Gratis guide: Optimering av proteinrening arbetsflöden

Proteinrening är en grundläggande teknik inom biokemi och molekylärbiologi, flitigt använd i forskning, diagnostik och terapeutiska tillämpningar. För att studera ett specifikt protein är det första steget att isolera och rena det från biologiska prover. Men att uppnå högrent protein kan vara en utmaning, med tanke på mångfalden av proteiner och komplexiteten hos biologiska system. Att förstå kärnprinciperna för proteinrening och välja rätt tekniker för din forskning kan avsevärt förbättra ditt arbetsflödes effektivitet och avkastning.

Grunderna för proteinrening

Proteinrening bygger på skillnader i de fysikaliska och kemiska egenskaperna hos proteiner, såsom storlek, laddning, hydrofobicitet och affinitet för specifika ligander. Genom att utnyttja dessa skillnader kan forskare effektivt separera målproteiner från andra biologiska komponenter, vilket minimerar kontaminering.

Här är de primära proteinreningsteknikerna baserade på distinkta separationsmekanismer:

Var och en av dessa tekniker kan optimeras genom att välja lämpliga material och kolumner. Den ideala metoden beror på proteinets egenskaper och den renhetsnivå som krävs för nedströmsapplikationer.

Optimera ditt arbetsflöde för proteinrening med Ylätta Biologiska produkter

På Yeasen Biologi, vi tillhandahåller ett brett utbud av högkvalitativa reagenser och material utformade för att effektivisera proteinrening. Oavsett om du hanterar komplexa biologiska prover eller behöver proteiner med hög avkastning och hög renhet, erbjuder vi verktyg för att förbättra din reningsprocess. Här är en översikt över några av våra nyckelprodukter som hjälper dig att optimera dina reningsarbetsflöden:

Hans taggproteinrening (Katt#20502ES):

Vid rekombinant proteinuttryck, Hans tagg (vanligtvis 6×His) används ofta på grund av dess ringa storlek, låga immunogenicitet och minimala inverkan på proteinfunktionen. Hans tag-proteiner kan effektivt renas med affinitetshartser kelaterade med nickeljoner, såsom Ni-NTA-hartser. HisSep Ni-NTA Agarose Resin (Cat#20502ES) från Ylätta Biologi använder starkt tvärbunden agarosgel som matris, kombinerat med den fyrkoordinerade kväve-triättiksyra (NTA) liganden för att bilda stabila nickeljonkelater. Kombinerad struktur säkerställer effektiv proteinbindning och elueringsprestanda.

Tag antikropp affinitetsrening

Affinitetsrening av märkningsantikroppar använder hög specifik bindning mellan antikroppen och dess specifika märkning för att uppnå rening av fusionsproteinet. Vanliga taggar inkluderar Flagga, HA, Myc, etc. Genom att använda motsvarande antikroppsaffinitetsmedia kan proteinet av intresse effektivt isoleras från komplexa prover.

Yeasen Biologi tillhandahåller en mängd olika produkter för affinitetsrening av etikettantikroppar:

• Anti-flagga affinitet Gel (Katt#20584ES):
  Framställd av högkvalitativ murin IgG2b monoklonal antikropp med 4% starkt tvärbunden agarosgel through utbudskoppling, den har en hög Flag-tag-fusionsproteinladdningskapacitet, suden kan användas för immunoutfällning och rening av Flag-tag-proteiner. yeasen.com

• Anti-HA Affinity Gel(Katt #20586ES):
  Framställd av högkvalitativ murin IgG1 monoklonal antikropp och Sepharose 4B gel genom tillförselkoppling, den har en hög laddningskapacitet av HA-tag fusionsproteiner, lämplig för immunoutfällning och rening av HA-tag proteiner. jäst.com

• Anti-Myc Affinity Gel(Katt #20587ES）:
  Den högkvalitativa murina IgG1 monoklonala antikroppen är kopplad till Sepharose 4B gel, designad för rening av Myc-märkta proteiner, med hög specificitet och hög bindningsförmåga.

• Anti-flagga immunomagnetiska pärlor(Katt#20565ES）:
  Denna immunomagnetiska pärla är kopplad med magnetiska agarosmikrosfärer med användning av högkvalitativ mus-härledd IgG2b monoklonal antikropp, som snabbt kan rena flaggmärkta proteiner under inverkan av magnetiska fält, och är lämplig för rening av små provstorlekar.

Antikroppsaffinitetsrening (kat#36401ES):

Antikroppsaffinitetsrening är en metod för att använda den specifika bindningen av en antikropp till dess antigen för proteinrening. Alkaliresistent rekombinant protein A agarosreningsharts (Cat#36401ES) används vanligtvis som ett antikroppsaffinitetsreningsmedium och används allmänt för antikroppsrening och anrikning.

Proteinas

I proteinstudier används proteaser för att klyva fusionstaggar, vilket återställer det naturliga tillståndet för målproteinet. Att införliva dessa proteaser i ditt arbetsflöde för proteinrening kan förbättra kvaliteten och funktionaliteten hos dina målproteiner, vilket underlättar avancerade forsknings- och utvecklingsprojekt.

• Rekombinant enterokinas (Katt#20401ES):

Enterokinas, även känt som enteropeptidas, är ett serinproteas som specifikt klyver efter aminosyrasekvensen DDDDK. Yeasens rekombinanta enterokinas uttrycks i Escherichia coli och är fri från taggar, vilket säkerställer att den inte stör nedströmsapplikationer. Detta enzym är idealiskt för att ta bort fusionstaggar från rekombinanta proteiner, vilket underlättar produktionen av naturliga proteiner för strukturella och funktionella studier.

• lPNGase F (Cat#20407ES):

PNGase F är ett amidas som specifikt klyver mellan de innersta GlcNAc- och Asn-resterna av N-kopplade glykoproteiner. Yeasens PNGase F tillhandahålls i en koncentration av 100 000 U/mL, vilket erbjuder hög aktivitet för deglykosyleringsreaktioner. Detta enzym är avgörande för att studera glykoproteinstrukturer och funktioner, eftersom det tar bort N-länkade glykaner utan att påverka peptidens ryggrad.

• Rekombinant trypsin (MS-SAFE) (Katt#20416ES):

Trypsin är ett serinproteas som klyver peptidbindningar på karboxylsidan av lysin- och argininrester. Yeasens rekombinanta trypsin är MS-SAFE, vilket innebär att det är lämpligt för masspektrometriapplikationer på grund av dess höga renhet och minimala autolytiska aktivitet. Detta enzym är idealiskt för proteomiska studier, inklusive proteinnedbrytning för masspektrometrianalys.

Rening Metod	Reagenstyp	Produkttyp	Rekommenderade produkter
Gelfiltrering	Dextran Gel Kromatografi	Avsaltningsfyllmedel Avsaltning av förpackade kolonner Avsaltning av gravitationskolonner Snurra kolumner	Avsaltningskolonn G25 M(Katt#20590ES） Spinnavsaltningskolonn, 0,5 ml (Katt#20599ES） Gravity Desalting Column, 8.3 ml (Katt#20741ES）
	Agaros Gel Kromatografi	Filler Färdigpackade kolumner	Geldex 200 PG högupplöst agarosgelkromatografiförpackning (10-600 kDa) (Cat#20598ES) Geldex 200 PG kromatografikolumn (Katt#20593ES）
Jonbytare	Anjonbyte Kromatografi	Filler Färdigpackade kolumner	Q Agarose HP (Q Strong Anion Exchange Chromatography Packing HP) (Cat#20460ES) Q HP Strong Anion Exchange Prepacked Column, 5 mL (Cat#20462ES)
	Katjonbyteskromatografi		SP Agarose HP (SP Strong Cation Exchange Chromatography Packing HP) (Cat#20463ES) SP HP Strong Cation Exchange Färdigpackad Kolonn, 5 mL (Cat#20465ES)
Hydrofob interaktionskromatografi	Svag hydrofob Kromatografi	Filler Färdigpackade kolumner	Högupplöst butylsvag hydrofob kromatografimedium (Cat#20484ES) Butyl HP Weakly Hydrophobic Chromatography Preloaded Column, 5 mL (Cat#20485ES)
	Stark hydrofobisk Kromatografi		Högupplöst fenyl starkt hydrofob kromatografimedium (Katt#20486ES) Phenyl HP Strongly Hydrophobic Chromatography Preloaded Column, 5 mL (Cat#20487ES)
Affinitetsrening	Hans-tagg Proteinrening	Harts Färdigpackade kolumner Reningsmagnetiska pärlor	His-tag Protein Agarose Purification Resin (Katt#20502ES) His-tag-proteinrening förladdad kolumn, 5 mL (Katt#20504ES) His-tag-proteinrening magnetiska pärlor (katt#20561ES)
	moms-märka Proteinrening	Harts Färdigpackade kolumner Reningsmagnetiska pärlor	Glutation-agarosharts (för GST-märkt proteinrening) (Katt#20507ES) GST-märkt proteinrening förladdad kolumn, 5 mL (Katt#20510ES) GST-märkta magnetiska pärlor för proteinrening (Katt#20562ES)
	MBP-märka Proteinrening	Harts Färdigpackade kolumner	MBP-märkt protein högt tvärbundet reningsharts (Katt#20515ES) MBP-märkt proteinrening förladdad kolumn, 5mL (Katt#20517ES)
	Strep(Ⅱ) Tagga Proteinrening	Harts Färdigpackade kolumner	Strep(II)-märkt proteinagarosreningsharts (Katt#20495ES)
	Bioti-märka Proteinrening	Harts Färdigpackade kolumner Immunomagnetiska pärlor	Streptavidin-agarosreningsharts (Katt#20512ES) Biotin molekylär rening förladdad kolonn, 5 mL (Katt#20514ES) Streptavidin (SAV) Immunomagnetic Beads (Cat#47503ES)
	Tag Antibody Affinity Purification	Gel Immunomagnetiska pärlor	Anti-Flag Affinity Purification Gel (Katt#20584ES) Anti-HA Affinity Purification Gel (Katt#20586ES) Anti-Myc Affinity Purification Gel (Katt#20587ES) Anti-flagga immunomagnetiska pärlor (Katt#20565ES)
	Antikroppsaffinitetsrening	Harts Färdigpackade kolumner Immunomagnetiska pärlor	Rekombinant protein A agarosreningsharts (Katt#36401ES) Protein G Agarose Rening Resin (Katt#36405ES) Protein A/G Agarose Rening Resin (Katt#36403ES) Protein A/G Immunomagnetic Beads (Katt#36417ES)
	Annan antikroppsaffinitetsrening	Harts Färdigpackade kolumner	Endotoxin högeffektivt borttagningsharts (Cat#20518ES) Heparinaffinitetsreningsmedel (Katt#20493ES)
其他产品	Proteaser	Tagklyvningsenzymer Glykosidaser Enzymer av masspektrometriklass	E.coli uttryckt rekombinant enterokinas (utan etikett) (Katt#20401ES) Bovint trombin (hög viabilitet, >2000 IE/mg) (Cat#20402ES) rTEV Protease Recombinant Tobacco Etch Virus Protease (Cat#20403ES) PNGas F, N-glykosidas F (100 000 U/mL) (Katt#20407ES) Rekombinant trypsin (MS-SAFE) Rekombinant trypsin (masspektrometriklass) (Katt#20416ES)
	Kromatografiförbrukningsartiklar	Gravity Flow Tomma kolumner skriv tomma kolumner YXK kolumner Dialysväskor	12 mL gravitationskromatografi tom kolumn (Cat#20523ES) 5 mL Typ C tom kolumn (ansluten till Akata, spruta eller peristaltisk pump) (Cat#20526ES) YXK16/70 Chromatography Tom Column (Cat#20443ES) 27 mm dialyspåse (MWCO 50 kDa) (Cat#20534ES)

Slutsats: Skräddarsy ditt arbetsflöde efter dina behov

Att optimera ditt arbetsflöde för proteinrening är avgörande för att uppnå hög renhet, högutbyteproteiner för din forskning eller tillämpning. Genom att förstå reningsprinciperna och välja rätt verktyg kan du effektivisera din process och undvika vanliga fallgropar. Yeasen Biology tillhandahåller reagenser och förbrukningsvaror av högsta kvalitet för alla stadier av proteinrening, vilket säkerställer att dina proteiner är rena, funktionella och redo för analys.

För att lära dig mer om hur våra produkter kan förbättra din proteinreningsprocess, besök våra produktsidor eller kontakta vårt team för personliga rekommendationer.

För mer information eller för att köpa, besök vår officiella vibplats.