การแนะนำผลิตภัณฑ์

คอลลาจิเนสเป็นกลุ่มของเอนโดนิวคลีเอสที่สามารถจดจำลำดับ Pro-X-Gly-Pro ได้โดยเฉพาะ (ซึ่งเกิดขึ้นบ่อยในคอลลาเจนและพบน้อยมากในโปรตีนอื่นๆ) และตัดพันธะเปปไทด์ระหว่างกรดอะมิโนที่เป็นกลาง (X) และไกลซีน (Gly) ในลำดับนี้ และสามารถไฮโดรไลซ์คอลลาเจนในเนื้อเยื่อเกี่ยวพันได้

โปรตีเอสหลายชนิดสามารถไฮโดรไลซ์คอลลาเจนเปปไทด์ที่เป็นสายเดี่ยวและที่เปลี่ยนสภาพได้ แต่คอลลาจิเนสเป็นโปรตีเอสชนิดเดียวเท่านั้นที่สามารถย่อยสลายเส้นใยคอลลาเจนตามธรรมชาติด้วยโครงสร้างสามสายซุปเปอร์คอยล์ และพบได้อย่างกว้างขวางในเนื้อเยื่อเกี่ยวพัน โดยชนิดที่มีฤทธิ์แรงที่สุดคือคอลลาจิเนส "ดิบ" ที่หลั่งออกมาจากแบคทีเรียที่ไม่ใช้ออกซิเจนอย่าง Clostridium histolyticum

Yeasen คอลลาจิเนสได้มาจาก Clostridium histolyticum ซึ่งเป็นเอนไซม์สกัดชนิด "หยาบ" ที่ไม่เพียงแต่มีคอลลาจิเนสที่สามารถย่อยสลายคอลลาเจนและเส้นใยเรติคูลัมตามธรรมชาติเท่านั้น แต่ยังมีโปรตีเอสชนิดอื่นๆ เช่น โพลิแซ็กคาไรเดส ไลเปส และอื่นๆ ซึ่งสามารถไฮโดรไลซ์โปรตีน โพลิแซ็กคาไรด์ และลิปิดอื่นๆ ในเมทริกซ์นอกเซลล์ของเนื้อเยื่อเกี่ยวพันและเนื้อเยื่อบุผิวได้อย่างมีประสิทธิภาพ จึงเหมาะสำหรับการย่อยเนื้อเยื่อมากกว่า

ในปัจจุบัน คอลลาจิเนสจากแบคทีเรียในท้องตลาดแบ่งออกเป็น 5 ประเภทหลักๆ ตามความแตกต่างของการทำงานของคอลลาจิเนส ได้แก่ คอลลาจิเนสชนิด I, ชนิด II, ชนิด III, ชนิด IV และชนิด V

การเลือกใช้คอลลาจิเนส

ชื่อสินค้า	รูปร่าง	กิจกรรมเอนไซม์	ขอบเขตการใช้งาน
ประเภทที่ 1 คอลลาจิเนส)	ผงผลึกสีน้ำตาลหรือสีแทน	≥250 U/มก. ของแข็ง	ประกอบด้วย (คอลลาเจนเนส เคซิเนส โคลสตริเดียม และทริปซิน) มีฤทธิ์ในการแยกเซลล์เยื่อบุผิว ปอด ไขมัน และเนื้อเยื่อต่อมหมวกไต
ประเภทที่ 2 คอลลาจิเนส	ผงผลึกสีน้ำตาลหรือสีแทน	≥125 U/มก. ของแข็ง	มีกิจกรรมคลอสตริเดสมากขึ้นและเหมาะสำหรับการแยกเซลล์เนื้อเยื่อตับ กระดูก ต่อมไทรอยด์ หัวใจ และต่อมน้ำลาย
ประเภทที่ 3 คอลลาจิเนส	ผงผลึกสีน้ำตาลหรือสีแทน	≥100 U/มก. ของแข็ง	มีกิจกรรมการย่อยสลายโปรตีนต่ำ ซึ่งมีประสิทธิภาพต่อส่วนที่เชื่อมต่อของเนื้อเยื่อย่อยอาหาร และมักใช้ในการแยกตัวของเซลล์เนื้อเยื่อของสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนม
ประเภทที่ 4 คอลลาจิเนส)	ผงผลึกสีน้ำตาลหรือสีแทน	≥125 CDU/มก. ของแข็ง*	มีกิจกรรมทริปซินต่ำและมักใช้ในการเตรียมเซลล์เพื่อความสมบูรณ์ของเกาะและตัวรับ
ประเภทที่ 5 คอลลาจิเนส	ผงผลึกสีน้ำตาลหรือสีแทน	≥125 CDU/มก. ของแข็ง*	ประกอบด้วยส่วนประกอบของโปรตีเอสอย่างน้อย 7 ชนิด ซึ่งสามารถใช้ในการแยกเนื้อเยื่อเกาะของตับอ่อนและการแยกเนื้อเยื่อเกี่ยวพันออกเป็นเซลล์เดี่ยว

*CDU = หน่วยย่อยคอลลาเจน

คุณสมบัติผลิตภัณฑ์

1. ประสิทธิภาพในการย่อยสูง: สารสกัดเอนไซม์ดิบจากเชื้อ Clostridium histolyticum มีประสิทธิภาพในการย่อยเนื้อเยื่อสูง
2. ขึ้นอยู่กับตัวกระตุ้น: คอลลาจิเนสต้องอาศัยการทำงานของเอนไซม์ที่กระตุ้น เช่น ไอออนบวกที่มีประจุบวก 2 เช่น Ca²⁺และสังกะสี²⁺-
3. ได้รับผลกระทบจากสารยับยั้ง: สารยับยั้งคอลลาจิเนส ได้แก่ EDTA, EGTA เป็นต้น ส่วนที่สองคือไอออนของโลหะหนัก (Hg²⁺, ตะกั่ว²⁺, ซีดี²⁺); ยังมีสารเคมีบางชนิด เช่น ซิสเทอีน ฮีสทิดีน DTT 2-เมอร์แคปโตเอธานอล โอฟีแนนโทรลีน เป็นต้น ซึ่งมีฤทธิ์ยับยั้งคอลลาจิเนสด้วยเช่นกัน
4. ความต้านทานการรบกวนที่แข็งแกร่ง: คอลลาเจนจะไม่ได้รับผลกระทบจากเซรั่มที่ใช้ในการเพาะเลี้ยงเซลล์

ข้อควรระวังในการใช้

1. การใช้งาน: ละลายใน Hank's, Earle's หรือสารละลายเกลือสมดุลอื่นๆ โดยความเข้มข้นในการทำงานที่แนะนำคือ 0.05% ~0.5% (w/v)
2. อุณหภูมิในการเก็บรักษา : 2-8°C
3. ข้อแนะนำการใช้งาน :

(1) สำหรับการศึกษาโครงสร้างคอลลาเจนและการสังเคราะห์ทางชีวภาพ มักใช้การเตรียมคอลลาจิเนสที่มีความบริสุทธิ์สูง และไม่มีการใช้กิจกรรมการย่อยสลายโปรตีนอื่น ๆ

(2) สำหรับการแยกตัวของเนื้อเยื่อ มักใช้การเตรียมคอลลาจิเนสแบบดิบ เช่น อีลาสเตส ทริปซิน หรือปาเปน

คำถามที่พบบ่อย

1. การย่อยอาหารไม่ดีในระหว่างการทดลอง

(1) หากเกิดจากการทำงานของเอนไซม์ที่อ่อนแอหรือไอออนแคลเซียมไม่เพียงพอ ควรเก็บคอลลาจิเนสไว้ในอุณหภูมิต่ำและสภาวะแห้ง และควรแช่แข็งสารละลายคอลลาจิเนสหลังจากแบ่งส่วน

(2) หากเกิดจากไอออนแคลเซียมไม่เพียงพอ ความเข้มข้นของไอออนแคลเซียมในสารละลายคอลลาจิเนสควรเป็น 5mM

2. การตายของเซลล์เกิดขึ้นระหว่างการใช้งาน

(1) หากมีโปรตีเอสมากเกินไป ควรลดเวลาการสัมผัสของโปรตีเอส หรือควรเติมอัลบูมินหรือซีรั่มที่ไม่ทำงาน

(2) หากค่า pH เปลี่ยนแปลง ควรใช้บัฟเฟอร์ (เช่น HBSS) ตรวจสอบและปรับค่า pH ใหม่บ่อยๆ

(3) หากมีออกซิเจนน้อยเกินไป ควรระบายอากาศในสารละลายย่อยอาหารด้วยอากาศปลอดเชื้อ

3. เซลล์ได้รับความเสียหายในระหว่างการทดลอง

หากเกิดจากโปรตีเอสมากเกินไป ควรลดปริมาณโปรตีเอสลง หรือเติมอัลบูมินหรือซีรั่มที่ไม่ทำงาน

การสั่งซื้อ

หมายเลขแคตตาล็อก	ชื่อสินค้า	ขนาด
40507ES60	คอลลาจิเนส 1	100 มก.,1ก.
40508ES60	คอลลาจิเนส II	100 มก.,1ก.
40509ES60	คอลลาจิเนส III	100 มิลลิกรัม
40510ES60	คอลลาจิเนส IV	100 มก.,1ก.
40511ES60	คอลลาจิเนส วี	100 มิลลิกรัม

คำแนะนำสินค้าที่เกี่ยวข้อง

หมายเลขแคตตาล็อก	ชื่อสินค้า	ขนาด
40123ES60	PerfCel™l Trypsin-EDTA (0.25%) ฟีนอลสีแดง	100 มล.
40124ES60	PerfCell™ Trypsin-ไม่มี EDTA (0.25%) ไม่มีฟีนอลแดง	100 มล.
40126ES60	PerfCell™ ทริปซิน (0.25%) ฟีนอลเรด	100 มล.
40127ES60	PerfCell™ Trypsin-EDTA (0.25%) ฟีนอลสีแดง	100 มล.
40101ES25	ทริปซิน 1:250(ผง)	25 กรัม
40512ES10/60	PerfCell™ Recombinant Trypsin (ผง)	10 มก./100 มก.
20416ES60	ทริปซินรีคอมบิแนนท์（MS-SAFE）	100 ไมโครกรัม
40134ES60	เพอร์ฟเซลล์ ไทรไซม์™ เอ็กซ์เพรส	100 มล.
40135ES60	เพอร์ฟเซลล์ ไทรไซม์™ เอ็กซ์เพรส	100 มล.
40506ES60	แอคคูเทส	100 มล.
40104ES60/80	ดิสเพส II	100 มก./1 ก.