Hieff Trans™ Liposomal transfektionsreagens FAQ

(1) F: Kan serum vara närvarande vid beredning av nukleinsyratransfektionsreagenskomplex?

S: Närvaron av serum kommer att påverka bildandet av liposomer. Det rekommenderas att använda serumfritt medium (vanligtvis MEM-medium) vid beredning av nukleinsyratransfektionsreagenskomplex.

(2) F: Kan transfektionsreagenset frysas?

S: Nej. Detta reagens måste förvaras vid 2-8 ℃, och försiktighet bör iakttas för att undvika att öppna locket upprepade gånger under lång tid, eftersom långvarig öppning av locket kommer att orsaka liposomoxidation och påverka transfektionseffektiviteten.

(3) F: Vad ska jag vara uppmärksam på när jag använder Hieff Trans™ liposomnukleinsyratransfektionsreagens?

S: 1) Under transfektionsoperationen är det bättre att cellkonfluensen når 80%-95%, och den specifika pläteringsdensiteten bestäms i enlighet med cellernas situation;

2) Att använda högrent DNA hjälper till att erhålla högre transfektionseffektivitet;

3) DNA och transfektionsreagens måste spädas med serumfritt medium vid framställning av transfektionskomplex;

4) Antibiotika kan inte tillsättas till mediet under transfektion;

5) DNA-koncentrationen och mängden katjonisk liposomreagens bör optimeras för den första användningen för att uppnå maximal transfektionseffektivitet. Förhållandet mellan DNA och transfektionsreagens är rekommenderas generellt att vara 1:2-1:3.

(4) F: Behöver den avslutas efter transfektion?

A: Inget behov. Liposomkomplex är stabila i 6 timmar. Om cellmediet inte byts före transfektion, för att säkerställa de näringsämnen som krävs för normal celltillväxt, är det nödvändigt att byta till ett nytt medium efter 4 till 6 timmar. Men om mediet har bytts före transfektion är det inte nödvändigt att byta medium efter liposomtransfektion.

(5) F: Vad ska jag vara uppmärksam på om jag vill förbättra transfektionseffektiviteten?

A: a: Tätheten av celler vid tidpunkten för transfektion är 90%-95%.

b: Under transfektion, använd MEM-serumfritt medium för nukleinsyra- och liposomspädningar.

c: Mediet kan bytas 4-6 timmar efter transfektion.

(6) F: Kan samtransfektion av DNA och siRNA utföras? Hur är effekten?

S: Samtransfektion kan utföras, men det rekommenderas att utföra separat transfektion, och DNA-transfektion bör utföras 6 timmar efter siRNA. Om de opereras tillsammans kommer siRNA-transfektionseffektiviteten att bli sämre.

(7) F: Kan transfektionsreagenset användas för lentiviral förpackningstransfektion?

S: Lentiviral förpackning är möjlig, men effektiviteten av lentiviral förpackning är inte nödvändigtvis relaterad till effektiviteten av transfektion, utan också relaterad till valet av förpackningsplasmider och förhållandet mellan plasmider.

(8) F: Kan Hieff Trans™ liposomnukleinsyratransfektionsreagens användas för transfektion av suspensionsceller?

S: Hieff Trans™ liposomnukleinsyratransfektionsreagens kan användas för suspensionscelltransfektion, se protokoll för detaljer. Dessutom har vi även lanserat ett transfektionsreagens specifikt för suspensionsceller (kat. nr. 40805, liposomnukleinsyratransfektionsreagens för suspensionsceller).

[1] Liu R, Yang J, Yao J, Zhao Z, He W, Su N, Zhang Z, Zhang C, Zhang Z, Cai H, Zhu L, Zhao Y, Quan S, Chen X, Yang Y. Optogenetisk kontroll av RNA-funktion och metabolism med hjälp av konstruerade ljusomkopplingsbara RNA-bindande proteiner. Nat Biotechnol. 2022 Jan 3. doi: 10.1038/s41587-021-01112-1. Epub före tryck. PMID: 34980910. (IF:54.908)

[2] Zhou J, Chen P, Wang H, Liu H, Li Y, Zhang Y, Wu Y, Paek C, Sun Z, Lei J, Yin L. Cas12a-varianter designade för lägre genomomfattande effekt utanför målet genom strikt PAM-igenkänning. Mol Ther. 5 januari 2022;30(1):244-255. doi: 10.1016/j.ymthe.2021.10.010. Epub 2021 20 oktober. PMID: 34687846; PMCID: PMC8753454. (IF:11.454)

[3] Chen S, Cao X, Zhang J, Wu W, Zhang B, Zhao F.circVAMP3 driver CAPRIN1 fasseparation och hämmar hepatocellulärt karcinom genom att undertrycka c-Myc Translation. Adv Sci (Weinh). 2022 Mar;9(8):e2103817. doi: 10.1002/advs.202103817. Epub 2022 24 jan. PMID: 35072355; PMCID: PMC8922094. (IF:16.808)

[4] Zhang Y, Yu X, Sun R, Min J, Tang X, Lin Z, Xie S, Li X, Lu S, Tian Z, Gu C, Teng L, Yang Y. Splitsningsfaktor arginin/serinrik 8 främjar multipelt myelom malignitet och benskada genom alternativ splitsning av CACYBP och exosombaserad cellulär kommunikation. Clin Transl Med. 2022 feb;12(2):e684. doi: 10.1002/ctm2.684. PMID: 35184390. (IF:11.492)

[5] Tang X, Deng Z, Ding P, Qiang W, Lu Y, Gao S, Hu Y, Yang Y, Du J, Gu C. Ett nytt protein som kodas av circHNRNPU främjar multipelt myelomprogression genom att reglera benmärgens mikromiljö och alternativ splitsning. J Exp Clin Cancer Res. 2022 mars 8;41(1):85. doi: 10.1186/s13046-022-02276-7. PMID: 35260179. (IF:11.161)

[6] Hua Z, Wei R, Guo M, Lin Z, Yu X, Li X, Gu C, Yang Y. YTHDF2 främjar cellproliferation av multipelt myelom via STAT5A/MAP2K2/p-ERK-axeln. Onkogen. 2022 Mar;41(10):1482-1491. doi: 10.1038/s41388-022-02191-3. Epub 2022 24 januari. PMID: 35075244. (IF:9.867)

[7] Liang Y, Lu Q, Li W, Zhang D, Zhang F, Zou Q, Chen L, Tong Y, Liu M, Wang S, Li W, Ren X, Xu P, Yang Z, Dong S, Zhang B, Huang Y, Li D, Wang H, Yu W. Reaktivering av tumörsuppressor vid bröstcancer genom förstärkarväxling genom NamiRNA-nätverk. Nucleic Acids Res. 2021 sep 7;49(15):8556-8572. doi: 10.1093/nar/gkab626. PMID: 34329471; PMCID: PMC8421228. (IF:16,9)

[8] Dai L, Dai Y, Han J, Huang Y, Wang L, Huang J, Zhou Z. Strukturell insikt i BRCA1-BARD1 komplex rekrytering till skadat kromatin. Mol Cell. 2021 juli 1;81(13):2765-2777.e6. doi: 10.1016/j.molcel.2021.05.010. Epub 2021 7 juni. PMID: 34102105. (IF:17.97)

[9] Zhang K, Wang A, Zhong K, Qi S, Wei C, Shu X, Tu WY, Xu W, Xia C, Xiao Y, Chen A, Bai L, Zhang J, Luo B, Wang W, Shen C. UBQLN2-HSP70-axeln reducerar poly-Gly-Ala aggregerar i djurmodellen C9 och lindrar7 beteendedefekter ORF2. Neuron. 2021 Jun 16;109(12):1949-1962.e6. doi: 10.1016/j.neuron.2021.04.023. Epub 2021 14 maj. PMID: 33991504. (IF:17.17)

[10] Liang Y, Lu Q, Li W, Zhang D, Zhang F, Zou Q, Chen L, Tong Y, Liu M, Wang S, Li W, Ren X, Xu P, Yang Z, Dong S, Zhang B, Huang Y, Li D, Wang H, Yu W. Reaktivering av tumörsuppressor vid bröstcancer genom förstärkarnätverksbyte genom NamiRNA-nätverk. Nucleic Acids Res. 2021 sep 7;49(15):8556-8572. doi: 10.1093/nar/gkab626. PMID: 34329471; PMCID: PMC8421228. (IF:16,9)

[11] Li T, Chen X, Qian Y, Shao J, Li X, Liu S, Zhu L, Zhao Y, Ye H, Yang Y. En syntetisk BRET-baserad optogenetisk enhet för pulserande transgenuttryck som möjliggör glukoshomeostas hos möss. Nat Commun. 2021 jan 27;12(1):615. doi: 10.1038/s41467-021-20913-1. PMID: 33504786; PMCID: PMC7840992. (IF:14,92)

[12] Pan Y, He X, Li C, Li Y, Li W, Zhang H, Wang Y, Zhou G, Yang J, Li J, Qu J, Wang H, Gao Z, Shen Y, Li T, Hu H, Ma H. Neuronal aktivitet rekryterar CRTC1/CREB-axeln för att driva transkriptionsberoende autofagi LTD. Cell Rep. 2021 Jul 20;36(3):109398. doi: 10.1016/j.celrep.2021.109398. PMID: 34289350. (IF:9.42)

[13] Liu H, Xing R, Ou Z, Zhao J, Hong G, Zhao TJ, Han Y, Chen Y. G-proteinkopplad receptor GPR17 hämmar gliomutveckling genom att öka polycomb-repressivt komplex 1-medierad ROS-produktion. Celldöd Dis. 2021 juni 12;12(6):610. doi: 10.1038/s41419-021-03897-0. PMID: 34120140; PMCID: PMC8197764. (IF:8.463)

[14] Fan Y, Wang J, Jin W, Sun Y, Xu Y, Wang Y, Liang X, Su D.CircNR3C2 främjar HRD1-medierad tumörsuppressiv effekt via sponging miR-513a-3p i trippelnegativ bröstcancer. Mol Cancer. 2021 februari 2;20(1):25. doi: 10.1186/s12943-021-01321-x. PMID: 33530981; PMCID: PMC7851937. (IF:27.403)

[15] Gu C, Wang Y, Zhang L, Qiao L, Sun S, Shao M, Tang X, Ding P, Tang C, Cao Y, Zhou Y, Guo M, Wei R, Li N, Xiao Y, Duan J, Yang Y. AHSA1 är ett lovande terapeutiskt mål för cellulär multipelproliferation och proteasomhämmareresistens. J Exp Clin Cancer Res. 2022 jan 6;41(1):11. doi: 10.1186/s13046-021-02220-1. PMID: 34991674; PMCID: PMC8734095. (IF:11.161)

[16] Luo Q, Wu X, Zhao P, Nan Y, Chang W, Zhu X, Su D, Liu Z. OTUD1 Aktiverar kaspasoberoende och kaspasberoende apoptos genom att främja AIF-kärntranslokation och MCL1-nedbrytning. Adv Sci (Weinh). 8 februari 2021; 8(8):2002874. doi: 10.1002/advs.202002874. PMID: 33898171; PMCID: PMC8061361. (IF:15,84)

[17] Luo Q, Wu X, Nan Y, Chang W, Zhao P, Zhang Y, Su D, Liu Z. TRIM32/USP11 balanserar ARID1A-stabilitet och det onkogena/tumörsuppressiva tillståndet för skivepitelcancer. Cell Rep. 2020 Jan 7;30(1):98-111.e5. doi: 10.1016/j.celrep.2019.12.017. PMID: 31914402. (IF:9.42)

[18] Sun X, Peng X, Cao Y, Zhou Y, Sun Y. ADNP främjar neural differentiering genom att modulera Wnt/β-catenin-signalering. Nat Commun. 12 juni 2020;11(1):2984. doi: 10.1038/s41467-020-16799-0. PMID: 32533114; PMCID: PMC7293280. (IF:14.911)

[19] Yang X, Wang H, Xie E, Tang B, Mu Q, Song Z, Chen J, Wang F, Min J. Omkoppling av ERBB3- och ERK-signalering ger resistens mot FGFR1-hämning i mag-tarmcancer med en ERBB3-E928G-mutation. Proteincell. 2020 Dec;11(12):915-920. doi: 10.1007/s13238-020-00749-z. PMID: 32632529; PMCID: PMC7719122. (IF:14.872)

[20] Chen, T., Chen, Y., Chen, H. et al. Dubbel-enzym-driven obegränsad DNA-gående nanomaskin för intracellulär avbildning av lågt uttryckt mikroRNA. Nano Res. 12, 1055–1060 (2019). https://doi.org/10.1007/s12274-019-2344-5 (IF:8.21)

[21] Zhang X, Qi Z, Yin H, Yang G. Interaktion mellan p53 och Ras-signalering styr cisplatinresistens via HDAC4- och HIF-1α-medierad reglering av apoptos och autofagi. Teranostik. 2019 jan 30;9(4):1096-1114. doi: 10.7150/thno.29673. PMID: 30867818; PMCID: PMC6401400. (IF:8.12)

[22] Zou Y, Wang A, Shi M, Chen X, Liu R, Li T, Zhang C, Zhang Z, Zhu L, Ju Z, Loscalzo J, Yang Y, Zhao Y. Analys av redoxlandskap och dynamik i levande celler och in vivo med hjälp av genetiskt kodade fluorescerande sensorer. Nat Protoc. 2018 okt;13(10):2362-2386. doi: 10.1038/s41596-018-0042-5. PMID: 30258175; PMCID: PMC6714056. (IF:13.49)

[23] Zhang K, Zhao X, Chen X, Wei Y, Du W, Wang Y, Liu L, Zhao W, Han Z, Kong D, Zhao Q, Guo Z, Han Z, Liu N, Ma F, Li Z. Förbättrade terapeutiska effekter av mesenkymala stamcellshärledda exosomer med en injicerbar hydrokemi. ACS Appl Mater-gränssnitt. 2018 sep 12;10(36):30081-30091. doi: 10.1021/acsami.8b08449. Epub 2018 29 augusti. PMID: 30118197. (IF:8.09)

[24] Hao H, Hu S, Chen H, Bu D, Zhu L, Xu C, Chu F, Huo X, Tang Y, Sun X, Ding BS, Liu DP, Hu S, Wang M. Förlust av endotelial CXCR7 försämrar vaskulär homeostas och hjärtremodellering efter hjärtinfarkt: Upptäcker hjärtinfarkt: implikationer. Omlopp. 2017 mars 28;135(13):1253-1264. doi: 10.1161/CIRCULATIONAHA.116.023027. Epub 2017 2 februari. PMID: 28154007. (IF:18.881)