djurmodell, som framgångsrikt simulerar processen med IBD-inducerad CAC.

IV. Exempel av DSS UC modellkonstruktion

1. Musmodellering

    1) BALB/c möss, kvinnlig, 6-8 veckor, 25 g;

    2)3 % DSS drickande vatten var konfigurerad med steril vatten och sedan filtreras genom a 0,22 μm membran;

    3) Den möss var ges a kontinuerlig dryck för 7 dagar och HAN färgade;

    4) Experimentell resultat: de vävnader av möss var ödematösa och överbelastad, och det fanns uppenbar inflammation.

    Fikon. 1 HAN färgning resultat av DSS akut kolit avsnitt

    2. Modellering av zebrafisk

    1) Zebrafisk embryon var odlas i E3 embryomedium innehållande metylblått på 28,5 ℃ tills 1 dpf;

    2) 0,5 % DSS drickande vatten var konfigurerad med E3 medium och sedan filtreras igenom a 0,22 μm filtermembran;

    3) Zebrafisk var behandlas med 0,5 % DSS från 3 dpf till 6 dpf.

    4) Experimentell resultat: alla 0,5 % DSS läkemedelsbehandlingar resulterade i mörkläggning av zebrafisk lever färg och inflammatorisk stress.

    Fig. 2 DSS orsakar ett inflammatoriskt svar i zebrafisklevern

    3. Grisformning

    1) Fyra till fem dag gammal Yorkshire smågrisar, experimentell grupp: perfuserad med DSS, kontrollera grupp: perfuserad med salin

    2) Dagligen intag av 1,25 g DSS/kg per smågris, infunderas för 5 dagar

    3) Experimentell resultat: Efter instillation av DSS, de plasma D-mannitol upptag hastighet av de experimentell grupp var väsentligt högre än att av de kontrollera grupp, indikerar att de smågrisar visade symtom av enterit synlig till de naken öga.

    Fig. 3 DSS inducerade högre koncentration av D-mannitol hos smågrisar än hos kontroller

    4.Drosophila modellering

    1) 5 till 10 dagar gamla Drosophila honor placerades i en tom flaska innehållande 2,5 x 2,5 x 1 cm flaskor i kultur med 3,75 cm kromatografipapper (Fisher) matningsmedia fuktat med 5 % sackaroslösning;

    2) Matningsmedier innehållande olika komponenter bereddes separat med 5 % sackaroslösning, och kategorierna inkluderade 3 % DSS vardera och 25 μg/ml bleomycin;

    3) Drosophila placerades i kolvar innehållande kromatografipapper och inkuberades vid 29°C under tre dagar, under vilken tid de överlevande Drosophila överfördes dagligen till tomma kolvar innehållande färskt medium;

    4) Experimentella resultat: DSS har en dödlig funktion och DSS inducerar proliferation av ISC-prekursorceller.

    Fig. 4 DSS inducerar proliferation av ISC-prekursorceller i Drosophila

    IV. Hur till utvärdera de framgång av modellering?

    1. Sjukdomsaktivitet Index (DAI göra)

      Tre aspekter var bedömas och gjorde mål: vikt, fekal konsistens, och fekal ockult blod, och de DAI göra var de belopp av de tre indikatorerna.

      Tabell 2 DAI poängregler

      poäng (av elevens

      arbete)

      Procentsats av vikt förlust

      fekal viskositet

      fekal ockult blod

      0

      0

      normalitet

      negativa

      1

      1-5 %

      mjuk pall

      ljusblå

      2

      5-10 %

      slemliknande pall

      blå (färg)

      3

      10-20 %

      lösa, flytande avföring

      Djupblå

      4

      >20 %

      /

      Blodig avföring för blotta ögat

      2.Scoring av histologisk förändringar

      Histologisk förändringar var gjorde mål som de belopp av de ovan, och lymfa nod bildning var inte gjorde mål i de akut kolit modell. Standardmetoden för histologisk analys var HE-färgning (Cat. NO: 60524ES60).

      Tabell 3 Histologiska förändringspoäng

      göra (av stud nt's arbete

      )

      Sår (antal)

      Epitelial cellförändringar

      inflammatoriskt infiltrat

      Lymfkörtlar (nr.)

      0

      0

      Normal

      Ingen

      Ingen

      1

      1

      Frånvaro av kupade celler

      Perikryptal infiltration

      1

      2

      2

      Stor radering av kupade celler

      Infiltration av de muskulös lager av de slemhinna

      2

      3

      3

      krypta fossa

      Generaliserad infiltration av muskulös lager av de slemhinna med

      förtjockning av slemhinnan

      3

      4

      >3

      Stor frånvaro eller polypoid

      regeneration av kryptan fossa

      submukosal infiltration

      >3

      3. Kolon längd

      Kolon längd förkortning var detekterbar på dag 8 i de akut kolit modell; det var mer uttalad i de kronisk kolit modell.

      4.Sammanfattning

      DSS UC djur modell konstruktion skall vara föregått av förtester till känsla de modellering villkor, och det är rekommenderad att förtester genomförs med 8-10 prover i varje grupp, och en kontrollgrupp bör inrättas. Vanligtvis, utseendet på viktminskning, lös avföring, diarré, blodig avföring eller fekalt ockult blod, sårbildning kan betraktas som att DSS-läkemedlet är effektivt och modelleringen är framgångsrik.

      VI.Yeasen DSS Modellering Fall Studera

      Yeasen DSS (Katt. Inga: 60316ES, MW:36000~50000) är allmänt begagnad i de konstruktion av UC modeller. Yeasen

      DSS kan framgångsrikt bygga UC-modeller med resultat jämförbara med importerade varumärken.

      Mål: Till jämföra de utsträckning av ändra i kropp vikt av möss påverkad av DSS-inducerad akut kolit från olik tillverkare.

      Mus typ: BALB/c-möss;

      Modellering protokoll: 2 % DSS koncentration, kontinuerlig fritt flöde drickande för 1 vecka.

      Slutsats: De trend av kropp vikt förlust inducerad av Yeasen DSS i möss var konsekvent med att av de importeras stämpla.

      Och vi hittade att de akut kolit modellering tid är huvudsakligen koncentrerad i om 7 dagar, de effekt är mycket signifikant. De följande tabell är datafeedback från vissa kunder.

      Tabell 4 Modellering av olika typer av enterokolit med DSS

      Forma

      Mall

      Gjutning Lösningar

      Gjutning resultat

      Rekommendationer

      akut kolit

      BALB/c möss, kvinnlig, 6-8 veckor,

      25 g

      3%-5% DSS för 7 dagar av kontinuerlig fritt flytande konsumtion

      Dag 5 presentation med förkortas kolon längd, HE-färgning och markerad inflammation

      Snabb modelleringshastighet och kort tid. Överensstämmer med egenskaper av de akut kolit

      modell

      C57BL/6 möss, manlig, 8 veckor, 20 g

      3%-5% DSS genom sondmatning, kontinuerlig administration

      Dag 5 presentera, förkortas kolon längd, viktminskning, blod i avföringen, diarré

      Hög modellering hastighet och kort

      tid. Konsekvent med akut kolit modellens egenskaper

      kronisk kolit

      C57BL/6 mus, manlig, 8 veckor, 22 g

      1-2 % DSS genom sondmatning, kontinuerlig administration

      Dag 40 presentera, förkortas kolon längd, vikt förlust, blod i pall, diarre

      Hög modellering hastighet. Överensstämmer, med kronisk kolit modell egenskaper

      Koloncancer

      C57BL/6 mus, manlig, 8 veckor, 21 g

      1%-2% DSS fritt

      tillgänglig för 5 dagar för 3 veckor

      14 veckor Presentera, förkortas kolon längd, viktminskning, HE-färgning, inflammation

      uppenbar

      Hög modellering hastighet. Konsekvent med tjocktarmscancermodell egenskaper

      Produktegenskaper:

      1. Symtomen är mycket liknande till dessa av mänsklig UC: det burk vara begagnad till studera de mekanism av kolit och farmakodynamisk studier.
      2. Högmögelbildning pris: gratis drickande DSS vattenhaltig lösning, enkel och lätt,
      3. canconstructa mängd av kolit modeller: akut kolit, kronisk kolit, burk också vara kombinerad med AOM till konstruera kolit- associerad cancermodell (CAC).
      4. Den lämpar sig för de modellering av många slag av djur: möss, råttor, zebrafiskar, grisar, frukt flugor och så
      5. högsäkerhet:DSS burk vara degraderas av de naturlig ekosystem, säker för de miljö; 6, hög renhet: hög renhet (98%), svavelhalt 17-19%;

      VII. Vanliga frågor

      Om akut DSS kolit modell eller kronisk DSS kolit modell, de stränghet och framgång av enterit är släkt till mus arter (olika genetiska bakgrunder), DSS-koncentration och doseringscykel.

      Tabell 5 Vanliga frågor för DSS-kolitmodellering

      Möjliga problem

      Möjliga orsaker

      Föreslog lösningar

      Hög dödlighet i möss

      DSS koncentration för hög

      Nedsatt koncentration av DSS administration

      Möss med inga eller låg tecken av enterit

      DSS koncentration för låg

      Upphöjd DSS dosering koncentration; nedsatt cykel intervall (10- 14 dagar)

      I samma grupp av möss, den symtom av enterit varierande mycket

      Täppt lock

      Kontrollera mus dricksflaskor dagligen

      VIII.Produkt Beställning

      Produktnamn

      Katalognummer

      Specifikation

      ColitCare™ Dextran Sulfate Sodium Salt (DSS), Colitis Grade MW:36000~50000

      60316ES25

      25 g

      ColitCare™ Dextran Sulfate Sodium Salt (DSS), Colitis Grade MW:36000~50000

      60316ES60

      100 g

      ColitCare™ Dextran Sulfate Sodium Salt (DSS), Colitis Grade MW:36000~50000

      60316ES76

      500 g

      ColitCare™ Dextran Sulfate Sodium Salt (DSS), Colitis Grade MW:36000~50000

      60316ES80

      1 kg

      Hematoxylin och eosinfärgningskit

      Hematoxylin Eosin (H&E) färgningssats

      60524ES60

      2 x 100 ml

      Modellering av akut pankreatit hos djur

      Caerulein är a mag- reglering molekyl funktionellt och kompositionsmässigt liknande till kolecystokinin (CCK) att stimulerar mag-, gall- och pankreasutsöndring. Rainfrogin kan användas för att studera signalvägar medierade av NF-KB uppreglerad proteiner som Intercellular Adhesion Molecule (ICAM-1), inflammationsrelaterade faktorer som NADPH-oxidas och Janus kinas. Och det har framgångsrikt använts för att upprätta modeller för akut pankreatit (AP) hos råttor, möss, hundar och syrisk hamstrar.

      Formningsfördel:

      1. enkel hantering
      2. lägre kostnad
      3. snabb prototypframställning
      4. flera lägen av läkemedel leverans

      Modelleringsmekanismer:

      1. Uppreglering av intercellulär adhesion molekyl (ICAM-1) uttryck i pankreas- alveolär celler av stimulerande intracellulärt NF-KB. Yta ICAM-1 främjar i sin tur neutrofil vidhäftning till alveolära celler och förstärker därigenom pankreasinflammatoriska effekter;
      2. Framkallar spankreatit av inducerande oreglering av matsmältningssystemet enzym utsöndring och cytoplasmisk vakuolisering ledande till död av alveolära celler och pankreasödem;
      3. Aktivering av inflammationsfrämjande faktorer.

      Släkt Reagens

      Yeasen tillhandahåller dekapeptid molekyl- form, renhet ≥97 % (HPLC) regngroda; hög formningseffektivitet, gynnsam pris, spotutbud.

      Produktnamn

      Katalognummer

      Specifikation

      Caerulein

      60321ES03

      1 mg

      DMSO dimetylsulfoxid (cellkulturkvalitet)

      60313ES60

      100 ml

      Modellering av diabetessjukdomar

      Streptozocin (STZ) är ett antitumörantibiotikum framställt av en viss typ av Streptomyces-svamp, Aureobasidium pullulans, och kan även syntetiseras. Det används ofta vid behandling av cancer i bukspottkörteln. Samtidigt har STZ en selektiv destruktiv effekt på bukspottkörtelns β-celler hos vissa djurarter och kan inducera diabetes hos många djur, i allmänhet använder råttor och möss för att skapa djurmodeller. Det har studerats brett i anti-leukemi, DNA-metylering och anti-nefrit.

      1. Standard SOP för konstruktion av STZ-inducerade diabetesmodeller

      1.1 Beredning av djur

      Försök att använda handjur, honor innehåller hormoner som påverkar modelleringseffektiviteten. Vissa studier har visat att hondjur har dåliga modelleringsfrekvenser och kan uppleva högre dödlighet än hanar, särskilt för typ I.

      Typ I-diabetes (typ I-diabetes) kan i allmänhet väljas enligt kroppsvikten, rekommenderas 170-200g för råttor och 17-22g för möss, och modelleringshastigheten är relativt idealisk när STZ injiceras i fasta efter 1~2 veckors adaptiv matning.

      För typ II-diabetes väljs råttor (t.ex. SD/Wistar) vid 4-5 veckors ålder, som väger 90-100 g, och matas med fettrik (hög socker) diet i 4-6 veckor för att nå en kroppsvikt på ca 240-280 g. För möss (t.ex. C57/ICR/Kunming) väljs möss vid 4-5 veckors ålder, vägande 16-20 g, och matas med fettrik (hög socker) diet i 4-6 veckor för att nå en kroppsvikt på ca 30-35 g. För nyinköpta djur eller de som byter utfodringsmiljö måste de utfodras med vanlig diet i en vecka innan man väljer lämplig ålder/vikt för att byta till foder med högt fettinnehåll (högt socker). För möss (t.ex. C57/ICR/Kunming-möss), välj 4-5 veckor gamla, som väger 16-20g, och matade med fettrik (högt socker) kost i 4-6 veckor för att nå en kroppsvikt på cirka 30-35g. För nyinköpta djur eller byte av fodermiljö är det nödvändigt att adaptivt mata djuren med normal diet under en vecka, och sedan välja lämplig veckoålder/kroppsvikt för djur och byta till dieter med hög fetthalt och hög sockerhalt. När det gäller modelleringsframgång rekommenderas SD för råttor och C57 för möss.

      1.2 Matning före formning

      Matning före modellering, typ I-diabetesmodell är relativt snabb, vanligtvis kan råttor börja modellera efter 2 veckors adaptiv matning på normalt foder; typ II-diabetesmodell: kostinduktion med hög fetthalt plus en liten dos STZ. foder med hög fetthalt (hög sockerhalt) matades före modellering, vilket inducerade insulinresistens.

      1.3 Förberedelser av reagenser

      ①Hög fetthalt (hög sockerhalt) foder

      Hög fetthalt (hög sockerhalt) foder ingredienser: innehåller 10 % sackaros, 10 % ister, 5 % kolesterol

      Hög fetthalt och hög sockerhalt foder var gjord av kombinerande grundläggande råtta foder med sackaros, kondenseras ister och ägg äggula i de följande viktförhållande: 18 % ister, 20 % sackaros, 3 % äggula och 59 % basfoder.

      ② Förberedelse av STZ lösningsmedel - natrium citrat buffert

      Förberedelse av Flytande A och Flytande B: Väga 2,1 g av citron- syra (FW:210.14) och tillägga det till 100 ml av dubbeldestillerad vatten att göra Vätska A. Väg 2,94g av natriumcitrat (FW:294.10) och tillsätt det till 100 ml dubbeldestillerat vatten att göra Liquid B.

      Förberedelse av natrium citrat buffert: Blanda A och B flytande i a viss andel (1:1,32 eller 1:1), pH meter till bestämma de pH-värde, justera pH-värdet till 4,2-4,5, det vill säga den nödvändiga natriumcitratbufferten.

      1.4 Förberedelser före injektion

      Före förbereder STZ injektion, STZ lyofiliserats pulver var placerad i a torka steriliserad flaska, inslagna externt med aluminium folie eller stanniol, förkyld i en is bad med natrium citratbuffert, och förde till djur rum för backup.

      Notera: Efter ta bort de STZ lyofiliserats pulver från -20°C kylskåp, lämna det torr och skyddas från ljus kl rum temperatur i ca 10 min att tillåta det att tina helt (mycket viktigt).

      1.5 Förberedelser av injektionslösning

      Råttor var vägde och blod glukos koncentrationer var mätt efter över natten fasta (inga vatten). Råttor var grupperade för att förbereda STZ-injektionen i enlighet med antalet djur och den dos som ska injiceras. Lös upp STZ vid 1 % koncentration (vikt/volym), filtrera och sterilisera, med tanke på att STZ är helt upplöst.

      Uppmärksamhet:

      ①STZ är instabil och lätt till inaktivera, de återstående reagens efter snabb vägning fortfarande kräver torkning och ljus skydd, och det rekommenderas att linda in det med torrt aluminiumfolie (eller stanniol) papper.

      ②Om du är inte skicklig i injektion, do inte upplösa de STZ på en tid, och det är rekommenderad att du upplösa de STZ i grupper, såsom 10 eller 15 råttor/grupp, beroende på din kompetensnivå.

      ③Den STZ burk också vara vägde i förväg och utmatas de belopp som krävs för djurgruppering.

      1.6 Injektion

      Injicera intraperitonealt eller kaudal ven beroende på djurets fastande kroppsvikt.Om injektionsoperationen teknik är inte skicklig, två grupper skall vara injiceras växelvis, och de injektion skall vara avslutad inom 30 minuter. Obs: De flesta av injektionerna kräver snabb injektion.

      Uppmärksamhet:

      Typ I diabetesmodell: råttdos 70-65 mg/kg

      Typ II diabetiker modell: Råttor matas med hög socker och hög fett för 1-2 månader var behandlas med STZ på a dos på 25-40mg/kg.

      1.7 Efter injektion

      Efter injektionen av STZ ska djuren ges tillräckligt med vatten och mat (de grundläggande levnadsegenskaperna för diabetiker råttor), och de strö behov till vara ändrats dagligen till hålla de bur torka. När matning, ta vård till undvika stark solljus. Sterilisera så ofta som möjligt.

      Notera: Efter STZ modellering, fluktuationer i skenbar blod glukos nivåer visa 3 timlig faser, övergående hyperglykemi (1- 2 timmar), övergående hypoglykemi (6-10 timmar) och ihållande hyperglykemi (>72 timmar). Insulin och glukos måste vara lämpliga kompletteras.

      2.Indikatorer för bedöma de modellering effekt av STZ-inducerad diabetes modellering

      De följande indikatorer var räknas i jämförelse med de kontrollera grupp:

      1. Allmänna indikatorer: fenomen av överdrivet drickande, mat och urinering, och vikt förlust;
      2. Andra indikatorer: fasta blod glukos, fasta serum insulin nivå, serum insulin nivå, insulin känslighet, glukos tolerans och så vidare;
      3. Serumbiokemiska indikatorer: T-Cho, TG, HDL-C, LDL-C, CR, BULLE, Alt osv.
      4. Patologiska glidningar: histopatologiska rutschbanor av de pankreas

      3.Förklaring av de skäl för de fel av de STZ-inducerad diabetes modell

      1. 1. kvaliteten på STZ är den nyckel, den renhet av STZ för modellering bör vara inte mindre än 98 % (HPLC-test).
      2. 2. STZ-fel: bör förvaras torrt, undvik fukt. Undvik långvarig placering av pulvret i rumstemperatur. Upplöst STZis mycket instabil, med a halveringstid av 15 minuter på neutral  Betala uppmärksamhet till upplösa STZ med surt pH, företrädesvis i en is bad.
      3. Oavsett om intraperitoneal injektion är injiceras i tarmarna och andra organ.

      Om de modell är inte upp till standard, det är rekommenderad att, om de modell är inte upp till standard, det skall vara återinjiceras för en annan 3 dagar.

      4. Förklaring av de orsaker av STZ-inducerad hög dödlighet i möss/råttor

      4.1.De råttans vikt är för låg;

      4.2. Tillräckligt drickande vatten måste vara garanterad (otillräcklig drickande vatten burk lätt medföra döda råttor).

      4.3. Högt blodsocker och lågt blodsocker kommer att orsaka döda råttor, undvik att döda råttor kan injiceras av insulin eller tillfälligt socker tillskott, två sätt: ① Allmänt hög blod socker. Insulin tillskott metod, tillägg några mediumverkande insulin. Ge till exempel Novolin N eller NPH (neutralt fiskprotein zink insulin), 2-3 enheter varje gång, efter 3-5 dagar, dödligheten för råttor kommer att vara låg; ②sockertillskottsmetod, efter fastande råttor, har injektionen varit i en hypoglykemisk tillstånd, kan gjutning av 4 timmar efter den intraperitoneala injektionen av 20 % glukos undvikas på grund av injektionen av hypoglykemi död hos råttorna;

      4.4. Förhindra djur från dödande varje andra. Brist av mat och otillräcklig vatten förse vilja riva varje andra isär och knapra på sin egen sort, så mat och vatten bör tillföras i tillräckliga mängder, helst på två sätt.

      4.5.Förhindra infektion. Diabetiker råttor urinera a massa, de strö är fuktig och behov till vara ändrats ofta, så diabetiker råttor är mer benägna att få infektioner än andra råttor, särskilt urinvägsinfektioner och bukinfektioner. Före och efter invasiv operationer såsom intraperitoneal injektion, subkutan injektion och blodsockerinsamling, bör man vara uppmärksam på sterilisering. För exempel, tetracyklin (eller gentamycin oftalmisk salva) burk vara tillämpad lokalt till behandla de sår till förhindra infektion efter varje blodsockerinsamling.

      5. Faktorer påverkar diabetes modellering

      De påverkande faktorerna för modellering av diabetessjukdomar inkluderar kvaliteten på STZ-modelleringsreagenser, djurens tillstånd och administration metod. Bland dem, de huvud fastigheter av de reagenser är renhet, stabilitet, löslighet egenskaper, etc. De djurens tillstånd omfattar främst genetisk bakgrund, hane och hona, kön, kroppsvikt, födomiljö, kost struktur, etc., och administreringssättet inkluderar administreringstid, administreringsintervall och administreringsväg. Differentierade faktorer ger differentierade modelleringseffekter.

      6. De STZ modellering metodik idéer sorterad ut

      Standardisering av de påverka faktorer är a garanti av uppnå de modellering ändamål och modelleringsstabilitet. Teoretiskt sett, alla djurmodellering experiment kräver förexperimentering.

      I fallet med STZ-inducerad diabetesmodell bör dosen av STZ hänvisa till resultaten av förtesterna, och försök att inte blint följ doseringen i litteraturen eller andra för att använda direkt, som medelvikten av råttor och fastande (lågt glukostillstånd) motstånd, fastans längd, tidpunkten för injektioner, såväl som den tidigare matningsprocessen, tiden för glukos mått, och så på, är olik, och det är de mest vetenskaplig till bestämma de dosering mätningar i överensstämmelse med deras egna experimentmöss genom förtesterna. Det mest vetenskapliga sättet är att bestämma doseringen av läkemedlet genom förtestning.

      7.Hög Modellering Framgång Hastighet STZ Användande Riktlinjer

      STZ bevarande, upplösning, utskänkning och annat försiktighetsåtgärder för använda, se de officiell webbplats av relevanta reagenser.

      8. Produkter

      Hög framgångsfrekvens: renhet ≥98 % (HPLC bestämning); stabil kvalitet, kostnadseffektiv, spot utbud, efterförsäljning garanti.

      Produktnamn

      Katalognummer

      Specifikation

      Streptozocin

      60256ES60/76

      100/500 mg

      Streptozocin

      60256ES80

      1g

      Citronsyra, Monohydrat Citronsyra Monohydrat

      60347ES25

      25g

      Citronsyra trinatriumsalt, dihydrat

      60348ES25

      25g

      (För mer information på de använda av STZ gjutning, behaga kontrollera de särskild artikel på yeasen webbplats)

      Produkt Linje Publicerad Artiklar (partiell)

      [1] Li, , Dong, J., Xiao, H., Zhang, S., Wang, B., Cui, M., & Fan, S. Gut kommensal härledd valeriansyra skyddar mot strålningsskador. Tarmmikrober,.2020 .1-18. IF=10,245

      [2] Wang Y, Jia M, Yan X, et al. Ökat neutrofilgelatinas-associerat lipokalin (NGAL) främjar ombyggnad av luftvägarna vid kronisk obstruktiv lungsjukdom[J]. Clinical Science, 2017, 131(11): 1147-1159. IF=6,124

      [3] Su J, Sun H, Meng Q, et  Förbättrad blodsuspensibilitet och laseraktiverad tumörspecifik läkemedelsfrisättning av teranostiska mesoporösa silikananopartiklar genom funktionalisering med erytrocytmembran[J]. Theranostics, 2017, 7(3): 523. IF=11.556

      [4] Wu J, Lv Q, He J, et al. MicroRNA-188 undertrycker G 1/S-övergång genom att rikta in sig på flera cyklin/CDK-komplex [J]. Cell Communication and Signaling, 2014, 12(1): 66. IF=5,712

      [5] ZhangT Q, Wang J  Shoot Regenerative Capacity Assays in Arabidopsis and Tobacco [J]. The Plant Cell, 2015. IF=10,69

      [6] YaoC, Ni Z, Gong C, et  Rocaglamid förbättrar NK-cellsmedierad dödande av icke-småcelliga lungcancerceller genom att hämma autofagi[J]. Autophagy, 2018, 14(10): 1831-1844. OM=16.016

      [7] FanH, Chen W, Zhu J, et  Toosendanin lindrar dextransulfatnatrium-inducerad kolit genom att hämma M1 makrofagpolarisering och reglera NLRP3-inflammasom och Nrf2/HO-1-signalering[J]. International immunopharmacology, 2019, 76: 105909. IF=4,932

      [8] Gao X, Fan W, Tan L, et al. Sojaisoflavoner förbättrar experimentell kolit genom att rikta in sig på ERα/NLRP3-inflammasomvägar [J]. The Journal of Nutritional Biochemistry, 2020, 83. IF=6,048

      Modellering av reumatoid artrit

      Reumatoid artrit (RA) är en kronisk inflammatorisk ledsjukdom som kännetecknas av ihållande synovit, systemisk inflammation, åtföljd av ben- och broskerosion, vilket så småningom kan leda till ledankylering och deformitet.

      Freunds Adjuvans uppfanns av Jules Freund på 40-talet av 1900-talet, vilket är en antigenemulsion som blandar lika mycket antigenvattenlösning med en olja och sedan tillsätter ett emulgeringsmedel för att göra vatten-i-olja, vilket är det vanligaste adjuvanset i djurförsök. Freunds adjuvans är uppdelat i Freunds kompletta adjuvans (CFA) innehållande Mycobacterium tuberculosis och Inkomplett Freunds adjuvans (IFA) utan Mycobacterium tuberculosis, som främst används för att inducera kollageninducerad artrit CIA-modell och adjuvansinducerad artrit AA-modell.

      1. Kollageninducerad artrit (CIA) modelleringssteg (endast för referens)

      1) Förbered relevanta reagenser, var uppmärksam på att ställa in experimentgruppen och kontrollgruppen.

      2) Kollagen från nötkreatur typ 2 (CII.) löstes i isättika i en koncentration av 2 mg/ml vid 4°C över natten.

      3) Freunds ofullständiga adjuvans kompletterades med inaktiverad Mycobacterium tuberculosis i en koncentration av 2-5 mg/ml för att framställa Freunds kompletta adjuvans. Koncentrationen av Mycobacterium tuberculosis i 60718ES Freunds kompletta adjuvans från Yisheng Biotech var mindre än 10 mg/ml.

      4) Bovint kollagen typ 2 (CII.) ättiksyralösning blandas med en lika stor mängd av Freunds kompletta adjuvans och emulgeras.

      5) Subkutan injektion av 0,1-0,2 ml på baksidan av varje experimentmus.

      6) Efter 3 veckor blandades samma mängd Fond ofullständig adjuvans med bovint kollagen typ 2 (CII.) ättiksyralösning och emulgerades, och varje mus injicerades subkutant vid svansbasen för totalt 0,1-0,2 ml.

      7) Patologisk undersökning: möss i experimentgruppen och kontrollgruppen avlägsnades, 4% formaldehyd fixerades i mer än 48 timmar, 5% nitrat avkalkade i 2 timmar, xylen infiltrerades och paraffin inbäddades. Sektioner gjordes, HE-färgning och observerades med konventionell ljusmikroskopi.

      2. Adjuvans-inducerad artrit (AA) modelleringssteg (endast för referens)

      1) Förbered relevanta reagenser, var uppmärksam på att ställa in experimentgruppen och kontrollgruppen.

      2) Observationsprotokoll: I allmänhet, 7-12 dagar efter den andra immuniseringen, har mer än 80 % av mössen artritsymtom.Beroende på rodnad, svullnad och aktivitet hos mössens leddelar, graderades de kliniska symtomen, och observationsprotokollen observerades före experimentet och den 3:e, 5:e, 7:e respektive 12:e dagen efter experimentet, och referensen för klassificeringen är som följer:

      Betygsindex

      Symptom

      0

      Aktiviteten är normal, inga tecken på erytem och svullnad

      1

      Normal aktivitet, rodnad i huden, men ingen signifikant svullnad

      2

      Aktiviteten är något påverkad och det finns rodnad och svullnad i tassar och fötter eller knäled

      3

      Aktiviteten påverkas och tassar, tår eller knän är lätt deformerade, röda och svullna

      4

      Nedsatt rörelse, svår rodnad och svullnad av tår eller knän på fötter, klor, tår eller knän, och stelhet eller missbildning

      3) Musmätning: Volymen av bakbenslederna på möss före och efter experimentet mättes med hjälp av en musklofots volymmätare, och volymen på knälederna på bakbenen på varje mus mättes under cirka 5 mm, upprepades tre gånger, medelvärdet registrerades och testet utfördes en gång var tredje dag.

      4) Patologisk undersökning: möss i experimentgruppen och kontrollgruppen avlägsnades, 4% formaldehyd fixerades i mer än 48 timmar, 5% nitrat avkalkades i 2 timmar, xylen infiltrerades och paraffin inbäddades. Sektioner gjordes, HE-färgning och observerades med konventionell ljusmikroskopi.

      3.Vanliga frågor

      Problem som kan uppstå

      Svar

      Vad är skillnaden mellan 60718ES Freund's Complete Adjuvans (CFA) och 60719ES Freund's Incomplete Adjuvans (IFA)?

      Freunds kompletta adjuvans (CFA) innehåller värmedödade, inaktiverade Mycobacterium tuberculosis baciller som stimulerar ett starkt immunsvar; Inkomplett Freunds adjuvans (IFA) saknar Mycobacterium tuberculosis och stimulerar ett svagare immunsvar.

      Vad är den specifika mängden BCG i 60718ES Freunds kompletta adjuvans (CFA)?

      BCG-halten är mindre än 10 mg/ml.

      När det används för reumatoid artrit djurmodellering, hur väljer man Freunds kompletta adjuvans (CFA) och Freunds ofullständiga adjuvans (IFA)?

      Eftersom råttor i allmänhet är känsligare än möss, behandlas möss i allmänhet med CFA, och råttor kan också behandlas med IFA, men CFA kommer att användas bättre.

      Relaterade produktrekommendationer

      Klassificera

      Produktnamn

      Katalognummer

      Specifikation

      Modell för reumatoid artrit

      Komplett Freunds adjuvans (CFA)

      60718ES

      10 mL/5x10 mL

      Inkomplett Freunds adjuvans (IFA)

      60719ES

      10 mL/5x10 mL

      Hypertensiv modellering

      Hypertoni kännetecknas av förhöjt systemiskt arteriellt blodtryck (systoliskt och/eller diastoliskt blodtryck), som manifesteras i systemiskt arteriellt blodtryck (systoliskt blodtryck≥ 140 mmHg och/eller diastoliskt blodtryck ≥90 mmHg), som är den vanligaste kroniska sjukdomen och den viktigaste riskfaktorn för hjärt- och kärlsjukdomar, och som ofta åtföljs av kliniska syndrom med funktionella eller organiska skador på hjärta, njure, hjärna och andra organ. Studiet av förebyggande och behandling av hypertoni är av stor praktisk betydelse, och upprättandet av djurhögt blodtrycksmodell är en viktig del av studien av hypertoni.

      Djurmodeller för hypertoni kan delas in i genetiskt relaterade modeller och icke-genetiskt relaterade modeller. Genetiskt relaterade modeller inkluderar ärftliga och genetiskt modifierade djurmodeller, medan icke-genetiskt relaterade modeller i allmänhet hänvisar till modeller inducerade av miljö-, kirurgiska och läkemedelsfaktorer. Forskningsämnena för modellering inkluderar i allmänhet grisar, får, kaniner, hundar, möss och råttor, etc., men de flesta av experimenten är modellerade på möss och råttor, och de vanligaste djurhypertonimodellerna är SHR-modellen för spontana hypertensiva råttor och den läkemedelsinducerade hypertonimodellen.

      1. Ärftlig hypertonimodell hos djur

      1.1 SHR-modell av spontant hypertensiva råttor

      Spontana hypertensiva råttor, även kända som SHR-råttor, har en incidens av hypertoni på nästan 100 % och är de mest använda djurmodellerna. Det systoliska blodtrycket hos normala råttor är 110-120 mmHg, och blodtrycket hos SHR-råttor börjar öka efter 4-6 veckors ålder, och blodtrycket är så högt som mer än 200 mmHg efter avel.

      Fördelar: Förekomsten av hypertoni är hög, sjukdomsförloppet är kort och de patologiska förändringarna av målorganen under debuten kan observeras.

      Nackdelar: Uppfödningscykeln är lång, utfodringsförhållandena har vissa krav, och priset är något dyrare än vanliga råttor.

      1,2 SHRsp-modell av strokebenägna råttor med spontan hypertoni

      Strokebenägna råttor med spontan hypertoni, även kända som SHRsp-råttor, har en incidens av hypertoni på nästan 100 % och stroke på nästan 80 %. Blodtrycket hos SHRsp-råttor började öka efter 4-6 veckors ålder och kunde nå 200 mm Hg efter 10-15 veckors ålder.

      Fördelar: Förekomsten av hypertoni är nära 100 %, och förekomsten av stroke är 80 %, vilket är en idealisk djurmodell för strokeforskning.

      Nackdelar: lång odlingscykel, besvärlig genetisk avel, lätt att mutera, går sönder.

      1. Läkemedelsinducerad hypertonimodell

      2.1 Angiotensin II (AngII.) induktion

      2.1.1 Experimentella metoder (endast för referens)

      Hanmöss i åldern 8-12 veckor injicerades med angiotensin II och normal saltlösning genom osmotisk pump subkutan injektion, och dosen av AngII var i allmänhet 100 ng/(kg·min) under 2-4 veckor. Administrationstiden kan förkortas eller förlängas i enlighet med den faktiska situationen.

      2.1.2 Experimentella bilder (utdrag ur litteraturen)

      Applikation 1: Angiotensin II. möss matade med NaCl-lösning i 28 dagar, experimentgruppen jämfört med kontrollgruppen, ökade blodtrycket avsevärt.

      Fig. 5 Förändringar i blodtryck och hjärtfrekvens hos möss (A är systoliskt blodtryck, B är medelblodtryck, C är diastoliskt blodtryck, D är hjärtfrekvens)

      2.2 Deoxikortikosteronacetat (DOCA) induktion

      Deoxikortikosteronacetat (DOCA) kan hämma renin-angiotensinsystemet, vilket resulterar i låg plasmareninaktivitet, och därigenom mediera en ökning av blodtrycket, vanligtvis genom att implantera en subkutan DOCA-pump med förlängd frisättning eller injicera DOCA och tillsätta NaCl-lösning för att inducera bildandet av hypertoni.

      Den är främst tillämpbar på forskning om renin-angiotensinsystemet (RAS) och vatten- och natriummetabolism vid hypertoni, och modellen kan få blodtrycket att öka stabilt och metoden är enkel.

      2.2.1 Experimentella metoder (endast för referens)

      Den vänstra njuren på 250-275 g normala råttor av hankön resekerades och gummimediet av DOCA och silikagel placerades under huden mellan skulderbladen på båda sidor av råttan, eller efter att den vänstra njuren avlägsnats injicerades DOCA subkutant med 50 mg/(kg·d) per dag, och det borde inte drickas NaCl-lösningen under 1-procentig lösning. matningsprocessen, och blodtrycket hos råttorna mättes efter 3-5 veckors operation.

      2.2.2 Experimentella bilder (utdrag ur litteraturen)

      Applikation 1: Efter att den ensidiga njuren avlägsnats tillsattes DOCA och resultaten visade att blodtrycket hos mössen i kontrollgruppen var relativt konstant, men blodtrycket hos mössen i försöksgruppen ökade signifikant.

      Fig. 6 Diagram över blodtrycksförändringar hos möss

      2.3 N-nitro-L-argininmetylester (L-NAME)-inducerad djurmodell av hypertoni

      L-NAME är en kompetitiv hämmare av kväveoxidsyntas, en aktiv substans som främjar endotelfunktionen och sänker blodtrycket när kväveoxiden stiger. L-NAME, en kompetitiv hämmare av kväveoxidsyntas, kan försvaga den vasodilaterande effekten av kväveoxid och leda till uppkomsten av hypertoni. Därför kan en djurmodell av hypertoni orsakad av långvarig NO-brist etableras, och modellens experimentella forskningsobjekt ses mest hos råttor.

      Den är främst lämplig för studier av kväveoxidsystem och kardiovaskulära system vid hypertoni, och modellen kan få blodtrycket att stiga stabilt och kontinuerligt, och metoden är enkel.

      2.3.1 Experimentella metoder (endast för referens)

      Hanråttor i åldern 3-4 veckor injicerades (eller gavs) intraperitonealt med L-NAME vid 20-50 mg/(kg·d) och administrerades en gång om dagen i 4 veckor, och kontrollgruppen injicerades (eller gavs) endast intraperitonealt med destillerat vatten, och förändringarna av råttorna övervakades dagligen.

      Efter experimentet mättes kroppsvikten, blodtrycket, hjärtfrekvensen, biokemiska serumindex och andra biokemiska index för experimentgruppen och kontrollgruppen.

      2.3.2 Experimentella tabeller och bilder (utdrag ur litteraturen)

      Ansökan 1: Efter inskrivningen ökade blodtrycket i modellgruppen gradvis med förlängningen av L-NAME-intagstiden och nådde standarden för hypertoni vid 4:e veckan, vilket var signifikant högre än motsvarande kontrollgrupp.

      Applikation 2: Hypertoni bildades efter 4 veckors bevattning hos råttor, vilket var signifikant högre än hos råttor i motsvarande kontrollgrupp, och det vattenhaltiga extraktet av kassiafrö kunde minska trycket och förbättra njurskador.

      2.4 Jämförelse av läkemedelsinducerade hypertonimodeller

      Läkemedelsinducerad hypertonimodell

      Angiotensin II.

      (AngⅡ)

      Deoxikortikosteronacetat

      (DOCA

      N-nitro-L-argininmetylester (L-NAME)

      Beskrivning av metoden

      Osmotisk pump subkutan injektion, AngII.dosen är vanligtvis 100 ng/(kg·min)

      Först resekerades den ensidiga njuren och 50 mg/(kg·d) DOCA injicerades subkutant och 1% NaCl-lösning drack samtidigt

      Intraperitoneal injektion (eller sondmatning) av 20-50 mg/(kg·d) L-NAME, som att dricka 1% NaCl-lösning, kan påskynda formningen

      Mögelcykel

      2-4 veckor

      3-5 veckor

      4-5 veckor

      Applikationsscenarier

      Forskning om oxidativ stressskada och RAS

      RAS-relaterade studier och natriumvatten

      Metabolismrelaterad forskning

      NO-system, kardiovaskulärt systemrelaterad forskning

      Relaterade produktrekommendationer (sammanfattning)

      Classifiera

      Produktnamn

      Katalognummer

      Sspecificering

      Hypertonimodell

      L-NAME hydroklorid (L-NAME HCl)

      52302ES

      100 mg

      Angiotensin II människa

      54041ES

      10 mg

      Deoxikortikosteronacetat

      54344ES

      50 mg/500 mg

      Modell för reumatoid artrit

      Komplett Freunds adjuvans (CFA)

      60718ES

      10 mL/5x10 mL

      Inkomplett Freunds adjuvans (IFA)

      60719ES

      10 mL/5x10 mL

      Kolitmodell

      ColitCare™ Dextran Sulfate Sodium Salt (DSS), Colitis Grade MW:36000~50000

      60316ES

      25 g/100 g/500 g/1 kg

      Djurmodell av akut pankreatit

      Caerulein

      60321ES

      1 mg

      Diabetessjukdomsmodell

      Streptozocin (STZ)

      60256ES

      100 mg/500 mg/1 g

      För mer produkt detaljer och PR prissättning behaga kontakta försäljning

      Förfrågan