Akut pankreatit (AP) är ett vanligt akut buktillstånd i klinisk praxis, med komplex etiologi och en dödlighet på 5 % till 10 %. Dödligheten för svår AP kan nå 20 % till 30 %. Patogenesen är ännu inte helt klarlagd och det finns inga specifika behandlingsmetoder. Aktuella metoder för att skapa levande AP-djurmodeller inkluderar pankreatisk duct ligering, duodenal loop stängning, pankreatisk gallgångspunktionsinjektion, subkapsulär pankreatisk injektion, pankreatisk gallinjektion kombinerad med intravenös infusion och intraperitoneal injektion av caerulein i kombination med lipopolysackarid.
Caerulein är en gastrisk reglerande molekyl som är funktionellt och sammansättningsmässigt lik kolecystokinin (CCK). Det stimulerar överdriven utsöndring av pankreatiska acinära celler, vilket orsakar en separationsstörning av intracellulärt trypsinogen och lysosomala hydrolaser. Aktivering sker på ett katepsin B-beroende sätt, och aktiviteten hos pankreasenzymer kan ytterligare leda till proenzymaktivering, vilket orsakar en serie proteasaktiviteter som leder till cellskador. Det inflammatoriska svaret som orsakas av självnedbrytning av pankreasvävnad rekryterar inflammatoriska celler och frisätter inflammatoriska faktorer, vilket ytterligare kan orsaka allvarliga lokala eller till och med systemiska inflammatoriska svar.
Figur 1. Caeruleins kemiska struktur (CAS NO.17650-98-5)
Denna modell har framgångsrikt tillämpats på råttor, möss, hundar och syriska hamstrar etc, och är lämplig för att studera nedsatt autofagi, patologisk kalciumsignalering och ER-stress, där AP kännetecknas av variation i mängden caerulein, genom att justera antalet injektioner, vilket resulterar i skillnader i svårighetsgrad.
Protokoll för Caerulein-inducerad AP-modell
Beredning av ceruleinlösning
Lös upp 1 mg caerulein i 1 ml saltlösning. Sterilisera med 0,22 μm membranfilter och förvara vid -20°C. Tina före användning och späd med koksaltlösning till 5 μg/mL eller 10 μg/mL arbetslösning.
Djurberedning
Caerulein kan inducera AP hos de flesta djur, främst används i gnagare (som råttor och möss).
Läkemedelsadministration
Den AP som induceras av caerulein är mestadels ödematös typ, som mest används i studien av mild AP (MAP) och omvandlingen av MAP till SAP. För SAP-forskning kombineras caerulein ofta med andra föreningar för att uppnå ökad svårighetsgrad av AP, till exempel lipopolysackarid (LPS).
Djuren fastade men kunde dricka fritt 12 timmar före operationen. Intraperitoneal injektion med Caerulein (20-100 μg/kg, vanligtvis 50 μg/kg) varje timme i 7 timmar, följt av en injektion på 10 mg/kg LPS.
Modellutvärdering
1）Serumamylas- och lipasaktiviteter ökade.
2） Förhöjd NO-koncentration i serum.
3) Pankreatisk patologi: pankreasvävnadsödem med vakuoler, inflammatorisk cellinfiltration, periduktal och fokal acinär cellnekros.
4） Ökat uttryck av inflammatoriska faktorer i serum och pankreasvävnad.
Modellfördelar
Metoden är enkel, lätt att kopiera, bra repeterbarhet, icke-invasiv.
Aansökan fall(Katt#60321ES Caerulein)
Figur 2. AP-modell relaterade resultat i Balb/c-möss (PMID: 35339899, OM: 5.736)
Balb/c-möss injicerades intraperitonealt med 50 μg/kg caerulein (Yeasen, Cat#60321ES) sju gånger med 1-timmes intervall, och LPS (10 mg/kg) administrerades samtidigt med den sista dosen för att inducera SAP. Pankreatiska H&E-bilder och histologisk poängsättning (b), såväl som serumnivåer av amylas (c), IL-6 (d) och ALT (e) utvärderades.
Figur 3. Resultat av AP-modell korrelation hos Kunming möss (PMID: 27579473, IF: 4,096)
Kunming-honmöss injicerades intraperitonealt med 50 μg/kg caerulein (Yeasen, Cat#60321ES) fyra gånger med 1-timmes intervall för att inducera AP. Nivåer av amylas, lipas och TNFa i serumet (A), och pankreatiska H&E-bilder och histologisk poängsättning (C) bedömdes.
Beställningsinformation
| Produktnamn | Katt# | Specifikation |
| 60321ES03 | 1 mg | |
| LPS, från Escherichia coli O55:B5 | 60747ES08/10 | 5 mg/10 mg |
| LPS, från Escherichia coli O111:B4 | 60748ES08/10 | 5 mg/10 mg |