MolPure^TM Magnetisk Universal Viral DNA / RNA Kit är lämplig för att extrahera viral nukleinsyra från helblod eller cellfria kroppsvätskeprover (såsom serum, plasma, cerebrospinalvätska, näs-/svalgpinne, alveolär sköljvätska, etc.). Denna metod använder magnetisk pärlreningsteknik, utan giftig fenolkloroformextraktion, säker, giftfri och snabb. De resulterande produkterna kan användas direkt för PCR, qPCR, andra generationens sekvensering och andra experiment. Med det automatiska extraktionsinstrumentet för den magnetiska pärlmetoden kan extraktion med hög genomströmning av nukleinsyra realiseras.

Produkt Iinformation

Komponenter

Bottled Version

Färdigförpackad Version

Lagring

Del I: Förvara i rumstemperatur, transportera i rumstemperatur, med en hållbarhet på 1 år.

Del II: För komponent 18521-G (Proteas K), förvara vid 2~8℃, transportera i rumstemperatur.

Anteckningar

1．De olika buffertarna i detta kit innehåller guanidiniumsalter. För din säkerhet och hälsa, vänligen bär en labbrock

och engångshandskar under drift. Hantera enligt standard säkerhetsföreskrifter för att undvika kontakt med hud, ögon och slemhinnor. Vid kontakt, skölj omedelbart noggrant med vatten och uppsök läkare.

2．Om fällning sker i lösningen måste den värmas i ett 30°C vattenbad tills fällningen är

helt upplöst före användning.

3．Om den magnetiska pärlsuspensionen är frusen, använd den inte.

4．De olika buffertarna i detta kit innehåller guanidiniumsalter. Behandla inte med oxiderande desinfektionsmedel som t.ex

som natriumhypoklorit, eftersom detta kan frigöra giftiga gaser. De ska hanteras som medicinskt avfall.

5．Under elueringen kan det finnas kvarvarande magnetiska pärlor. När du aspirerar prover, försök att undvika att andas in

magnetiska pärlor.

Instruktioner

1. Tillämpliga provtyper: helblod, serum, plasma, cerebrospinalvätska, nasala/faryngeala pinnprover,

bronkoalveolär sköljvätska och andra prover.

2. Förvaring och transport av prover: Prover kan användas omedelbart för testning eller förvaras vid -70°C eller

lägre för framtida testning med en hållbarhet på 6 månader. Undvik upprepad frysning och upptining. Prover ska transporteras med hjälp av kylkedjelogistik.

3. Krav på frysning och upptining: Snabbfrysning och snabb upptining för att undvika upprepade cykler.

Driftssteg

Lösningen kontrollerades med avseende på utfällning och om de magnetiska pärlorna kunde återsuspenderas före experimenten.

Manuell Extraktion

1. Överför 200-300 μL av provet till ett 1,5 mL centrifugrör, tillsätt 600 μL lysbindande vätska,

20 μL proteas K och 20 μL magnetisk pärlsuspension, vortexmixa sedan i 30 sekunder vid hög hastighet. Inkubera vid 50°C under skakning i 5-7 minuter; om inkubatorn inte har en skakfunktion, vortexa tre gånger under inkubationen, vardera i 15 sekunder.

2. Överför till ett 1,5 ml magnetiskt stativ för magnetisk separation tills lösningen är klar och genomskinlig, aspirera sedan och kassera lösningen.

3. Tillsätt 700 μL tvättlösning A, vortexa i 10 sekunder för att sprida de magnetiska pärlorna, överför sedan till det magnetiska stativet för magnetisk separation tills lösningen är klar, och aspirera och kassera lösningen.

4. Tillsätt 700 μL tvättlösning B, vortexa i 10 sekunder för att sprida de magnetiska pärlorna, överför sedan till det magnetiska stativet för magnetisk separation tills lösningen är klar, och aspirera och kassera lösningen.

5. Upprepa steg 4 med ytterligare 700 μL tvättlösning B.

6. Centrifugera kort för att samla droppar på rörväggen, överför till det magnetiska stativet tills det är klart, aspirera och kassera kvarvarande vätska. Lufttorka i 3-5 minuter.

Obs: Etanolrester kan hämma efterföljande enzymatiska reaktioner, så se till att etanol avdunstar helt under torkning. Torka inte för länge för att undvika att den efterföljande elueringen påverkas.

7. Tillsätt 50-100 μL elueringsvätska, vortexa vid hög hastighet i 2-3 minuter för att sprida de magnetiska pärlorna. Inkubera vid 60°C i 5 minuter och vortexa sedan vid hög hastighet i 60 sekunder.

8. Centrifugera kort för att samla upp droppar på rörlocket i röret, överför till magnetstativet tills de magnetiska pärlorna är helt adsorberade, överför sedan försiktigt vätskan till ett nytt centrifugrör för att erhålla nukleinsyralösningen.

9. Nukleinsyralösningen kan lagras vid -20°C under kort tid eller -80°C under lång tid.

Automatiserad Extraktion

Yeasen AP-96N automatiskt nukleinsyraextraktion och reningsinstrument (för fler typer av instrument, kontakta teknisk support)

1. Innan experimentet, förpacka djuphålsplatta med kraftoscillation flera gånger för att undvika vätskerester på tätningsmembranet. Lösningen kontrollerades med avseende på utfällning och om de magnetiska pärlorna kunde återsuspenderas.

2. Placera varje 96-brunnars platta i nukleinsyraextraktionsinstrumentet i ordning och placera den magnetiska stavhylsan med 96 djupa hål.

Position 1: klyv bindningsplattan

Position 2: sköljbräda

Position 3: tvätt + magnetisk pärlplatta

Position 4: tvättplatta

Position 6: eluera plattan

3. Tillsätt 200-300 µL av provet och 20 µL proteas K till brunnarna på lysbindningsplattan.

4. Kör följande procedur. Efter proceduren överför du eluatet från elueringsplattan till ett nytt centrifugrör. Lösningen kan placeras i -20 ℃ för korttidsförvaring och -80 ℃ för långtidsförvaring.

AP-96N Channel Nucleic Acid Extraction Instrument Program