Produktapplikationsscenarier

1. Avlägsnande av resterande nukleinsyror i biologiska läkemedel: Under produktionen av biologiska läkemedel, såsom virus, vacciner och proteiner, kan UltraNuclease tillsättas för att bryta ned kvarvarande nukleinsyror. Detta steg ökar inte bara utbytet av virus utan minskar också avsevärt innehållet av kvarvarande nukleinsyror, vilket säkerställer läkemedlens säkerhet och effektivitet.
2. Viskositetsreduktion: Genom att bryta ner nukleinsyror reduceras cellysatens viskositet, vilket underlättar filtrerings-/ultrafiltreringsprocesser under reningen av cellhärledda partiklar såsom virus, AAV-vektorer och inklusionskroppar.
3. Förbättrad upplösning och återhämtning: I ELISA, tvådimensionell elektrofores och immunoblotting-analyser, förbättrar det upplösning och återhämtning.
4. Förebyggande av cellaggregation: UltraNuclease kan effektivt förhindra aggregation av humana perifera mononukleära blodceller (PBMC).

Effekten av olika reaktionsförhållanden på enzymaktivitet

För att utforska de optimala driftsförhållandena för UltraNuclease studerade vi effekterna av olika buffringssystem på enzymaktivitet.

Jämförande analys av konkurrerande produkter (från ett företag)

Prestandan hos UltraNuclease överensstämmer med företag A, och den kan uppnå en ersättningseffekt.

Kvalitetskontrollstandarden överensstämmer med GMP-produktionsstandarden

Detektionsobjekt	Kvalitetsstandarder	Detektionsmetod
Enzymaktivitet	250-300 U/uL	Universell substratmetod
Specifik aktivitet	≥1.5×106 U/mg	Universell substratmetod
Proteinrenhet	≥99 %	SDS-SIDA
Proteas	Uppfyller kraven	Universell substratmetod
Bakteriellt endotoxin	Uppfyller kraven	Gelmetoden
Värdprotein	Negativ	ELISA-metod
Värd-DNA	Negativ	qPCR-metoden
Steril testning	Steril tillväxt	Allmän regel 1101
Patogen upptäckt	Negativ (ej upptäckt)	Se den interna metoden
Mycoplasma testning	Negativ (ej upptäckt)	Se den interna metoden
Tungmetalltestning	Uppfyller kraven	Allmän regel 0821

För att matcha användningen av UltraNuclease har Yeasen också självständigt utvecklat ett specifikt detektionskit för UltraNuclease, som effektivt kan detektera kvarvarande enzym och minska riskerna. Yeasen UltraNuclease Residual Detection Kit har utvecklats med hänvisning till 2020 Chinese Pharmacopoeia <9101> Riktlinjer för validering av analytiska metoder, och följer strikt nyckelkraven för multiparametertestning (linjärt område, specificitet, noggrannhet, precision, känslighet, accelererad stabilitet, etc.).

Residual UltraNuclease Detection

I normala reningssteg avlägsnas UltraNuclease lätt som föroreningar. För att detektera den specifika restmängden av omnipotent UltraNuclease används det ofta som en standardprodukt inom industrin och ett matchande ELISA-kit utvecklas.

UCF.ME® UltraNuclease ELISA-kit som utvecklats oberoende av Yeasen använder principen om dubbel-antikropp-sandwich-enzymkopplad immunanalys (sandwich ELISA), som exakt kan detektera den kvarvarande mängden UltraNuclease i prover. Satsen är stabil i linjäritet, repeterbarhet, återhämtningshastighet och specificitet.

Principen för Yeasen UltraNuclease ELISA Kit (tvåställs immunoenzymetrisk analys)

Produktegenskaper:

Regulatorisk efterlevnad: Fullständigt validerad enligt regulatoriska krav, valideringsrapporter finns tillgängliga; Kvalitetssäkring: Alla råvaror för kitet är oberoende utvecklade, vilket säkerställer kvalitetskontroll;

Hög känslighet: Kvantitativ gräns så låg som 23.5 pg/ml;

Hög precision: Hög repeterbarhet inom batch och låg variabilitet mellan batch;

Stark specificitet: Ingen korsreaktivitet med andra konstruerade cellproteiner

Prestandaparametrar:

Produktparametrar	innehåll
Analystid	3,5 timmar
Analysprincip	Tvåställs immunoenzymetrisk analys
Signalförstärkning	Biotin-streptavidin-systemet
Detektionsvåglängd	450nm och 630nm
Känslighet	23,5 pg/ml
Detektionsområde	0,047~3 ng/ml
Detektionsobjekt	UltraNuclease
Tillämpligt instrument	Molekylära enheter: M- och i-serien
Ansökan	Detektion av kvarvarande UltraNuclease i reningsprocesser av cell- och genterapi och rekombinanta adenoassocierade virusvacciner

Produktdata:

Reagenssats standardkurva:

Faktiskt provåterställningsexperiment:

UltraNuclease spetsades i 5 μg/mL cellyslösningar (HEK293, E.coli, CHO och Vero) oberoende med en slutlig spetsad konc. av 1,5 ng/ml. Noggrannheten i olika cellprov visade utmärkt än andra leverantörer.

Specificitet demonstration

Slutsats: Testkitet har hög specificitet utan korsreaktion; parvisa jämförelser, "*" Signifikant skillnad från negativt urval; "NS" Ingen signifikant skillnad från negativt urval.

Precision:

Repeterbarhet:

Koncentration ng/ml	6 duplicerade datum i samma skylt						CV-värde
3	2,412	2,390	2,323	2,367	2,476	2,291	2,53 %
1.5	1,780	1,883	1,884	1,908	1,876	1,883	2,19 %
0,75	1,123	1,215	1,166	1,183	1,140	1,109	3,12 %
0,375	0,691	0,706	0,708	0,722	0.722	0,679	2,21 %
0,1875	0,449	0,462	0,453	0,460	0,447	0,433	2,13 %
0,094	0,306	0,308	0,304	0,311	0,295	0,302	1,65 %
0,047	0,242	0,241	0,240	0,241	0,256	0,240	2,37 %
0	0,183	0,192	0,189	0,187	0,189	0,189	1,43 %

Slutsats: 6 duplicerade testades vid varje koncentration på standardkurvan, och alla CV% var lägre än 5%.

Mellanprecision:

Mellanprecision
Provkoncentration	1,5 ng/ml	0,375 ng/ml	0,094 ng/ml
Analytiker 1	1,388	0,382	0,079
Analytiker 2	1,458	0,363	0,068
Analytiker 3	1,318	0,37	0,063
Genomsnitt	1,388	0,372	0,07
SD	0,070	0,010	0,008
CV-värde	5,04 %	2,59 %	11,69 %

3 analytiker genomförde UCF.ME™ UltraNuclease ELISA-experimentet och CV% var lägre än 15%

Produktinformation:

Produktnamn	Produkt antal	Produktspecifikationer
UCF.ME®UltraNuclease GMP-grade (bensonas)	20157ES25/50/60/80/90	25KU/50KU/100KU/1MU/5MU
UCF.ME® UltraNuclease ELISA Kit	36701ES59	96T

Andra relaterade produkter

Produktnamn	Produkt antal	Produktspecifikationer
Salt Active UltraNuclease GMP-grade	20159ES25/50/60/80/90	25KU/50KU/100KU/1MU/5MU
Salt Active UltraNuclease ELISA kit	36703ES96	96T