Beskrivning
Hifair™ AdvanceFast One-step RT-gDNA Digestion SuperMix för qPCR representerar en förbättrad iteration av Hifair™ Ⅲ 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix för qPCR (gDNA Digester Plus). Den är utformad för att uppfylla kraven på att utföra både omvänd transkription och genomborttagningsreaktioner i ett enda rör. Dessutom effektiviserar det reaktionsprocessen, minskar reaktionstiden avsevärt och ökar utbytet av den omvända transkriptionsprodukten. 4×Hifair® AdvanceFast One-Step RT SuperMix omfattar alla väsentliga reagenser för den omvända transkriptionsreaktionen. Under reaktionen behöver du helt enkelt komplettera den med gDNA Remover Mix, mall-RNA och vatten för att effektivt syntetisera den initiala strängen av cDNA och samtidigt eliminera genomisk DNA-kontamination. Denna produkt är väl lämpad för omvänd transkription av invecklade RNA-mallar och visar sig vara mycket effektiv för omvänd transkription som involverar ringa mallmängder och gener med låg kopia.
Den omvända transkriptionsprodukten som genereras av just denna produkt är helt kompatibel med både de sondbaserade och färgämnesbaserade qPCR-metoderna. För sondbaserad qPCR rekommenderar vi användning av Hieff Unicon® Universal TaqMan multiplex qPCR-mastermix (Cat#11211), medan för färgämnesbaserad qPCR är Hieff UNICON® Universal Blue qPCR SYBR Green Master Mix (Cat#11184) det rekommenderade valet för högpresterande genuttrycksanalys.
Det är dock viktigt att notera att den omvända transkriptionsprodukten som produceras av denna produkt inte är lämplig för efterföljande applikationer som amplifiering av långa fragment. Om du behöver effektiv omvänd transkription för dessa ändamål rekommenderar vi att du använder Hifair® AdvanceFast 1st Strand cDNA Synthesis Kit (Cat#11149, Cat#11150).
Drag
- 5 min RT
-
Integrerad RT- och gDNA-spjälkning i ett rör
Ansökningar
- RT-qPCR
- Antisens-RNA-syntes
Specifikationer
| Typ av slutprodukt | cDNA (första strängen) |
| PCR-metod | RT-PCR |
| Typ av reagens | Omvänd transkription |
| Typ av prov | RNA |
| Optimal reaktionstemperatur | 37℃ |
| Omvänt transkriptas | M-MLV |
Komponenter
| Inga. | Namn | 11151ES10 (10T) | 11151ES60 (100T) |
| 11151-A | 4×Hifair® AdvanceFast One-Step RT SuperMix | 50 μL | 500 μL |
| 11151-B | gDNA Remover Mix | 10 μL | 100 μL |
| 11151-C | RNase-fritt vatten | 1 ml | 2×1 ml |
Frakt och förvaring
Produkten levereras med torris och kan lagras vid -15℃ ~ -25℃ i 12 månader.
Bruksanvisning
Tina 11151-A/B/C-komponenterna på is, skaka försiktigt om och blanda noggrant varje reagenskomponent. Montera sedan följande komponenter i ett RNase-fritt rör:
| Komponent | Volym (μL) |
| RNase-fri Vatten | Till 20 μL |
| 4×Hifair® AdvanceFast One-Step RT SuperMix | 5 μL |
| gDNA Remover Mix | 1 μL |
| Totalt RNA | 10 pg -5 μg* |
| eller mRNA | 10 pg-500 ng* |
Tabell 1: Reaktionsberedning
*Vi föreslår att inte överstiga 2 μg som den totala mängden RNA-inmatning. Vid låg uttrycksförekomst av målgenen kan den totala RNA-inmatningen ökas upp till maximalt 5 μg.
| Temperatur | Tid |
| 37℃ | 5 min* |
| 85 ℃ | 30 s |
Tabell 2: Reaktionsprotokoll
*Denna process omfattar både omvänd transkription och gDNA-digestion.
Den omvända transkriptionsprodukten är lämplig för omedelbar användning i qPCR-reaktioner eller kan förvaras vid -20°C under en kort tid. För längre lagring rekommenderar vi att alikvotera och förvara den vid -80°C för att förhindra flera frys-upptiningscykler.
Försiktighetsåtgärder:
1. Alla procedurer bör utföras på is, med största försiktighet för att förhindra RNas-kontamination.
2. Säkerställ din säkerhet och välbefinnande genom att bära laboratorierock och engångshandskar.
3. Denna produkt är endast avsedd för vetenskapliga forskningsändamål och bör inte användas på annat sätt.
Betalning och säkerhet
Din betalningsinformation behandlas säkert. Vi lagrar inte kreditkortsuppgifter och har inte heller tillgång till din kreditkortsinformation.
Förfrågan
Du kanske också gillar
Vanliga frågor
Produkten är endast avsedd för forskningsändamål och är inte avsedd för terapeutisk eller diagnostisk användning hos människor eller djur. Produkter och innehåll skyddas av patent, varumärken och upphovsrätt som ägs av Yeasen Biotechnology. Varumärkessymboler anger ursprungsland, inte nödvändigtvis registrering i alla regioner.
Vissa applikationer kan kräva ytterligare immateriella rättigheter från tredje part.
Yeasen är dedikerad till etisk vetenskap, och anser att vår forskning bör behandla kritiska frågor samtidigt som den säkerställer säkerhet och etiska standarder.