Beskrivning
Hifair™ Superior Universal Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit (UDG Plus) är ett multiplex kvantitativt PCR-kit baserat på RNA som mall. Under experimentets gång utfördes omvänd transkription och kvantitativ PCR i samma rör, vilket förenklade den experimentella operationen och minskade risken för kontaminering.
I detta kit syntetiserades den första strängens cDNA effektivt av värmeresistent Hifair™ Omvänt transkriptas och kvantitativt amplifierad av UNICON™ HotStart Taq DNA-polymeras. Satsen innehåller huvudsakligen optimerad MP-buffert, enzymblandning. Buffertlösningen innehåller redan Mg2+ och dNTP Mix. Dessutom tillsätts de faktorer som effektivt kan hämma den icke-specifika PCR-amplifieringen och förbättra amplifieringseffektiviteten för flera qPCR-reaktioner, vilket kan säkerställa amplifieringseffektiviteten och utföra upp till multipla amplifieringsreaktioner. dUTP/UDG-systemet lades till för att effektivt förhindra risken för aerosolkontamination.
Särdrag
Drag
1. Gbra mångsidighet: Den är lämplig för qPCR-amplifiering och detektion av nukleinsyror från patogena mikroorganismer, mänskliga genom, växter och andra arter.
2. Hög känslighet: Det noggrant optimerade buffertsystemet förbättrar detektionskänsligheten för mallar med låg koncentration upp till 250 kopior/ml.
3. dUP/UDG-system: dUTP/Värmelabilt UDG anti-föroreningssystem introduceras för att effektivt bryta ned aerosolföroreningar av produkter, minska falska positiva och säkerställa autentiska resultat.
4. Stöding snabbt program: kompatibel med 40 min snabbprogram.
5. Super stabilitet: stabile vid 37 ℃ i 14 dagar, upprepad frysning och upptining 10 gånger.
Specifikationer
| Komponentnr. | 16901ES60 / 16901ES80 / 16901ES92 |
| Storlek | 100 T / 1000 T / 10 000 T |
Komponenter
| Namn | 16901ES60 (100T) | 16901ES80 (1 000 T) | 16901ES92 (10 000 T) | |
| 16901-A | 500 μL | 5 ml | 50 ml | |
| 16901-B | Hifair™ Enzymmix | 100 μL | 1 ml | 10 ml |
Notera: 1) 5×Hifair™ MP Buffer är en förkortning av Hifair™ Superior Multiplex One Step RT-qPCR-probbuffert, som inkluderar dNTP, dUTP, Mg2+, stabilisatorer och mer.
2) Hifair™ Enzymmix huvudsakligen innehåller Hifair™ omvänt transkriptas, UNICON™ HotStart Taq DNA-polymerer, RNAseinhibitor, och UDGase och så vidare.
Lagring
Produkten ska förvaras vid -25 ℃ ~ -15 ℃ i 1 år. Det bör undvika upprepad frysning och upptining.
Instruktioner
| Volym (μL) | Slutlig koncentration | |
| 5×Hifair™ MP-buffert | 5 | 1× |
| Hifair™ Enzymmix | 1 | - |
| Primer Mix (10 μM) | 0,4 styck | 0,16 μM |
| Sondmix (10 μM) | 0,2 styck | 0.08 μM |
| 1-5 | - | |
| RNase-fri H2O | till 25 | - |
1. Reaktionssammansättning:
Notera:Var noga med att blanda väl före användning, undvik överdrivna bubblor orsakade av våldsamma vibrationer.
a) Primerkoncentration: Primer mix inklusive multiplex primer, beroende på situationen kan den optimala primerkoncentrationen vara mellan 0,1 och 1,0 μM.
b) Sondkoncentration: Sondblandning inklusive multiplex sondmärkningsdifferens fluorescerande grupp, beroende på situationen kan den optimala sondkoncentrationen vara mellan 0,05 och 0.5 μM.
c) Mallutspädning: qPCR är mycket känslig och det rekommenderas att späda mallen. Kontroll Ct-värdet är lämpligt mellan 20 och 35.
d) Systemförberedelse: ett huvud med filterelement. Undvik korskontaminering och aerosolkontamination.
2. Optimerat cykelprotokoll
(1) Standardförstärkningsprocedur
| Reaktionsstadium | Temperatur | Tid | Cykel | |
| 1 | Omvänd transkription | 50°Ca | 1 | |
| 2 | Initial denaturering | 95°C | 5 min | 1 |
| 3 | Amplifieringsreaktion | 95°C | 15 sek | 45 cykler |
| 60°Cb | 30 sekc |
Notera:
a) Omvänd transkription: Temperaturen kan väljas 50°C eller 55°C i 10-15 minuter.
b) Amplifieringsreaktion: Temperaturen justeras enligt Tm-värdet för de designade primrarna.
c) Fluorescenssignalförvärv: Ställ in den experimentella proceduren enligt kraven i instrument manuell.
(2) Snabbförstärkningsprogram
|
| Reaktionsstadium | Temperatur | Tid | Cykel |
| 1 | Omvänd transkription | 50°C | 5 min | 1 |
| 2 | Initial denaturering | 95°C | 30 sek | 1 |
| 3 | Amplifieringsreaktion | 95°C | 5 sek | 45 cykler |
| 60°C | 20 sek |
Notera:Om den faktiska qPCR-detektorn stöder snabb amplifiering, utför ett förtest för att bekräfta.
3. Appliceringsutrustning
ABI 5700, 7000, 7300, 7700, 7900HT Fast, StepOne™, StepOne Plus™，ABI 7500, 7500 Fast, ViiA™7, QuantStudio™ 3 och 5, QuantStudio™ 6,7,12k Flex；
Stratagene MX3000P™, MX3005P™, MX4000P™；
Bio-Rad CFX96™, CFX384™, iCycler iQ™, iQ™5, MyiQ™, MiniOpticon™, Opticon®, Opticon® 2, Chromo4™；
Eppendorf Mastercycler® ep realplex, realplex 2 s;
Qiagen Corbett Rotor-Gene® Q, Rotor-Gene® 3000, Rotor-Gene® 6000；
Roche Applied Science LightCycler® 480, LightCycler® 2.0; Lightcycler® 96；
Termo Vetenskaplig PikoReal Cycler; Cepheid SmartCycler®; Illumina Eco qPCR; SLAN 96S, 96P.
Anteckningar
Vänligen använd nödvändig personlig skyddsutrustning, såsom labbrock och handskar, för att säkerställa din hälsa och säkerhet!
Använd RNase-fria förbrukningsvaror för experimentet.
Denna produkt är för forskning endast använda!
Betalning och säkerhet
Din betalningsinformation behandlas säkert. Vi lagrar inte kreditkortsuppgifter och har inte heller tillgång till din kreditkortsinformation.
Förfrågan
Du kanske också gillar
Vanliga frågor
Produkten är endast avsedd för forskningsändamål och är inte avsedd för terapeutisk eller diagnostisk användning hos människor eller djur. Produkter och innehåll skyddas av patent, varumärken och upphovsrätt som ägs av Yeasen Biotechnology. Varumärkessymboler anger ursprungsland, inte nödvändigtvis registrering i alla regioner.
Vissa applikationer kan kräva ytterligare immateriella rättigheter från tredje part.
Yeasen är dedikerad till etisk vetenskap, och anser att vår forskning bör behandla kritiska frågor samtidigt som den säkerställer säkerhet och etiska standarder.