Beskrivning
LZCap GG (3'Acm) är en cap1-analog. Produkten används för transkription med den initiala sekvensen av 5'GG3', och den naturliga cap1-strukturen produceras genom Cap1-transkriptionsskydd.
amerikanskt patent godkänt.
Komponenter
| Katt nr. | Namn | Storlek |
| 10686 | LZCap GG (3'Acm) (50mM) | 100 μL |
| 1 ml |
Produktdetaljer
| Molekylformel | C35H48N16O25P4 (Fri syra) |
| Molekylvikt | 1216,19 (fri syra) |
| Koncentration | 50±3 mM |
| Renhet | HPLC ≥95 % |
LZCap DNA-mall Design
LZCap GG(3'Acm) är lämplig för GG-initierad sekvenser. Som visas i figur nedan, den SP6 promotor (understruken) följde av GG-sekvensen kan efeffektivt inleda transkription.
Protokoll
1． Tina komponenter krävs för experimentetgå in på is.
2． Tillägga RNase-fritt vatten och NTP till reaktionsrör.
3． Värme LZCap GG(3'Acm) alikvot för 15 min kl 60°C. Svalt kl rumstemperatur för 5 min.
4． Lägg omedelbart till LZCap GG(3'Acm) till röret och vortexa till blanda. Snurra kort till samla flytande.
5． Tillägga 10x transkription Buffert och virvel.
6． Tillägga DNA-mall and SP6 Enzym Blanda.
7． Blanda beredd reaktionslösning, snurra kort, och ruva kl 37°C för 2-3 timmar. Om utskriften längd är mindre än 100nt, öka reaktionstid till 4-8 h.
| Komponent | Volym (μL) | Slutlig koncentration |
| RNase Gratis vatten | Fram till 20 μL | / |
| ATP (100 mM) | 1 | 5 mM |
| UTP (100 mM) | 1 | 5 mM |
| CTP(100mM) | 1 | 5 mM |
| GTP(100mM) | 0,2 | 1 mM |
| LZCap GG(3'Acm) (50 mm) | 1.6 | 4mM |
| 10×Transkription Buffert | 2 | 1 × |
| Linjär DNA | 1 μg | 50 ng/μL |
| SP6 Enzym Blanda | 2 | / |
| Slutlig volym | 20 μL | |
Anteckningar:
1) De SP6 enzym blanda vi rekommenderad till begagnad är MEGAscript® Kit (AM1330).
2) LZCap GG(3'Acm) är lämplig för SP6-promotortranskriptionsvektor med 5 'GG 3'-initierade sekvenser, som behöver beaktas när vektorn konstrueras.
3) De reagenser, förbrukningsvaror och behållare begagnad i de experimentera är gratis of RNase förorening.
4) Det är rekommenderas att använd a linjäriserad DNA tempsent för transkription.
5) När ändrad nukleotider var begagnad i plats av vildtyp nukleotider, de slutlig koncentrattion av de reaktionen var oförändrad.
6) Ändrad N1-Mig-pUTP burk vara begagnad i plats av vildtyp UTP. De modifierad N1-Mig-pUTP minskar immunogenicitet av mRNA. Henovcom burk också förse ändrad nukleotid N1-Mig-pUTP (Katt. Inga.: HN1002).
7) Om PCR prokanal är begagnad som transkriptionen initiering DNA mall, de belopp av DNA mall burk vara nedsatt av halv.
Lagring
Denna produkt kan lagras vid -25~-15 ℃ i två år.
Försiktighetsåtgärder
- För din säkerhet och hälsa, vänligen bär personlig skyddsutrustning (PPE), såsom laboratorierockar och engångshandskar, när du använder denna produkt.
- Endast för forskningsanvändning.
F&Q
1. Hur designar du LZCap?
Enzymer har en relativt "specifik" igenkänning av substrat. Därför, när vi designar en ny lockstruktur, behöver vi å ena sidan nya strukturella modifieringar för patentändamål, men å andra sidan strävar vi efter att upprätthålla likheten med naturliga/kända strukturer så mycket som möjligt. Den naturliga strukturen har en ribos 3' OH, som kan modifieras (t.ex. metylering). Baserat på detta övervägande valde vi att lägga till ett kol i 3'-positionen för patentnyhet, följt av en NH för att efterlikna vätebindningen av OH, och sedan en acetylgrupp för att reducera basiciteten av NH och förbättra dess vätebindningsförmåga. Aktiviteten av LzCap är bättre än metylated naturlig mössa, möjligen på grund av ökad vätebindning. Jämfört med metyl- och metoxigrupperna kan acetylaminogruppen också öka van der Waals-interaktioner mellan substratet (cap) och den initierande faktorn (enzym).
2.Är acetylaminogruppen stabil?
Acetylaminogruppen är redan tillräckligt stabil. Den är mycket mer stabil än den 7-metylerade positionen och fosfodiesterbindningen, som är de minst stabila delarna av locket.
Kontakta oss för mer information om LZCap-licensiering.
Betalning och säkerhet
Din betalningsinformation behandlas säkert. Vi lagrar inte kreditkortsuppgifter och har inte heller tillgång till din kreditkortsinformation.
Förfrågan
Du kanske också gillar
Vanliga frågor
Produkten är endast avsedd för forskningsändamål och är inte avsedd för terapeutisk eller diagnostisk användning hos människor eller djur. Produkter och innehåll skyddas av patent, varumärken och upphovsrätt som ägs av Yeasen Biotechnology. Varumärkessymboler anger ursprungsland, inte nödvändigtvis registrering i alla regioner.
Vissa applikationer kan kräva ytterligare immateriella rättigheter från tredje part.
Yeasen är dedikerad till etisk vetenskap, och anser att vår forskning bör behandla kritiska frågor samtidigt som den säkerställer säkerhet och etiska standarder.