Makrofager spelar unika och kritiska roller i olika delar av kroppen, men exakt borttagning av makrofager har blivit ett viktigt forskningsverktyg för att bättre studera makrofagernas specifika funktioner i specifika områden och deras inverkan på sjukdomsutveckling. Clodronate Liposomes är ett av de mest beprövade, kostnadseffektiva och idealiska verktygen för borttagning av makrofager. Klodronatliposomer kan administreras intraperitonealt, i svansvenen och på olika andra sätt för att avlägsna makrofager från olika vävnader.

I det följande kommer vi att dela en serie ämnen för att demonstrera metoderna och effektiviteten för borttagning av makrofager på olika platser, i hopp om att ge användbara referenser och referenser för forskare.

Introduktion av injektionsmetoder

Svansveninjektion

Svansveninjektion når maximal utarmning efter 24 timmar. Uppmärksamhet bör fästas vid tidpunkten för upptäckt.

1、Placera mössen i en omvänd matlåda, dra ut svansen från öppningen, det finns två artärer och tre vener i svansen på mössen, två artärer är i dorsala och ventrala sidorna av svansen, och de tre venerna är fördelade i sicksackmönster, vanligtvis används vänster och höger sida av venerna;

2、Blötlägg gasväven i ca 70℃ varmt vatten (eller blöt den i alkohol), ta ut den och linda svansen för att uppnå syftet med vasodilatation av svansen och mjuka upp det epidermala keratinet;

3、För svans intravenös injektion, med vänster tumme och pekfinger före och efter att ha hållit ner svansen på råttan, lämnar en sektion på cirka 2 cm, så att huden är spänd, venerna är mer fulla, den högra handen håller i en 1 ml nålspruta, så att nålen och venen är parallella (mindre än 3°) i vinkeln på 0°/4), nål, bör början av injektionen av läkemedlet vara långsam, noggrann observation, om det inte finns något motstånd, inga vita dermatomer dök upp, betyder det att blodkärlen har genomborrats och kan vara Formell injektion av läkemedel.

4、Vissa experiment kräver upprepad svansveninjektion i flera dagar, injektionsstället bör börja från svansänden så långt som möjligt och flytta till svansroten i följd och ändra kärlpositionen för injektion. När du har tagit bort nålen, tryck in injektionsstället med en bomullstuss i 1 - 2 min för att stoppa blödningen.

Intraperitoneal injektion

Intraperitoneal injektion når maximal utarmning efter 48 - 72 h. Uppmärksamhet bör ägnas åt att upptäcka tidpunkter.

1、Använd först den dorsala spärrmetoden för att fånga mössen, så att deras huvuden lutar något bakåt och deras magar är uppåtriktade, musens vänstra bakben fixeras med lillfingret och sedan steriliseras injektionsstället med en bomullstuss med 75 % alkoholhalt.

2、Placeringen av den intraperitoneala injektionen i möss är 0,5 cm på båda sidor om mittlinjen i nedre delen av buken (i jämnhöjd med lårets rot). För att undvika skador på organen bör mushuvudet lutas bakåt när man räddar musen för att få organen i nedre delen av buken att röra sig uppåt.

3、Stecker in sprutnålen i huden, gå in i det subkutana området, tryck nålen framåt längs det subkutana området i 2 - 3 mm, och tränga sedan in i bukhålan på musen i en vinkel på 45 grader mellan nålen och huden. Obs: Efter att ha penetrerat bukhinnan försvinner motståndet från nålspetsen.

4、 Dra tillbaka nålpluggen, om det inte återkommer blod eller vätska kan läkemedlet injiceras.

5、Vrid försiktigt nålen efter injektionen och dra sedan långsamt ut sprutan för att undvika vätskeläckage.

Det kommer också att finnas olika injektionsmetoder för olika studieställen, såsom: subkutan injektion, trakeal administrering, intrakraniell injektion och så vidare. Du bör hänvisa till relevant litteratur och rådgöra med Yeasens tekniska team innan du experimenterar.

Doseringscykel och dosering

Korttidsadministrering: en enda injektion av klorofosfatliposomer 200 µL (20 - 25 g vikt) vid en specifik tidpunkt för att detektera makrofagclearningseffektivitet eller för experiment nedströms.

Långtidsadministrering: mer än en vecka eller mer krävs för att uppnå clearance av makrofager. I WT-möss, till exempel, 200 µL (20 - 25 g vikt) ges vanligtvis som första dos, följt av 200 µL var 2-3 dag.

Referenstestprotokoll

Organ/makrofager

Dosering (20-25 g/mus)

Mjält/röd massa makrofager

Enkeldos: 200 µL/mus (IV eller IP).
Långtidsutarmning: första dosen på 200 µL/mus, sedan 200 µL/mus med 2-3 dagars intervall

Lever/kufferceller

Enkeldos: 200 µL/mus (IV eller IP).
Långtidsutarmning: första dosen på 200 µL/mus, sedan 200 µL/mus med 2-3 dagars intervall

Lung/alveolära makrofager

IV (150-200 µL) kombinerat med intratrakeal eller intranasal (50 µL) ger de bästa resultaten.

lymfkörteln

Injektion (100-200 µL)/mus, specifika doseringsregimer finns i litteraturen.

Hjärna/mikroglia

Intracerebroventrikulärt inträde i cerebrospinalvätska, 10 µL/mus, 50 µL/råtta.

Blod/monocyter

150-200 µL/mus (IV), maximal utarmningshastighet uppnås inom 24 timmar, men maximal utarmningshastighet efter 1 - 7 dagar är stamberoende.

Obs: Ovanstående är endast för referens, se relevant litteratur och rådfråga Yeasens tekniska team innan experiment.

Produktrekommendation

Produktnamn

Artikelnummer

Specifikation

Klodronatliposomer (från Vrije Universiteit Amsterdam)

40337ES08

5 ml

40337ES10

10 ml

Kontrollliposomer (PBS)

40338ES08

5 ml

40338ES10

10 ml

Förfrågan