Hifair^™ Advanced One Step RT-qPCR Kit är ett kit för fluorescenskvantifiering baserat på SYBR Green I-färgämne. Med hjälp av genspecifika primrar fullbordas omvänd transkription och qPCR-reaktioner i ett rör, vilket eliminerar behovet av upprepade locköppnings- och pipetteringsoperationer, vilket avsevärt förbättrar analyseffektiviteten och minskar risken för kontaminering. För RNA-prover använder kitet värmebeständig Hifair^™ V Omvänt transkriptas för effektiv cDNA-syntes och UNICON^™ HotStart Taq DNA-polymeras för kvantitativ amplifiering. Under det optimerade buffertsystemet kan kittets känslighet vara så hög som 0,1 pg för högt uttryckta mål och så hög som 1 pg för måttligt uttryckta mål, och kitet är också lämpligt för amplifiering och kvantifiering av DNA-prover. Satsen är lämplig för amplifiering och kvantifiering av DNA-prover. Det möjliggör känslig detektering och kvantifiering av nukleinsyror från olika växt- och djurprover, celler och mikroorganismer.

Specifikationer

Komponenter

Lagring

Denna produkt bör förvaras vid -25~-15 ℃ bort från ljus för 1 år.

Instruktioner

1. Reaktion system konfiguration*****

* Low Rox-modeller och modeller utan Rox-korrigering är förberedda direkt enligt ovanstående reaktionssystem. När du använder High Rox-modellen, tillsätt Hieff™ SP High Rox till 2 x Hifair™ Advanced SG-buffert vid 1:250 v/v, blanda väl och centrifugera. 2× Hifair^™ Avancerad SG-buffert med Hieff™ SP High Rox påverkar inte användningen av korrigeringsmodellerna Low Rox och No Rox.

** Den slutliga primerkoncentrationen var 0,2 μmol/L, vilket också kunde justeras mellan 0,1 och 1 μmol/L efter behov.

*** Reagenset är extremt känsligt, med totalt RNA i intervallet 1 pg-1 μg, och testning av humana prover visade en optimal inmatning på 1 pg-100 ng, kontrollerande för ett totalt Ct-värde i intervallet 15-30 som lämpligt.

**** Det rekommenderas att använda 20 μL eller 50 μL för att säkerställa validiteten och reproducerbarheten av målgenamplifieringen.

***** Förbered dig i den ultrarena bänken och använd nukleasresterfria spetsar och reaktionsrör; spetsar med filterpatroner rekommenderas. Undvik korskontaminering och aerosolkontamination.

2）Reaktionsprogram

*Temperaturen för omvänd transkription kan väljas mellan 50-55°C enligt de experimentella behoven. För DNA-prover kan den omvända transkriptionsprocessen utelämnas.

** I speciella fall kan glödgnings-/förlängningstemperaturen justeras enligt primerns Tm-värde, 60°C rekommenderas.

3） Tillämplig modell

Instrumentmodeller som inte kräver Rox-kalibrering:

Bio-Rad: CFX96, CFX384, iCycler iQ, iQ5, MyiQ, MiniOpticon, Opticon, Opticon 2, Chromo4;

Eppendorf: Mastercycler ep realplex, realplex 2 s;

Qiagen: Corbett Rotor-Gene Q, Rotor-Gene 3000, Rotor-Gene 6000;

Roche Applied Science: LightCycler 480, LightCycler2.0, Lightcycler 96;

Thermo Scientific: PikoReal Cycler; Cepheid: SmartCycler; Illumina: Eco qPCR;

Low Rox tillämpliga modeller:

ABI 7500, 7500 Fast, ViiA7, QuantStudio 3 och 5, QuantStudio 6, 7, 12k Flex;

Stratagene MX3000P, MX3005P, MX4000P;

High Rox tillämpliga modeller*:

ABI 5700, 7000, 7300, 7700, 7900HT Fast, StepOne, StepOne Plus.

* För High Rox-modeller, observera att Hieff™ SP High Rox bör läggas till proportionellt till 2 x Hifair^™ Advanced SG Buffer före användning.

Anteckningar

1. Denna produkt är endast avsedd för forskning.
2. Använd labbrockar och engångshandskar, för din säkerhet.

Dokument:

Säkerhetsdatablad

11175ES-A-MSDS-HB230927.PDF

11175ES-B-MSDS-HB230927.PDF

11175ES-C-MSDS-HB230927.PDF

Manualer