Beskrivning
HifairTM Lyo-Redo jag Multiplex One Step RT-qPCR Kit(UDG plus) är ett multiplex kvantitativt PCR-kit baserat på RNA som mall. Under experimentets gång utfördes omvänd transkription och kvantitativ PCR i samma rör, vilket förenklade den experimentella operationen och minskade risken för kontaminering.De unik buffert- och enzymdesign säkerställer att den kan användas vid beredning och produktdesign av enstegs RT-qPCR lyofiliserade reaktionssystem.
I detta kit syntetiserades den första strängens cDNA effektivt av värmeresistent HifairTM Omvänt transkriptas och kvantitativt förstärkt av UniconTM HotStart Taq DNA-polymeras. Satsen innehåller huvudsakligen optimerad lyofiliserbar buffert, enzymblandning etc. Dessutom tillsätts de faktorer som effektivt kan hämma den icke-specifika PCR-amplifieringen och förbättra amplifieringseffektiviteten för flera qPCR-reaktioner, vilket kan säkerställa amplifieringseffektiviteten och utföra upp till multipel amplifieringsreaktion.
Detta kit är försett med lyoprotektant som kan användas för lyofilisering.
Specifikationer
| Komponentnr. | 16645ES60 / 16645ES80 / 16645ES92 |
| Storlek | 100 T / 1000 T / 10 000 T |
Komponenter
| Namn | 16645ES60 (100T) | 16645ES80 (1 000 T) | 16645ES92 (10 000 T) | |
| 16645-A | 4×HifairTM Lyo-buffert | 600 μL | 6 ml | 60 ml |
| 16645-B | HifairTM Lyo-enzymblandning | 100 μL | 1 ml | 10 ml |
| 16645-C | Lyoskyddsmedel | 800 μL | 8 ml | 80 ml |
Lagring
De produkt bör förvaras vid -25 ℃ ~ -15 ℃ i 1 år. Det bör undvika upprepad frysning och upptining.
Instruktioner
1. Reaktionssammansättning:
| Komponenter | Volym (μL) | Slutlig koncentration |
| 4×HifairTM Lyo-buffert | 6 | 1× |
| HifairTM Lyo-enzymblandning | 1 | - |
| Lyoskyddsmedel | 8 | - |
| Primer Mix (10 μM) | 1 | |
| Sondmix (10 μM) | 0,5 | 0,05-0,5 μM |
| Mall RNA | 5 | - |
| DEPC H2O | till 25 | - |
Notera:Var noga med att blanda väl före användning, undvik överdrivna bubblor orsakade av våldsamma vibrationer.
2. Optimerat cykelprotokoll
(1) Standardförstärkningsprocedur
| Reaktionsstadium | Temperatur | Tid | Cykel | |
| 1 | Omvänd transkription | 50°Ca | 1 | |
| 2 | Initial denaturering | 95°C | 5 min | 1 |
| 3 | Amplifieringsreaktion | 95°C |
| 45 cykler |
| 60°Cb | 30 sekc |
(2) Snabbförstärkningsprogram
|
| Reaktionsstadium | Temperatur | Tid | Cykel |
| 1 | Omvänd transkription | 50°Ca | 2 min | 1 |
| 2 | Initial denaturering | 95°C | 2 sek | 1 |
| 3 | Amplifieringsreaktion | 95°C |
| 45 cykler |
| 60°Cb | 13 sekc |
Notera:
a) Omvänd transkription: Temperaturen kan välja 42°C eller 50°C i 10-15 minuter.
b) Amplifieringsreaktion: Temperaturen justeras enligt Tm-värdet för de designade primrarna.
c) Fluorescenssignalförvärv: Ställ in experimentproceduren enligt kraven i instrumenthandboken.
3. Ansökan utrustning
Utrustning med Rox:ABI 5700, 7000, 7300, 7700, 7900HT Fast, StepOne™, StepOne Plus™
Utrustning med Low Rox:ABI 7500, 7500 Fast, ViiA™7, QuantStudio™ 3 och 5, QuantStudio™ 6,7,12k Flex
Stratagene MX3000P™, MX3005P™, MX4000P™
Utrustning utan Rox:
Bio-Rad CFX96™, CFX384™, iCycler iQ™, iQ™5, MyiQ™, MiniOpticon™, Opticon®, Opticon® 2, Chromo4™
Eppendorf Mastercycler® ep realplex, realplex 2 s; Qiagen Corbett Rotor-Gene® Q, Rotor-Gene® 3000, Rotor-Gene® 6000
Roche tillämpad vetenskap LightCycler® 480, LightCycler® 2.0, Lightcycler® 96
Termo Vetenskaplig PikoReal Cycler; Cepheid SmartCycler®; Illumina Eco qPCR
Anteckningar
Vänligen använd nödvändig personlig skyddsutrustning, såsom labbrock och handskar, för att säkerställa din hälsa och säkerhet!
Använd RNase-fria förbrukningsvaror för experimentet.
Denna produkt är för forskning endast använda!
Lyofiliseringsprocedur
Detta kit kan användas direkt för lyofilisering, eller så kan du ytterligare utforska hjälpämnen för olika primers utifrån detta.Standardlyofiliseringsproceduren för detta reagens är som följer:
| Behandla | temperatur | ställ in tid | varaktighet | Vakuum mbar |
| prelyofilisering | -45℃ | 10 min | 60 min | —— |
| Inledande frystorkningssteg | -45 ℃ | 10 min | 60 min | 0,01 mbar |
| -40 ℃ | 10 min | 900 min | 0,01 mbar | |
| -35 ℃ | 10 min | 60 min | 0,01 mbar | |
| -30 ℃ | 20 min | 60 min | 0,01 mbar | |
| -20 ℃ | 20 min | 60 min | 0,01 mbar | |
| 0 ℃ | 20 min | 60 min | 0.01 mbar | |
| tryckuppbyggt test | ||||
| Analytisk torkningssteg | 5 ℃ | 10 min | 20 min | 0,01 mbar |
| 10 ℃ | 10 min | 20 min | 0,01 mbar | |
| 15 ℃ | 10 min | 20 min | 0,01 mbar | |
| 20 ℃ | 10 min | 20 min | 0,01 mbar | |
| 25 ℃ | 10 min | 240 min | 0,01 mbar | |
| tryckuppbyggt test | ||||
Betalning och säkerhet
Din betalningsinformation behandlas säkert. Vi lagrar inte kreditkortsuppgifter och har inte heller tillgång till din kreditkortsinformation.
Förfrågan
Du kanske också gillar
Vanliga frågor
Produkten är endast avsedd för forskningsändamål och är inte avsedd för terapeutisk eller diagnostisk användning hos människor eller djur. Produkter och innehåll skyddas av patent, varumärken och upphovsrätt som ägs av Yeasen Biotechnology. Varumärkessymboler anger ursprungsland, inte nödvändigtvis registrering i alla regioner.
Vissa applikationer kan kräva ytterligare immateriella rättigheter från tredje part.
Yeasen är dedikerad till etisk vetenskap, och anser att vår forskning bör behandla kritiska frågor samtidigt som den säkerställer säkerhet och etiska standarder.