Naturligt protein A är ett cellväggsytprotein som finns i Staphylococcus aureus, det liknar protein G isolerat från släkte G eller C Streptokocker, binder mest däggdjurs IgG av interagerar primärt med de Fc område immunglobulin (Ig), men skiljer sig i sin bindningsspecificitet. Den kan användas för separation och rening av en mängd olika antikroppar (monoklonal antikropp och polyklonal antikropp). Protein A och Protein G skiljer sig i sina bindningsegenskaper till olika immunglobulinunderklasser (se bilaga 1 för detaljer).
Denna produkt använder genetiskt modifierat protein A, som inte bara bibehåller sina Ig-affinitetsegenskaper, utan också tar bort den icke-stora bindningsdomänen av det naturliga proteinet i sig för att minska ospecifik bindning. SuRi rProtein A Agarose Resin, som är starkt tvärbunden agarosgel som matris och modifierat alkaliresistent rekombinant protein A som ligand, har hög fysikalisk-kemisk stabilitet. Antikroppar med hög renhet kan erhållas från prover av ascites, serum och odlingsmedium genom enstegs affinitetskromatografi med denna produkt, som är bekväm att använda och allmänt använd.

Komponenter

Specifikationer

Frakt och Lagring

Produkterna levereras med ispåse.   Den kan lagras stabilt vid 2 ~ 8 ℃ i 5 år.

Instruktioner

1. Buffertberedning

Det rekommenderas att följande buffertar filtreras med ett 0,22 μm eller 0,45 μm filtermembran före användning. Balansera/binda/tvättbuffert: 0,15 M NaCl, 20 mM Na2 HPO4, pH 7,0

Elueringsbuffert: 0,1 M glycin, pH 3,0

Neutraliserande buffert: 1 MTris-HCl, pH 8.5

2. Provberedning

Säkerställa att de prov lösning har de lämplig jonisk styrka och pH före belastning de kolumn, antingen av späda ut serumprovet, ascites eller cellodlingslösningen med en bind-/tvättbuffert, eller genom dialys av provet med en binda/tvätt buffert.

3. Kolumnpackning

Ladda SuRi rProtein A Agarose Resin i en lämplig kromatografikolonn, var noga med att undvika bubblor.

4. Provrening

1) Balans: Den kromatografiska kolonnen är balanserad med en bindande Buffert av 5 gånger de kolumn volym, så att packningen är i samma buffertsystem som målproteinet och spelar rollen att skydda proteinet.

2) Prov belastning: De prov var lastad till de välbalanserad rProtein A Agaros Harts till säkerställa full kontakta mellan målproteinet och hartset, förbättra återhämtningen mängden av målproteinet och samla upp utflödet till testas.

3) Tvätt: Tvätta med 10-15 gånger kolumn volym av tvättning Buffert, ta bort de förorening protein om inte specifikt adsorberat, samla upp tvättlösningen.

4) Eluering: Eluering med 5-10 gånger kolumn volym av eluering Buffert, samla eluent, att är, de mål protein komponent.

5) CIP rengöring och bevarande: I allmänhet använda 0,1-0,5 M NaOH större än 3CV, och de kontakta tid är 15 min; Sedan skölj med 5CV balanseringslösning tills den är neutral. Äntligen är det så balanserad med 20% etanol av 5 gånger kolumnen volym, och sedan lagras  i 20 %  etanol  av de  samma  volym  på  4°C  till  förhindra  de  förpackning  från  varelse förorenad av bakterier.

5. SDS-PAGE-detektering

De prover erhållits i de rening behandla (inklusive original prover, utsläpp komponenter, tvättning och elueringskomponenter, etc.) detekterades med SDS-PAGE för att bestämma reningseffekten.

Anteckningar

1. Förvara inte produkten i kylskåp.
2. rProteinAAgarose Resin måste vändas helt flera gånger före användning, så att agaroshartset blandas jämnt.
3. Under alla operationer måste provet köras vid 4°C eller på is.
4. För din säkerhet och hälsa, vänligen bär laboratorierockar och engångshandskar för användning.
5. Endast för forskningsanvändning.

Bifogad tabell 1: Sammanfattning av bindningsförmåga of proteinerna A och G till Ig i olika art

SuRi rProtein En agaros Harts