Beskrivning
Produktbeskrivning
2×Hieff Canace™ Plus PCR Master Mix (With Dye) är en färdigblandad 2x-lösning som innehåller Hieff Canace™ Plus High-Fidelity DNA-polymeras, dNTPs och ett optimerat buffertsystem. Blandningen innehåller två monoklonala antikroppar som hämmar polymerasaktivitet och 3'→5'exonukleasaktivitet vid rumstemperatur, vilket möjliggör mycket specifik Hot Start PCR. Tillägget av förlängningsfaktorer möjliggör amplifiering av långa fragment, med målfragment upp till 13 kb. Detta enzym uppvisar 5'→3'-DNA-polymerasaktivitet och 3'→5'-exonukleasaktivitet, med en trohet som är 83 gånger den för Taq DNA-polymeras och 9 gånger den för vanligt Pfu-DNA-polymeras. Den är lämplig för att amplifiera komplexa mallar, producera trubbiga PCR-produkter.
2×Hieff Canace™ Plus PCR Master Mix (With Dye) erbjuder fördelar som enkelhet, hög känslighet, stark specificitet och utmärkt stabilitet. Reaktionssystemet kräver endast tillägg av primers och mall, och ett tvåstegs PCR-protokoll kan användas för att förenkla proceduren och spara tid. Produkten inkluderar elektroforesspårningsfärg, vilket möjliggör direkt laddning av PCR-produkter för gelanalys. Dessutom innehåller den ett speciellt skyddsmedel som säkerställer stabil aktivitet även efter upprepade frys-upptiningscykler.
Specifikationer
| Cat.No. | 10154ES01 / 10154ES03 / 10154ES08 / 10154ES60 |
| Storlek | 100 μL / 1 mL / 5 × 1 mL / 100 × 1 mL |
Lagring
Denna produkt bör förvaras vid -25~-15 ℃ för 1 år.
Instruktioner
1. Rekommenderade PCR-reaktionssystem.
| Komponenter | Volym(μL） | Slutlig koncentration |
| 2× Hieff Canace™ Plus PCR Master Mix (med färgämne)* | 25 | 1× |
| Mall*** | x | - |
| Fram Primer(10 μmol/L）** | 2 | 0.4 μmol/L |
| Rnågonsin Primer(10 μmol/L）** | 2 | 0,4 μmol/L |
| ddH2O | Upp till 50 | - |
*Den 1× slutliga koncentrationen av blandningen innehåller 1 U/50 μL polymeras, 2 mmol/L Mg2+och 200 μmol/L dNTP.
**Den rekommenderade slutliga koncentrationen av primers i PCR-reaktionen är 0,2-1 μmol/L, med 0,4 μmol/L att föredra.
***Rekommenderade mallmängder för ett 25 μL reaktionssystem:
| Malltyp | Fragmentstorlek (1 kb-10 kb) |
| Genomiskt DNA | 50 ng-200 ng |
| Plasmid eller viralt DNA | 10 pg-20 ng |
| cDNA | 1-2,5 μL (inte överstiger 1/10 av den totala PCR-volymen) |
2. Reaktionsprogram.
1）Tvåstegsprotokoll (föredraget):
| Cykel steg | Temp. | Tid | Cyklar |
| Initial denaturering | 98℃ | 3 min | 1 |
| Denaturering | 98℃ | 10 sek | 30-35 |
| Förlängning | 68℃ | 30 sek/kb | |
| Final extension | 72℃ | 5 min | 1 |
2）Trestegsprotokoll (konventionellt):
| Cykel steg | Temp. | Tid | Cyklar |
| Initial denaturering* | 98℃ | 3 min | 1 |
| Denaturering | 98℃ | 10 sek | 30-35 |
| Glödgning** | 60℃ | 20 sek | |
| Förlängning*** | 72℃ | 30 sek/kb | |
| Final extension | 72℃ | 5 min | 1 |
*Initial denaturering: Rekommenderas vid 98°C i 3 min (5-10 min för mallar med hög GC).
**Glödgning: Rekommenderas vid 60°C i 20 sek (justerbar mellan 10-30 sek). Långvarig glödgning kan orsaka smetar på geler.
***Förlängning: Rekommenderas vid 72°C i 30 sek/kb (upp till 60 sek/kb för komplexa mallar).
3）Protokoll för gradientglödgning (rekommenderas för svåra mål):
| Cykel steg | Temp. | Tid | Cyklar |
| Initial denaturering | 98℃ | 3 min | 1 |
| Denaturering | 98℃ | 10 sek | 15 (minska med 1°C per cykel) |
| Gradientglödgning | 70-55°C | 20 sek | |
| Förlängning | 72℃ | 30 sek/kb | |
| Denaturering | 98°C | 10 sek | 20 |
| Glödgning | 55°C | 20 sek | |
| Förlängning | 72°C | 30 sek/kb | |
| Final extension | 72℃ | 5 min | 1 |
4）Egenskaper för olika PCR-protokoll:
| Protokolltyp | Hastighet | Specificitet | PCR-utbyte | Detektionshastighet |
| Tvåsteg | Snabbast | Hög | Medium | Hög |
| Tresteg | Medium | Medium | Högsta | Medium |
| Gradientglödgning | Långsam | Hög | Medium | Hög |
Anteckningar
1.Denna produkt är endast avsedd för forskning.
2. Använd labbrockar och engångshandskar，för din säkerhet.
Betalning och säkerhet
Din betalningsinformation behandlas säkert. Vi lagrar inte kreditkortsuppgifter och har inte heller tillgång till din kreditkortsinformation.
Förfrågan
Du kanske också gillar
Vanliga frågor
Produkten är endast avsedd för forskningsändamål och är inte avsedd för terapeutisk eller diagnostisk användning hos människor eller djur. Produkter och innehåll skyddas av patent, varumärken och upphovsrätt som ägs av Yeasen Biotechnology. Varumärkessymboler anger ursprungsland, inte nödvändigtvis registrering i alla regioner.
Vissa applikationer kan kräva ytterligare immateriella rättigheter från tredje part.
Yeasen är dedikerad till etisk vetenskap, och anser att vår forskning bör behandla kritiska frågor samtidigt som den säkerställer säkerhet och etiska standarder.