D-Luciferin är ett vanligt substrat för luciferasenzymet Luciferase och används ofta inom hela biotekniken, särskilt vid in vivo in vivo-avbildning. Verkningsmekanismen är att luciferin (substratet) kan oxideras för att avge ljus i närvaro av ATP och luciferas. När det finns ett överskott av luciferin är antalet producerade ljuskvanter positivt korrelerat med koncentrationen av luciferas (se figur nedan). Efter att ha transfekterat celler med en plasmid som bär genen som kodar för luciferas (Luc) och introducerat den i forskningsdjur som möss och råttor, injiceras luciferin i cellerna, och förändringar i ljusintensitet detekteras av BLI, vilket möjliggör realtidsövervakning av sjukdomstillståndet eller den terapeutiska effekten av till exempel ett läkemedel. Effekten av ATP på detta reaktionssystem kan också användas för att indikera energi eller vitala tecken baserat på förändringar i bioluminescensintensitet.

D-Luciferin används också ofta i in vitro-studier inklusive luciferas- och ATP-nivåanalys, reportergenanalys, sekvensering med hög genomströmning och olika kontamineringsanalyser. Det finns för närvarande tre produktformer på marknaden, D-Luciferin (fri syra), D-Luciferin natriumsalt och D-Luciferin kaliumsalt. Den största skillnaden mellan dessa tre produkter är deras löslighetsegenskaper; D-Luciferin (fri syra) är svagt lösligt i vatten och i buffertsystem, såvida det inte är lösligt i svaga baser som NaOH- och KOH-lösningar. D-Luciferin i form av natrium- och kaliumsalter löser sig mycket lätt och snabbt i vatten eller buffertar, är lätt att använda och lösningsmedlen är giftfria, vilket gör det särskilt lämpligt för in vivo-experiment. När de formuleras som vätskor finns det ingen väsentlig skillnad mellan de tre produkterna för de flesta applikationer.

Drag

• Ingen strålning, nästan ofarlig för levande organismer.
• Bioluminescens, ingen excitationsljuskälla.
• Så känslig att du kan upptäcka den i några hundra celler.
• Bra penetration, 3-4 cm vävnadsdjup kan fortfarande detekteras.
• Högt signal-brusförhållande, stark fluorescenssignal och bra anti-interferens.

Ansökningar

• I tumörbildningsexperimentet i nakna möss observerades tumörtillväxten utan invasion i realtid, utan tumöravdrivningsmätning.
• För att testa effekten av administreringen på tumörtillväxt eller metastasering kan fluoresceinsubstratet elimineras fullständigt inom 3 timmar, utan störning av läkemedelsexperimentet.
• Lokaliseringen och distributionen av främmande celler i djur detekterades.
• Målgenen eller promotorn för målgenen är sammansmält med luciferasgenen för att detektera förändringar i genuttryck under läkemedelsbehandling eller sjukdomsprogression.
• Övervakning av stamcellstransplantation, överlevnad och spridning; Spåra distributionen och migrationen av stamceller in vivo.

Specifikationer

Komponenter

Frakt och förvaring

Transporteras i isförpackningar; förvaras vid -20°C torrt och skyddat från ljus; gäller för 1 år.

Siffror

Dokument:

Säkerhetsdatablad

Manualer

Citat och referenser:

[1] Ji C, Zhao M, Wang C, et al. Biokompatibla tantalnanopartiklar som radiosensibilisatorer för att förbättra terapieffektiviteten i primärtumör och metastaserande sentinellymfkörtlar [publicerad online före tryckning, 6 juni 2022]. ACS Nano. 2022;10.1021/acsnano.2c02314. doi:10.1021/acsnano.2c02314(IF:15.881)
[2] Miao Z, Tian W, Ye Y, et al. Hsp90 inducerar Acsl4-beroende gliomferroptos via defosforylering av Ser637 vid Drp1. Celldöd Dis. 2022;13(6):548. Publicerad 2022 13 juni. doi:10.1038/s41419-022-04997-1(IF:8.469)
[3] Zhang L, Sun Y, Zhang XX, et al. Jämförelse av CD146 +/- mesenkymala stamceller för att förbättra prematur ovariesvikt. Stamcell Res Ther. 2022;13(1):267. Publicerad 2022 21 juni. doi:10.1186/s13287-022-02916-x(IF:6.832)
[4] Fu RJ, He W, Wang XB, et al. DNMT1-upprätthållen hypermetylering av Krüppel-liknande faktor 5 involverar progression av klarcellig njurcellscancer.Celldöd Dis. 2017;8(7):e2952. Publicerad 2017 27 juli. doi:10.1038/cddis.2017.323(IF:5.965)
[5] Xu P, Wu L, Cao M, et al. Identifiering av MBW-komplexa komponenter som är inblandade i biosyntesen av flavonoider i skogsjordgubbar. Front Plant Sci. 2021;12:774943. Publicerad 2021 8 november doi:10.3389/fpls.2021.774943(IF:5.754)
[6] Bai S, Tao R, Yin L, et al. Två B-box-proteiner, PpBBX18 och PpBBX21, reglerar antagonistiskt antocyaninbiosyntes via kompetitiv association med Pyrus pyrifolia ELONGATED HYPOCOTYL 5 i skalet av päronfrukt. Plant J. 2019;100(6):1208-1223. doi:10.1111/tpj.14510(IF:5.726)
[7] Yang SX, Wu TT, Ding CH, Zhou PC, Chen ZZ, Gou JY. SAHH och SAMS bildar ett metyldonatorkomplex med CCoAOMT7 för metylering av fenoliska föreningar. Biochem Biophys Res Commun. 2019;520(1):122-127. doi:10.1016/j.bbrc.2019.09.101(IF:2.705)