Tag Antikroppar Introduktion
Tag-antikroppar används för detektion och rening av tag-sekvenser på olika kommersiella expressionsvektorer för att analysera och bestämma uttrycksnivåerna och funktionerna hos målproteinerna. Principen bakom deras användning är antigen-antikroppsreaktionen, där dessa tag-antikroppar specifikt kan binda till motsvarande tag-fusionerade proteiner. Här är en kort lista över några vanliga proteintaggar som är lämpliga för användning med tag-antikroppar:
Tabell 1. Introduktion till olika proteinetiketter
| Märka | Sekvens | Drag | Tillämpliga scenarier |
| Flagga | DYKDDDDK | 1. Liten molekylvikt, förändrar inte fusionsproteinets funktion, mer hydrofil än liknande taggar; 2. Innehåller enterokinasigenkänningsställe (DDDDK), vilket är bekvämt för att ta bort taggar när det fusioneras vid N-terminalen av målproteinet. | Lämplig för rening och detektion av fusionsproteiner med låg uttrycksnivå i eukaryota expressionssystem. |
| HA | YPYDVPDYA | Härlett från hemagglutininytantigendeterminanten av influensaviruset; undvika att använda i experiment relaterade till apoptotiska celler. | Lämplig för proteinrening och detektion. |
| Myc | Glu-Gln-Lys-Leu-Ile-Ser-Glu-Glu-Asp-Leu | Härledd från den mänskliga proto-onkogenen Myc; undvika att använda i experiment relaterade till mänskliga celler. | Används vanligtvis inte för proteinrening, lämplig för detektion. |
Yeasen tag antikropp affinitetsrening produkter är gjorda av högkvalitativa mus IgG monoklonala antikroppar som råmaterial. Genom en process som kallas "kovalent koppling" är dessa antikroppar riktade och effektivt kopplade till agarosmatriser eller ytorna på nanomagnetiska pärlor. Detta minskar inte bara ospecifik proteinbindning utan uppnår också en högre antikroppsbelastning på mediet. Dessutom tillhandahåller den tag-antikroppsreningsprodukter som är lämpliga för olika reningskrav, inklusive olika tag-antikroppsreningshartser och immunomagnetiska pärlor, vilket underlättar reningen av taggade proteiner och immunoutfällningsexperiment med manuella eller automatiserade metoder.
Yeasen Tag Antibody Purification Produktvalsguide
| Produktserie | Reningshartsserien | ImmunoMagnetic Bead Series | |||||
| Produktnummer | 20584ES | 20586ES | 20587ES | 20565ES | 20566ES | 20567ES | 20564ES |
| Produktnamn | Anti-HA MagBeads | Anti-MycMagBeads | |||||
| Ligander | Högkvalitativa mus IgG monoklonala antikroppar | Högkvalitativa mus anti-GFP/Flagga/HA/Myc monoklonala antikroppar | |||||
| Proteinbindningskapacitet | ≥1,1 mg flaggmärkt fusionsprotein/ml gel ≥1,5 mg HA-märkt fusionsprotein/ml gel ≥0,9 mg Myc-märkt fusionsprotein/ml gel | ≥0,8 mg GFP-märkt fusionsprotein/mg pärlor ≥0,6 mg flaggmärkta fusionsprotein/mg pärlor ≥0,4 mg HA-märkta fusionsprotein/mg pärlor ≥0,5 mg Myc-märkt fusionsprotein/mg pärlor
| |||||
| Matris | 4% tvärbunden agarosgel | Kiselbaserade magnetiska pärlor | |||||
| Partikelstorlek | 45-165 um | 200 nm | |||||
| Fördelar | Låg ospecifik bindning, hög kapacitet | Hög renhet, hög kapacitet, hög specificitet, bekväm användning med magnetstativ | |||||
| Rekommenderade applikationer | Affinitetsrening av taggade fusionsproteiner i valfri skala, immunfällning (IP) | Immunfällning (IP), Samimmunfällning (COIP) | |||||
Testdata
1. Yeasen Anti-Flag Affinity Gel (20584ES) vs. Brand S* Reningsjämförelsetest.
Bild 1. Yeasen (a) vs. Brand S* (b) Anti-Flag Gel Jämförelse Test Gel Bild
M: Proteinmarkör; 1: Pre-kolonnlysat av Flag-N, M, C proteiner; 2: Post-kolonnpermeat av Flag-N, M, C proteiner; 3: Eluering (pH 2,7 eluering); 4: Eluering (pH 12 eluering)
2. Pilarna i figuren nedan indikerar de målmärkta proteinerna, och de tre banden från topp till botten efter kokning av de magnetiska pärlorna direkt är BSA, tung antikroppskedja och lätt antikroppskedja.
Figur 2. Anti-Flag MagBeads Rening av flaggmärkta proteiner
1: E. coli-lysat som innehåller flaggmärkt protein 10 μL; 2: Supernatant efter inkubation av E. coli-lysat innehållande flaggmärkt protein med magnetiska pärlor 10 μL; 3: Direkt kokning av Flag-taggat protein med Anti-Flag MagBeads 10 μL; 4: Direkt kokning av Anti-Flag MagBeads; 5: Markör
3.
Figur 3. Anti-GFP MagBeads Rening av GFP-märkta proteiner
1: E. coli-lysat innehållande GFP-märkt protein 10 μL; 2: Supernatant efter inkubation av E. coli-lysat innehållande GFP-märkt protein med magnetiska pärlor 10 μL; 3: Direkt kokning av GFP-märkt protein med Anti-GFP MagBeads 10 μL; 4: Direkt kokning av Anti-GFP MagBeads; 5: Markör
Produktinformation
| Produktnamn | Produktnummer | Specifikation |
| 20584ES03/08/25 | 1 ml/5 ml/25 ml | |
| 20586ES03/08/25 | 1 ml/5 ml/25 ml | |
| 20587ES03/08/25 | 1 ml/5 ml/25 ml | |
| 20565ES03/08 | 1 ml/5 ml | |
| Anti-HA MagBeads | 20566ES03/08 | 1 ml/5 ml |
| Anti-Myc MagBeads | 20567ES03/08 | 1 ml/5 ml |
| 20564ES03/08 | 1 ml/5 ml |