Läkemedelsutveckling kräver djurmodeller för att testa effektiviteten. Med över 50 år av utveckling och optimering används modellen för ulcerös kolit (UC) från Dextran Sulfate Sodium Salt (DSS), bland olika djurmodeller, i stor utsträckning för att studera etiologin och patogenesen av inflammatorisk tarmsjukdom (IBD).

Fig1. The development of the DSS ulcerative colitis model

Figur 1. Utvecklingen av DSS ulcerös kolitmodell

1. UC-modellens egenskaper konstruerad av DSS

2. Fördelar med DSS UC-modellen

3. DSS UC-modellkonstruktionsexempel

4. Modellera framgångsutvärderingskriterier

5. Länkar till denna resurs

6. Framgångsrikt fall för modellering med Yeasen DSS

7. Vanliga frågor

8. Produktorder

9. Publicerade artiklar med våra reagenser

10. Hälsning läsning

1. Karakteristika för UC-modellen konstruerad av DSS

Flera akuta eller kroniska symtom på UC kan induceras, som t.ex diarré, slemliknande avföring, fekalt ockult blod, grov blodig avföring, viktminskning, minskad aktivitet och dålig pälsfärg, av olika DSS-doser.

Tabell 1 Histologiska egenskaper hos DSS-kolitmodellen

DSS kolit modellkategori akut kolitmodell Kolitmodell för kronisk fas
Histologiska förändringar Kolonhyperemi, ödem, förkortning, sprödhet, ökat förhållande mellan vikt och längd Betydligt förkortad kolon
Kolonsår av olika grad Slemhinneförtjockning, lymfadenopati
Slemhinneödem, bägarecellförlust, kryptsvullnad och förstörelse Bägarecellförlust, kryptaförlust
Olika grader av inflammatorisk cellinfiltration i slemhinnan och submukosan, skada på epitelceller Adenomatösa polyper och tumörliknande förändringar hos ett litet antal djur

2. Fördelar med DSS UC-modellen

👍 1. Protokollen är lätta att implementera.

👍 2. DSS UC-modellen påminner mycket om mänskliga UC-symtom med hög repeterbarhet.

👍 3. Olika karakteristiska symtom kan induceras genom att kontrollera den administrerade DSS-dosen, vilket var unikt för DSS UC-modellen.

👍 4. DSS UC-modellen kan genereras med en mängd olika mycket använda modelldjur, såsom möss, råttor, zebrafiskar, grisar, fruktflugor, etc.

👍 5. Modellen för IBD-inducerad kolitassocierad cancer (CAC) kan skapas med kombinerad användning av azoximetan (AOM).

3. DSS UC-modellkonstruktionsexempel

3.1 Musmodell(Klicka för mer information)

1) BALB/c-möss, hona, 6-8 veckor, 25 g;

2) Sterilt dricksvatten med 3% DSS och filter med 0.22 μm membran;

3) DSS administrerades under 7 dagar;

4) Inflammation, såsom kolon ödem och trängsel, observerades efter HE-färgning.

Fig. 2 HE-färgningsresultat av DSS akuta kolitsnitt [1]

3.2 Zebrafisk modell(Klicka för mer information)

1) Zebrafiskembryon erhölls från naturlig lek och föds upp till 1 dag efter befruktning (dpf) i en inkubator vid 28,5 ℃ i recirkulerande vatten (60 μg/mL omedelbara havssalter) och kompletterades med metylenblått upp till 1 dpf;

2) Efter 1 dpf, använd E3 embryoodlingsmedium utan metylenblått för att odla till 3 dpf;

3) Förbered 10 % DSS-lagringslösning med E3-medium;

4) Späd DSS med odlingsmedium till den maximala icke-dödliga dosen (DSS-koncentrationsreferens: 0,5 %);

5) Zebrafisken behandlades med 0,5 % DSS från 3 dpf till 6 dpf, och indexen observerades.

Fig.3 DSS induces an inflammatory response in zebrafish liver

Fig. 3 DSS inducerar ett inflammatoriskt svar i zebrafisklever [2]


3.3 Grismodell(Klicka för mer information)

1) Yorkshire-grisar vid en ålder av 4-5 dagar;

2) DSS-dos: 1,25 g/kg, oralt intag i 5 dagar;

3) Ökad D-mannitolupptagshastighet observerades.

Fig. 4 DSS-inducerad D-mannitolkoncentration i smågrisar var högre än den i kontrollgruppen [3]


3.4 Drosophila modell(Klicka för mer information)

1) Drosophila, hona, 5-10 dagar;

2) Utfodring medium framställdes med 5 % sackaroslösning innehållande 3 % DSS och 25 μg/ml bleomycin;

3) Drosophila odlades vid 29°C under tre dagar med ett dagligt byte av odlingsflaska;

4) DSS inducerade proliferationen av ISC-prekursorceller och hade en dödlig effekt på drosophila.

Fig. 5 DSS inducerar proliferationen av ISC-prekursorceller i Drosophila [4].


3.5 Kolitassocierad cancer(Klicka för mer information)

1) BALB/c-möss, hanar, 7 veckor gamla;

2) På dag 1, väg och markera möss. Injicera möss intraperitonealt med 10 mg/kg AOM-lösning.

3) Fyll dricksförrådet till musburarna med vatten. Beräkna 7-10 ml vatten per mus och dag. Matning i en vecka.

4) Byt ut dricksvatten mot 2,5 % DSS under en vecka;

5) Mata med vanligt dricksvatten i två veckor;

6) Upprepa steg 3-4 3 gånger.

Fig.6 Schematic diagram of CAC induced by AOM/DSS [5] .

Fig. 6 Schematiskt diagram av CAC inducerad av AOM/DSS [5] .

4. Modellering av kriterier för utvärdering av framgång

4.1 Sjukdomsaktivitetsindex (DAI-poäng)

Modellen utvärderades med flera parametrar inklusive kroppsvikt, fekal viskositet och ockult blod, genom vilket genererar den totala DAI.

Tabell 2 DAI poängregler

göra

viktminskning i procent

avföringskonsistens

fekalt ockult blod

0

0

Normal

Negativ

1

1-5 %

Mjuk pall

Ljusblått

2

5-10 %

Mukoid avföring

Blå

3

10-20 %

Lös avföring

Mörkblå

4

>20 %

\

Grov blodig avföring


4.2 Histologiska förändringspoäng

Poängen gavs för ovanstående indikatorer baserat på de histologiska förändringarna exklusive lymfkörtelbildningen för den akuta kolitmodellen. HE-färgningsreagenset som används är Cat#60524ES60.

Tabell 3 Histologisk förändringspoäng

Ont sår

Sår

Epichanges inflammatoriska

Inflammatoriskt infiltrat

Lymfkörtel(r)

0

0

Normal

Ingen

ingen

1

1

Förlust av bägareceller

Perikypt infiltration

1

2

2

Förlust av bägareceller

Infiltration av muskelslemhinnan

2

3

3

Krypterad radering

Allmän infiltration av muscularis mucosa, förtjockning av mucosa

3

4

>3

Omfattande kryptförlust eller polypoid regenerering

Submucosa invasion

>


4.3 Kolon längd

Den förkortade kolonlängden var en uppenbar fenotyp för modellen för kronisk kolit, medan liknande förändringar kan detekteras på dag 8 för modellen för akut kolit.

4.4 Sammanfattning

Preliminära experiment rekommenderas för användning av DSS UC-djurmodellen med lämplig kontroll. 8-10 djur per grupp är minimala krav. DAI är kriteriet för att utvärdera resultaten från en förstudie.

5. Länkar till denna resurs

[1]Xiaona Gao, et al. Journal of Nutritional Biochemistry 83 (2020) 108438.
[2]Jing Ma, et al. Vattenbruk och fiske (2021) 548–557.
[3]Connie J. Kim, et al. Journal of Nutritional Biochemistry 21 (2010) 468–475.
[4]Fangfang Ren, et al.PNAS.2010.107 (49) 21064-21069.
[5]Jia-Rong Huang, et al. Frontiers in Pharmacology.2020.11:586885.

6. Framgångsrikt fall för modellering med Yeasen DSS

Framgångsrika modeller för akut kolit genereras med Yeasen DSS (Cat#60316ES, MW: 36000~50000) på 7 dagar med framträdande fenotyp som visas i följande tabell.

Tabell 4 Konstruktion av olika typer av enteritmodeller med DSS

Modell

Modellering av prover

Modelleringsplan

Modelleringsresultat

Använd utvärdering

Akut kolit

BALB/c-möss, hona, 6-8 veckor, 25 g

3%-5% DSS dricker fritt i 7 dagar i följd

Dag 5 dök upp, tjocktarmens längd förkortades, HE-färgning och inflammationen var uppenbar

Formningshastigheten är snabb och tiden är kort. Överensstämmer med egenskaperna hos modellen för akut kolit

C57BL/6 möss, hane, 8 veckor, 20 g

3%-5% DSS genom sondmatning, kontinuerlig administrering

Dag 5 inträffar, kolonförkortning, viktminskning, blod i avföringen, diarré

Hög mögelhastighet och kort varaktighet. Överensstämmer med egenskaperna hos modellen för akut kolit

Kronisk kolit

C57BL/6 mus, hane, 8 veckor, 22 g

1-2% DSS genom sondmatning, kontinuerlig administrering

Dag 40 dyker upp, kolonförkortning, viktminskning, blod i avföringen, diarré

Hög formningshastighet. Överensstämmer med egenskaperna hos modellen för kronisk kolit

Koloncancer

C57BL/6 mus, hane, 8 veckor, 21 g

1%-2% DSS ad libitum i 5 dagar i 3 veckor

14 veckor med förkortad kolonlängd, viktminskning, HE-färgning och uppenbar inflammation

Hög formningshastighet. Överensstämmer med tjocktarmscancermodellens egenskaper

7. Vanliga frågor

Oavsett den akuta DSS-kolitmodellen eller den kroniska DSS-kolitmodellen, är svårighetsgraden och framgången för enterit relaterad till musarter (olika genetisk bakgrund), DSS-koncentration och doseringscykel.


Tabell 5 Vanliga problem med modellering av DSS-kolit

Möjliga problem

Möjlig anledning

Föreslagen lösning

Hög dödlighet hos möss

DSS-koncentrationen är för hög

Minska koncentrationen av DSS som administreras

Möss med inga eller låga symtom på enterit

DSS-koncentrationen är för låg

Öka DSS-doseringskoncentrationen; minska cykelintervallet (10-14 dagar)

Hos samma grupp möss varierar symtomen på enterit kraftigt

Flaskkorken igensatt

Kontrollera musens dricksflaska dagligen

8. Produktorder:

Varmsäljande produkt behöver bara 1/3 av priset på M* med samma effektivitet, och vi har ett stort lager.

Tabell 6 Produktorder

Produktnamn Katt NR. Storlek

ColitCareTM Dextransulfatnatriumsalt (DSS), kolitgrad MW:36000~50000

60316ES25 25g
60316ES60 100 g
60316ES76 500 g
60316ES80 1 kg

9. Publicerade artiklar med våra reagenser:

2024

[1]Zhong D, Jin K, Wang R, et al. Mikroalgbaserad hydrogel för inflammatoriska tarmsjukdomar och dess associerade ångest och depression. Adv Mater. 2024 26 januari:e2312275. doi: 10.1002/adma.202312275. IF=29,4

[2] Zhang Y, ti S, Ji X, Wu J, Meng J, Gao J, Shao X, Shi S, Wang G, Qiu J, Zhang Z, Hua C, Zhang Z, Chen S, Zhang L, Zhu SJ. Dubosiella newyorkensis modulerar immun tolerans i kolit via de L-lysin-aktiverad AhR-IDO1-Kyn väg. Nat Commun. 2024 feb 13;15(1):1333. doi: 10.1038/s41467-024-45636-x. OM= 16.6

2022

[1]Mengmeng Xu, Ying Kong, Nannan Chen, et al. Identifiering av immunrelaterad gensignatur och förutsägelse av CeRNA-nätverk vid aktiv ulcerös kolit[J]. Frontiers in Immunology.2022; 13: 855645. OM=7.561
[2]Lujuan Xing, Lijuan Fu, Songmin Cao, et al. The Anti-inflammatory Effect of Bovine Bone-Gelatin-derived Peptides in LPS-induced RAW264.7 Makrofagerceller och dextransulfatnatriuminducerade C57BL/6-möss[J]. Näringsämnen 2022, 14, 1479. IF=5,717
[3]Wang S,  Huang J,  Solbränna KS, et al. Isosteviol Natrium förbättrar dextran-natriumsulfat-inducerad kronisk kolit genom reglering av metabolisk profilering, makrofagpolarisering och NF-B-väg[J]. Oxidativ medicin och cellulär livslängd. 2022,4636618. IF=5,076
[4]YuangengLi, PingYu, WenwenFu, et al. Polysackarider från Panax ginseng CA Meyer lindrade DSS-inducerad IBD genom att hämma JAK2/STAT1/NLPR3 inflammasom signalväg hos möss[J].Journal of Functional Foods.20213, 10500. IF=4,451
[5]Lei-NingChen, TaoJing, Zi-BinLin, et al. Metabolomiska och transkriptomiska svar från mustestiklar på dextransulfatnatriuminducerad kolit[J].Reproductive Toxicology.2022, sidorna 35-42. IF=3,143

2021

[1]Li Zhao, Fei Wang, Zhengwei Cai, et al. Förbättrad läkemedelsanvändningsplattform med injicerbar mukoadhesiv hydrogel för behandling av ulcerös kolit[J]. kemiteknisk tidskrift.424(2021)130464.IF=16,744
[2]Lingjun Tong, Haining Hao, Zhe Zhang, et al. Mjölkhärledda extracellulära vesiklar lindrar ulcerös kolit genom att reglera tarmens immunitet och omforma tarmens mikrobiota[J].Theranostics.2021; 11(17): 8570-8586 IF=11,556
[3]Jingjing Gan, Yuxiao Liu, Lingyu Sun, et al. Oralt administrerade nukleotidtillförselpartiklar från mikrofluidik för behandling av inflammatorisk tarmsjukdom[J]. Applied Materials Today.2021 Dec;25:101231. IF=10,041
[4]JialiDong, YuanLi, HuiwenXiao, et al. Oral mikrobiota påverkar effektiviteten och prognosen för strålbehandling för kolorektal cancer i musmodeller[J]. Cellrapporter.2021, 109886.IF=9.423
[5]Hao H,  Zhang X,  Tong L,  Liu Q, et al. Lactobacillus plantarum Effekt av extracellulära vesiklar härrörande från Q7 om tarmmikrobiota och ulcerös kolit hos möss[J].Frontiers in Immunology.2021.777147. IF=7,561
[6]Yaohua Fan, Yanqun Fan, Kunfeng Liu, et al.Edible Bird's Nest förbättrar dextransulfatnatrium-inducerad ulcerös kolit i C57BL/6J-möss genom att återställa Th17/Treg-cellbalansen[J].Frontiers in Pharmacology.20202.6. IF=7,561

2020

[1]Li, Y., Dong, J., Xiao, H., Zhang, S., Wang, B., Cui, M., & Fan, S. Gut kommensal härledd valeriansyra skyddar mot strålningsskador. Tarmmikrober,.2020 .1–18.IF=10.245
[2]Jia-Rong Huang, Sheng-Te Wang, Meng-Ning Wei, et al. Piperlongumine Lindrar Mouse Colitis and Colitis-Associated Colorectal Cancer[J]. Frontiers in Pharmacology.2020.586885. IF=7,561
[3]Gao X, Fan W, Tan L, et al. Sojaisoflavoner förbättrar experimentell kolit genom att rikta in sig på ERα/NLRP3-inflammasomvägar [J]. The Journal of Nutritional Biochemistry, 2020, 83. IF=6,048

Före 2020

[1] Oehlers SH, Flores MV, Hall CJ, Crosier KE, Crosier PS. Retinsyra hämmar produktionen av tarmslem och förvärrar experimentell enterokolit. Dis Model Mech. 2012 jul;5(4):457-67. IF=4,973
[2] Kim CJ, Kovacs-Nolan JA, Yang C, Archbold T, Fan MZ, Mine Y. l-Tryptofan uppvisar terapeutisk funktion i en grismodell av dextran-natriumsulfat (DSS)-inducerad kolit. J Nutr Biochem. 2010 Jun;21(6):468-75. IF=6,048
[3] Karpowicz, P., Perez, J. & Perrimon, N.,. Hippo-tumörsuppressorvägen reglerar regenerering av tarmstamceller. Development (Cambridge, England), 2010,137(24), s.4135–4145. IF=6,868
[4] Fan H, Chen W, Zhu J, et al. Toosendanin lindrar dextransulfatnatrium-inducerad kolit genom att hämma M1 makrofagpolarisering och reglera NLRP3 inflflammasom och Nrf2/HO-1 signalering[J]. International immunopharmacology, 2019, 76: 105909. IF=3,943

Hälsning läsning

Etablering av azoximetan (AOM) och dextransulfatnatrium (DSS) inducerad kolit-associerad cancermodell

Protokollet för ulcerös kolit zebrafiskmodellering med dextran natriumsulfat (DSS)

Protokollet för ulcerös kolit Drosophila modellering med dextran natriumsulfat (DSS)

Protokollet för ulcerös kolit smågrismodellering med dextran natriumsulfat (DSS)

Förfrågan