Beskrivning
LZCap AU (3'Acm) är en cap1-analog. Produkten används för transkription med den initiala sekvensen av 5'AU3', och den naturliga cap1-strukturen produceras genom Cap1-transkriptionsskydd. Jämfört med Cap0 producerad med traditionella kapslingsmetoden, gör cap1-strukturen som produceras av CapAU (3'Acm) att SaRNA har högre aktivitet och translationseffektivitet in vivo.
amerikanskt patent godkänt.
Komponenter
Katt nr. | Namn | Storlek |
10685 | LZCap AU (3'Acm) (100 mM) | 100 μL |
1 ml |
Produktdetaljer
Molekylformel | C34H47N13O25P4 (Fri syra) |
Molekylvikt | 1161,71 (fri syra) |
Koncentration | 100 ± 3 mM |
Renhet | HPLC ≥95 % |
LZCap® DNA-malldesign
LZCap®AU(3'Acm) är lämplig för AG-initierade sekvenser. Som visas i figuren nedan kan T7-promotom (understruken) följt av AG-sekvensen effektivt initiera transkription.
Protokoll
1. Tina komponenter som krävs för experimentet på is.
2. Se följande reaktionssystem för att konfigurera transkriptionssystemet vid rumstemperatur.
Modifierad N1-Me-pUTP kan användas i stället för vildtyp UTP. Den modifierade N1-Me-pUTP minskar immunogeniciteten hos mRNA. Henovcom kan också tillhandahålla modifierad nukleotid N1-Me-pUTP (kat.nr.: HN1002).
Anmärkningar:
1) LZCap®AU(3'Acm) är lämplig för T7-promotortranskriptionsvektor med 5 'AU 3'-initierade sekvenser, vilket måste beaktas vid konstruktion av vektorn.
2) Reagenserna, förbrukningsvarorna och behållarna som används i experimentet är fria från RNas-kontamination.
3) Det rekommenderas att använda en linjäriserad DNA-mall för transkription.
4) När modifierade nukleotider användes i stället för nukleotider av vildtyp var reaktionens slutliga koncentration oförändrad.
5) Om PCR-produkten används som DNA-mall för transkriptionsinitiering kan mängden DNA-mall reduceras med hälften.
3. Blanda den beredda reaktionslösningen, centrifugera kort och inkubera vid 37°C i 2-3 timmar. Om transkriptionslängden är mindre än 100nt, öka reaktionstiden till 4-8 timmar.
Allmän säkerhetsprofil
Resultat och Slutsats | |
Cytotoxicitet Testa | Inga cytotoxicitet var observerade med de ändrad nukleosid i multipel cell rader |
Polymeras Hämning Studera | De ändrad nukleosid är varken en inhibitor eller a substrat av mänsklig RNA och DNA polymeraser och är därför inte integrerad till de genomet |
Ames Testa* | Inga genotoxicitet var observerade i de Ames testa |
Lagring
Denna produkt kan lagras vid -25~-15 ℃ i två år.
Försiktighetsåtgärder
- För din säkerhet och hälsa, vänligen bär personlig skyddsutrustning (PPE), såsom laboratorierockar och engångshandskar, när du använder denna produkt.
- Endast för forskningsanvändning.
F&Q
1. Hur designar du LZCap?
Enzymer har en relativt "specifik" igenkänning av substrat. Därför, när vi designar en ny lockstruktur, behöver vi å ena sidan nya strukturella modifieringar för patentändamål, men å andra sidan strävar vi efter att upprätthålla likheten med naturliga/kända strukturer så mycket som möjligt. Den naturliga strukturen har en ribos 3' OH, som kan modifieras (t.ex. metylering). Baserat på detta övervägande valde vi att lägga till ett kol i 3'-positionen för patentnyhet, följt av en NH för att efterlikna vätebindningen av OH, och sedan en acetylgrupp för att reducera basiciteten av NH och förbättra dess vätebindningsförmåga. Aktiviteten av LzCap är bättre än metylated naturlig mössa, möjligen på grund av ökad vätebindning. Jämfört med metyl- och metoxigrupperna kan acetylaminogruppen också öka van der Waals-interaktioner mellan substratet (cap) och den initierande faktorn (enzym).
2. Är acetylaminogruppen stabil?
Acetylaminogruppen är redan tillräckligt stabil. Den är mycket mer stabil än den 7-metylerade positionen och fosfodiesterbindningen, som är de minst stabila delarna av locket.
Kontakta oss för mer information om LZCap-licensiering.
Betalning och säkerhet
Din betalningsinformation behandlas säkert. Vi lagrar inte kreditkortsuppgifter och har inte heller tillgång till din kreditkortsinformation.
Förfrågan
Du kanske också gillar
Vanliga frågor
Produkten är endast avsedd för forskningsändamål och är inte avsedd för terapeutisk eller diagnostisk användning hos människor eller djur. Produkter och innehåll skyddas av patent, varumärken och upphovsrätt som ägs av Yeasen Biotechnology. Varumärkessymboler anger ursprungsland, inte nödvändigtvis registrering i alla regioner.
Vissa applikationer kan kräva ytterligare immateriella rättigheter från tredje part.
Yeasen är dedikerad till etisk vetenskap, och anser att vår forskning bör behandla kritiska frågor samtidigt som den säkerställer säkerhet och etiska standarder.