Beskrivning
ArCas12a, härlett från CRISPR-systemet för Agathobacter rectalis bakterier och även känd som Cpf1, är ett monomert protein som består av 1263 aminosyror. Som en klass II (typ V) medlem av CRISPR/Cas-systemet fungerar ArCas12a enbart genom ett enda effektorprotein och uppvisar signifikanta skillnader från Cas9, såsom målinriktning mot motiv som är rika på T, som inte kräver transaktiverande crRNA, producerar klibbiga ändar vid DNA-dubbelsträngsbrott, deltar i RNA-nukleas-bearbetning och har DNA-nukleasaktivitet.
ArCas12a saknar HNH-domänen och kan självständigt använda sin RuvC-domän för att känna igen PAM-regionen rik på tymin (T) vid 5'-änden av målnukleinsyran under ledning av CRISPR RNA (crRNA), vilket initierar klyvning av mål-DNA:n. Det har framgångsrikt använts för genomredigering i många däggdjur och växter. Dessutom uppvisar ArCas12a trans-klyvningsaktivitet, som kan urskillningslöst skära icke-mål-enkelsträngat DNA (ssDNA) i reaktionssystemet.
Jämfört med andra LbCas12a/AsCas12a uppvisar ArCas12a högre temperaturanpassningsförmåga (25-55oC), vilket gör den lämplig för genomredigering och nukleinsyradetekteringstillämpningar.
Drag
Brett reaktionstemperaturområde: Uppvisar klyvningsaktivitet inom temperaturområdet 25-55oC
Låg nukleasrest: Inget kvarvarande exonukleas, nickas eller RNas
Cis-klyvningsaktivitet: Mycket effektiv klyvning av dubbelsträngat DNA in vitro
Transklyvningsaktivitet: Hög trans-klyvningsaktivitet, lämplig för nukleinsyradetektion
Ansökningar
CRISPR/Cas-genredigering
Diagnostik och detektion baserat på CRISPR/Cas-systemet
Andra detektionstillämpningar i kombination med isotermisk nukleinsyraamplifieringsteknik (RPA och LAMP), etc.
Specifikationer
| Källa | Cpf1-genen från Agathobacter rectalis uttrycks genom rekombinant uttryck i E.coli |
| Molekylvikt | 149 KDa |
| PAM-sekvens | TTTN eller TTTV |
| Reaktionsförhållanden | 50 mM NaCl, 10 mM Tris-HCl, 10 mM MgCl2, pH 7.9 @25oC |
| Koncentration | 10 µM |
| Renhet | >95 % (SDS-SIDA) |
| Inaktiveringsförhållanden | 85oC, 5-10 min |
Komponenter
| Komponenter Inga. | Namn | 14702ES65 | 14702ES80 |
| 14702-A | ArCas12a nukleas (10 μM) | 100 μL | |
| 14702-B | 10×ArCas12a reaktionsbuffert | 1 ml | 1 ml |
Frakt och förvaring
Denna produkt bör förvaras vid -25 ~ -15oC i 2 år.
Siffror
Figur 1. Test av ArCas12a cis-klyvningsaktivitet: M: Markör; C: Mall dubbelsträngat DNA (dsDNA)
Notera: Under ledning av crRNA kan det effektivt klyva dsDNA (600 bp) för att producera två fragment (200 bp + 400 bp).
Figur 2. ArCas12a Trans-cleavage Activity Test Resultat
Notera: Med användning av dsDNA som mål tillsattes ArCas12a, crRNA och en ssDNA-reporterprob (innehållande en fluorescerande reportergrupp) för in vitro-klyvning. När ArCas12a väl bildar ett komplex med crRNA och mål-DNA, aktiverar det trans-klyvningsaktivitet, skär ssDNA-reporterproben och avger därigenom fluorescens.
Dokument:
Säkerhetsdatablad
Manualer
Betalning och säkerhet
Din betalningsinformation behandlas säkert. Vi lagrar inte kreditkortsuppgifter och har inte heller tillgång till din kreditkortsinformation.
Förfrågan
Du kanske också gillar
Vanliga frågor
Produkten är endast avsedd för forskningsändamål och är inte avsedd för terapeutisk eller diagnostisk användning hos människor eller djur. Produkter och innehåll skyddas av patent, varumärken och upphovsrätt som ägs av Yeasen Biotechnology. Varumärkessymboler anger ursprungsland, inte nödvändigtvis registrering i alla regioner.
Vissa applikationer kan kräva ytterligare immateriella rättigheter från tredje part.
Yeasen är dedikerad till etisk vetenskap, och anser att vår forskning bör behandla kritiska frågor samtidigt som den säkerställer säkerhet och etiska standarder.