Det cirkulära RNA -forskningsverktyget -rnase r

Det cirkulära RNA-forskningsverktyget -RNAse R

—— Accelerera cirkulär RNA-läkemedelsutveckling

Under de senaste åren har mRNA-vaccinet/läkemedlet gradvis kommit in i allmänhetens vision. mRNA-vaccinet/läkemedlen har fördelarna med snabb design, låg kostnad och enkel produktion, men eftersom mRNA i sig är lätt att bryta ner, förbättras det för närvarande främst stabiliteten hos mRNA-preparatet genom att lägga till en hatt och svans, och assisterad mRNA-translation. På senare år har forskare hittat en ny typ av RNA - Circular RNA (Circular RNA, circRNA). Sådana RNA är en kovalent sluten ringstruktur, som inte är lätt att brytas ned. Jämfört med mRNA är circRNA stabilare och kan uppnå icke-hattberoende translation. Därför ger upptäckten av CIRCRNA möjligheter för utveckling av en ny generation RNA-vacciner och läkemedel med enklare, bättre stabilitet.

Figur 1: Processen för RNA-vaccin 1

Produktionsprocessen för CIRCRNA inkluderar: mallberedning, in vitro-transkription, DNA-mallborttagning, cirkulär och rening. Efter att RNA har cirkulerats är det nödvändigt att använda ribonukleas R (Ribonukleas R, RNASE R) för att smälta det obemannade RNA:t för att uppnå syftet att berika CirCRNA. Yeasen har molekylär enzymatisk ingenjörskonst och plattform för rationell evolution. Det säkerställer samtidigt produktens kvalitet. Yeasen FoU-team utvecklade framgångsrikt ett RNASE R-enzymer med hög renhet och hög aktivitet.

RNASE R (CAT#14606ES) är ett Mg2+beroende 3 '→ 5' ribonukleinsyraexonukleas som härrör från E. coli. Det kan smälta alla linjära RNA och smälter inte CirCRNA, lariat-RNA. Det används ofta för att ta bort linjära RNA-molekyler och förverkliga syftet med att berika icke-linjärt RNA som CirCRNA och lariat-RNA.

Drag

Proteinrenhet (SDS-PAGE) ≥95 %

Figur 2: Detektion av proteinrenhet: Olika volymer (1 μL, 2 μL, 3 μL) av produkten (Cat#14606ES) visar hög renhet ≥95 %.

Inga rester exonukleas

Figur 3: 20 U RNASE R tillsattes till 0,5 μg λDNA-Hind III Digest, inkuberade vid 37 ℃ i 4 timmar. Resultatet visar att ingen rest exonukleas detekterades från RNASE R (CAT#14606ES)-produkterna.

Förmåga att smälta linjärt RNA och CircRNA

Figur 4: RNASE R (CAT#14606ES) kan smälta linjära RNA-molekyler
Figur 5: CircRNA kan tolerera behandlingen av RNASE R (CAT#14606ES).

Produkt

Katt

Storlek

RNAse R (20 U/μL)

14606ES

250U/2500U/10000U
RNase R (GMP-grad, 20 U/μL) 14615ES 250U/2500U/10000U

T7 RNA-polymeras GMP-kvalitet (250U/μL)

10625ES

10KU/100KU/2500KU
CleaScrip™ T7 RNA-polymeras (lågt dsRNA, 250 U/μL) 10628ES 10KU/100KU/2500KU

Hänvisning

  1. Qu L, Yi Z, Shen Y, et al. Cirkulära RNA-vacciner mot SARS-CoV-2 och nya varianter. Cell.2022;185(10):1728-1744.e16. doi:10.1016/j.cell.2022.03.044
  2. Chen L, Wang C, Sun H, et al. Bioinformatikverktygslådan för upptäckt och analys av circRNA. Kort Bioinform. 2021;22(2):1706-1728. doi:10.1093/bib/bbaa001

Förfrågan