ความเป็นมา – ROS คืออะไร

อนุมูลออกซิเจนที่เป็นปฏิกิริยา (ROS) เป็นผลิตภัณฑ์ตามปกติของกระบวนการเผาผลาญของเซลล์ ซึ่งประกอบด้วยโมเลกุลชีวภาพที่ประกอบด้วยออกซิเจน รวมถึงเปอร์ออกไซด์ ซูเปอร์ออกไซด์ ไฮดรอกซิลเรดิคัล ออกซิเจนซิงเกลต์ และอัลฟา-ออกซิเจน ฯลฯ ซึ่งมีบทบาทสำคัญในการควบคุมเส้นทางการส่งสัญญาณและการถอดรหัสของเซลล์ เช่น อะพอพโทซิส ออโตฟาจี การแก่ก่อนวัย มะเร็ง เป็นต้น

ผลกระทบของความเข้มข้นของ ROS ต่อเซลล์ – เหตุใดจึงต้องตรวจจับ ROS?

ในระดับออกซิเจนที่มีปฏิกิริยาต่ำ ROS จะเข้าไปเกี่ยวข้องกับการส่งสัญญาณและการควบคุมภายในเซลล์ในฐานะ "ผู้ส่งสารรีดอกซ์" อย่างไรก็ตาม ภายใต้ความเครียดจากสิ่งแวดล้อม (เช่น รังสีไอออไนซ์ ความร้อน รังสีอัลตราไวโอเลต ภาวะขาดออกซิเจน เป็นต้น) ระดับ ROS จะเพิ่มสูงขึ้นอย่างมาก ซึ่งอาจทำให้เกิดความเสียหายต่อ DNA ยับยั้งการแสดงออกของยีน นำไปสู่การพับตัวผิดปกติของโปรตีน และอาจส่งผลต่อการสังเคราะห์โปรตีน ส่งผลให้โครงสร้างของเซลล์ได้รับความเสียหายอย่างรุนแรง ซึ่งเรียกว่า ความเครียดออกซิเดชัน

เมื่อระดับ ROS เกินขีดความสามารถของการป้องกันสารต้านอนุมูลอิสระภายใน สมดุลรีดอกซ์จะถูกทำลาย ทำให้เกิดการเปลี่ยนแปลงทางโครงสร้างหรือโครงร่างใน DNA ไขมัน โปรตีน และท้ายที่สุดคือเซลล์ตาย

ระดับ ROS เป็นสัญญาณสำคัญของความเสียหายของเซลล์ที่เกิดจากการทำงานตามปกติทางสรีรวิทยาและปัจจัยด้านสิ่งแวดล้อม และการตรวจพบระดับ ROS ภายในเซลล์มีความสำคัญอย่างยิ่งต่อการทำความเข้าใจเส้นทางการส่งสัญญาณและกลไกการออกฤทธิ์ที่เป็นไปได้ของยาบางชนิด ดังนั้น การเลือกโพรบที่เหมาะสมสำหรับการตรวจหา ROS จึงมีบทบาทสำคัญในการวิจัยกลไกของโรคและการคัดกรองยา

การตรวจจับ ROS ทำงานอย่างไร?

การ ชุดทดสอบชนิดออกซิเจนที่มีปฏิกิริยา (CAT# 50101ES01) เป็นวิธีที่ใช้กันทั่วไปที่สุดในการวัดปริมาณสารออกซิเจนที่ทำปฏิกิริยาภายในเซลล์โดยอาศัยการเปลี่ยนแปลงความเข้มของการเรืองแสงของสีย้อมเรืองแสง DCFH-DA (2,7-Dichlorodi-hydrofluorescein diacetate)

DCFH-DA นั้นไม่มีการเรืองแสงและสามารถผ่านเยื่อหุ้มเซลล์ได้อย่างอิสระ และหลังจากเข้าสู่เซลล์แล้ว ก็สามารถไฮโดรไลซ์โดยเอสเทอเรสภายในเซลล์เพื่อผลิต DCFH ได้ อย่างไรก็ตาม DCFH ไม่สามารถทะลุเยื่อหุ้มเซลล์ได้ ทำให้สามารถติดฉลากและรวมตัวกับโพรบภายในเซลล์ได้ง่าย ออกซิเจนที่ทำปฏิกิริยาภายในเซลล์สามารถออกซิไดซ์ DCFH ที่ไม่เรืองแสงเพื่อสร้าง DCF เรืองแสงได้ ความเข้มของการเรืองแสงสีเขียวของ DCF นั้นแปรผันโดยตรงกับระดับของออกซิเจนที่ทำปฏิกิริยาภายในเซลล์ และสามารถทราบระดับของออกซิเจนที่ทำปฏิกิริยาภายในเซลล์ได้โดยการตรวจจับการเรืองแสงของ DCF

ภายใต้เงื่อนไขของความยาวคลื่นการกระตุ้น 488 นาโนเมตรและความยาวคลื่นการแผ่รังสี 525 นาโนเมตร จะสามารถตรวจจับการเรืองแสงของ DCF โดยใช้กล้องจุลทรรศน์เรืองแสง กล้องจุลทรรศน์คอนโฟคัลแบบเลเซอร์ เครื่องวัดการเรืองแสงด้วยสเปกโตรโฟโตมิเตอร์ เครื่องอ่านไมโครเพลทเรืองแสง เครื่องวัดการไหลแบบไซโตมิเตอร์ ฯลฯ เพื่อกำหนดระดับของอนุมูลออกซิเจนที่ทำปฏิกิริยาภายในเซลล์

เอกสารเผยแพร่ที่ลูกค้าใช้สินค้าตัวนี้ตีพิมพ์ (ตัวอย่างบางส่วน)

ณ เดือนกันยายน พ.ศ. 2565 มีการตีพิมพ์บทความทั้งหมด 164 บทความในชุดตรวจจับออกซิเจนที่เป็นปฏิกิริยา ROS (50101ES01) โดยมีปัจจัยผลกระทบรวมอยู่ที่ 913.72

ผลของการผลิต ROS ต่อการแบ่งขั้วของแมคโครฟาจและการฆ่าเซลล์เนื้องอก (PMID: 35665496; PMID: 35301299; หมายเลขประจำตัวผู้เข้าใช้งาน: PMC8931093 หมายเลขประจำตัวผู้เข้าใช้งาน: PMC9353410

คำถามที่พบบ่อย

คำถามที่ 1: ตัวอย่างใดเหมาะสำหรับการทดสอบ ROS?

A1: โดยทั่วไปจะใช้สำหรับการตรวจจับเซลล์ของสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนม และเหมาะสำหรับการตรวจจับอนุมูลออกซิเจนที่มีปฏิกิริยาในเซลล์ที่มีชีวิตหรือในร่างกายเท่านั้น

คำถามที่ 2: ชุดทดสอบ ROS เหมาะสำหรับการตรวจหาในซีรั่มหรือพลาสมาหรือไม่?

A2: ไม่เหมาะสำหรับการตรวจจับ ROS ในซีรั่มหรือเนื้อเยื่อที่เป็นเนื้อเดียวกัน สามารถทดลองใช้สารแขวนลอยเซลล์เดี่ยวที่เตรียมจากเนื้อเยื่อสดได้

คำถามที่ 3: สามารถตรวจพบพืชหรือแบคทีเรียได้หรือไม่?

A3: เหมาะสำหรับการตรวจจับอนุมูลอิสระออกซิเจนในเซลล์ที่มีชีวิตหรือในร่างกายเท่านั้น เนื่องจากอนุมูลอิสระไฮดรอกซิลและอนุมูลอิสระซุปเปอร์ออกไซด์ของออกซิเจนมีอายุครึ่งชีวิตสั้นมาก และเหมาะสำหรับการตรวจจับเซลล์ที่มีชีวิตเท่านั้น พืชหรือแบคทีเรียที่สามารถใช้ตรวจจับได้หลังจากเตรียมโปรโตพลาสต์ ชุดอุปกรณ์นี้ไม่สามารถตรวจจับ ROS ในร่างกายได้

คำถามที่ 4: ฉันจะหลีกเลี่ยงพื้นหลังเรืองแสงที่มากเกินไปได้อย่างไร

A4: หลังจากการฟักตัวของหัววัด ให้แน่ใจว่าได้ล้างหัววัดที่เหลือทั้งหมดที่ไม่ได้เข้าไปในเซลล์ออกไป

คำถามที่ 5: ฉันสามารถตรวจจับปริมาณ ROS ในเซลล์ปกติได้หรือไม่

A5: ปริมาณออกซิเจนที่เป็นปฏิกิริยาในเซลล์ปกติมีต่ำมาก และผลการตรวจจับอาจไม่ดีนัก

คำถามที่ 6: ค่าการเรืองแสงลบและบวกเท่ากัน เกิดอะไรขึ้น?

A6: อาจเกิดจากความเข้มข้นของโพรบที่เติมมากเกินไป แนะนำให้ลดความเข้มข้นของโพรบลง 5-7.5 μM และระยะเวลาการฟักตัว: 15-20 นาที

คำถามที่ 7: การเรืองแสงของการควบคุมเชิงบวกอ่อนแอ เกิดอะไรขึ้น?

A7: โดยปกติแล้ว Rosup ตัวควบคุมเชิงบวกจะเข้มข้นที่ 100 μM และพบว่าระดับออกซิเจนที่ทำปฏิกิริยาเพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญ 30 นาทีถึง 4 ชั่วโมงหลังจากการกระตุ้น ผลของการควบคุมเชิงบวกระดับออกซิเจนที่ทำปฏิกิริยาอาจแตกต่างกันอย่างมากระหว่างเซลล์ต่างๆ หากไม่พบการเพิ่มขึ้นของ ROS ภายใน 30 นาทีหลังจากการกระตุ้น เวลาในการเหนี่ยวนำอาจขยายออกไปหรืออาจเพิ่มความเข้มข้นของ Rosup ได้อย่างเหมาะสม

A8: หัววัดตัวเดิม ไม่แบ่ง 5 ครั้งแรกผลดีมาก ครั้งนี้ไม่ย้อม มีปัญหาอะไรหรือเปล่า?

คำถามที่ 8: 1. สถานะเซลล์ไม่ดี ส่งผลให้ประสิทธิภาพการย้อมสีต่ำ 2. เวลาในการเหนี่ยวนำยาบวกสั้นเกินไป และระดับของออกซิเจนที่ทำปฏิกิริยาได้อาจเพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญโดยการฟักที่อุณหภูมิ 37°C ในที่มืดเป็นเวลา 30 นาทีถึง 4 ชั่วโมง 3. โพรบถูกแช่แข็งและละลายมากกว่า 4 ครั้ง ประสิทธิภาพการย้อมสีลดลง และสัญญาณการเรืองแสงไม่เสถียร (บางครั้งแรง บางครั้งอ่อน และดับได้ง่าย) ขอแนะนำให้แบ่งโพรบออกเป็นส่วนๆ และเก็บไว้ในช่องแช่แข็งที่อุณหภูมิ -20°C ที่ได้รับการปกป้องจากแสงเพื่อหลีกเลี่ยงการแช่แข็งและละลายซ้ำๆ

คำถามที่ 9: สามารถใช้เครื่องมืออะไรในการทดสอบได้บ้าง?

A9: กล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนต์ กล้องจุลทรรศน์คอนโฟคัลแบบเลเซอร์ เครื่องวัดการเรืองแสงด้วยสเปกโตรโฟโตมิเตอร์ เครื่องอ่านไมโครเพลทเรืองแสง เครื่องวัดการไหลแบบไซโตมิเตอร์ ฯลฯ สามารถตรวจจับค่าการเรืองแสงได้

ผลงานวิจัยทางวิทยาศาสตร์ที่เผยแพร่โดยลูกค้าที่ใช้ผลิตภัณฑ์นี้ (บางส่วน)

[1] Zhong D, Jin K, Wang R, Chen B, Zhang J, Ren C, Chen X, Lu J, Zhou M. ไฮโดรเจลจากสาหร่ายขนาดเล็กสำหรับโรคลำไส้อักเสบและความวิตกกังวลและภาวะซึมเศร้าที่เกี่ยวข้อง Adv Mater. 26 มกราคม 2024: e2312275 doi: 10.1002/adma.202312275 พิมพ์ล่วงหน้าก่อนพิมพ์ PMID: 38277492   ถ้า: 29.4

[2] Zhang M และคณะ การเกณฑ์เซลล์ภูมิคุ้มกันด้วยเอ็กโซโซมที่ได้จาก NK ที่สามารถยับยั้งการทำงานของแสง (LASNEO) เพื่อการกำจัดเนื้องอกแบบผสมผสาน Adv Sci (Weinh) 2022 ส.ค.;9(22): e2201135 doi: 10.1002/advs.202201135 Epub 2022 มิ.ย. 4 ถ้า: 16.806

[3] Zhang D และคณะ ไมโครแคริเออร์ช่องปากที่ใช้สาหร่ายขนาดเล็กเพื่อรักษาสมดุลของจุลินทรีย์ในลำไส้และปกป้องลำไส้ในโรคมะเร็ง รังสีรักษา Nat Commun. 2022 มี.ค. 17;13(1):1413. doi: 10.1038/s41467-022-28744-4. PMID: 35301299 ถ้า: 14.919

[4] เจียว ดี และคณะกราฟีนออกไซด์ที่ลดลงซึ่งเข้ากันได้ทางชีวภาพกระตุ้น BMSCs กระตุ้นการเร่งการสร้างกระดูกใหม่และการเคลื่อนตัวของฟันจัดฟันผ่านการส่งเสริมการสร้างกระดูกสลายและการสร้างหลอดเลือดใหม่ Bioact Mater. 6 กุมภาพันธ์ 2022; 15:409-425. doi: 10.1016/j.bioactmat.2022.01.021. PMID: 35386350; PMCID: PMC8958387   ถ้า: 14.593
[5] Guo G และคณะ การบำบัดด้วยเคมีไดนามิกแบบเลือกพื้นที่ของ CuFe5O8 Nanocubes สำหรับการติดเชื้อที่เกี่ยวข้องกับการปลูกถ่าย ACS Nano 27 ตุลาคม 2020;14(10):13391-13405 doi: 10.1021/acsnano.0c05255 Epub 22 กันยายน 2020 PMID: 32931252  ถ้า: 14.588

[6] Yang C และคณะ Red Phosphorus Decorated TiO2 Nanorod Mediated Photodynamic and Photothermal Therapy for Renal Cell Carcinoma. ขนาดเล็ก 2021 ก.ค.;17(30): e2101837. doi: 10.1002/smll.202101837. Epub 2021 มิ.ย. 19. PMID: 34145768  ถ้า:13.281

[7] Xiaolu Chen และคณะ นาโนอนุภาคที่ส่งสารขยายแบบคาสเคดที่หุ้มด้วยเครือข่ายโลหะ-ฟีนอลิกที่เอาชนะการดื้อยาต่อยาต้านมะเร็งผ่านการอดอาหาร/เคมีไดนามิก/เคมีบำบัดร่วมกัน Chemical Engineering Journal สิงหาคม 2022; 442:136221   ถ้า: 13.273

[8] Hao Ding และคณะ เซลล์ต้นกำเนิดของเนื้อเยื่อเกี่ยวพันที่ห่อหุ้มด้วยไฮโดรเจลฉีดที่กำจัดอนุมูลอิสระและสร้าง O2 เพื่อการรักษากล้ามเนื้อหัวใจตาย Chemical Engineering Journal 2022.133511:1385-8947  ถ้า: 13.273

[9] Yu H และคณะ ตัวเร่งปฏิกิริยานาโนแบบ Triple Cascade ที่มีแหล่งจ่าย O2 ที่เปิดใช้งานด้วยเลเซอร์และการเพิ่มความร้อนด้วยแสงสำหรับการบำบัดด้วยตัวเร่งปฏิกิริยาที่มีประสิทธิภาพต่อเนื้องอกที่ขาดออกซิเจน Biomaterials 2022 ม.ค.; 280:121308 PMID: 34896860  ถ้า: 12.479

[10] Sun D และคณะ นาโนฟอร์มเลชั่นที่ใช้ไซโคลเดกซ์ทรินช่วยให้จินเซนโนไซด์ Rg3 และเคอร์ซิตินสามารถส่งไปพร้อมกันเพื่อใช้เป็นเคมีบำบัดภูมิคุ้มกันในมะเร็งลำไส้ใหญ่ Acta Pharm Sin B. 2022 ม.ค.;12(1):378-393 PMID: 35127393   ถ้า: 11.614

[11] Xiong Y และคณะ อนุภาคนาโนไบโอโพลีเมอร์ที่กระตุ้นได้เฉพาะเนื้องอกที่เสถียรด้วยไฮดรอกซีเอทิลสตาร์ชโปรดรักสำหรับการบำบัดมะเร็งแบบร่วมมือที่ขยายตัวได้เอง Theranostics 1 มกราคม 2022;12(2):944-962 PMID: 34976222 ถ้า: 11.556

[12] Gao J และคณะ "เรือนาโน" เหนือโมเลกุลที่กำหนดเป้าหมายไมโตคอนเดรียโดยยับยั้งการเผาผลาญพลังงานคู่พร้อมกันสำหรับเคมีบำบัดและรังสีบำบัดแบบเลือกเฉพาะเนื้องอกและแบบเสริมฤทธิ์กัน Theranostics 1 มกราคม 2022;12(3):1286-1302 PMID: 35154487   ถ้า: 11.556

[13] Zhong D และคณะ สาหร่ายขนาดเล็กที่สังเคราะห์แสงด้วยแคลเซียมฟอสเฟตเพื่อต่อสู้กับเนื้องอกที่ขาดออกซิเจนโดยการปรับสมดุลของภาวะขาดออกซิเจนและการรักษาด้วยรังสีแบบต่อเนื่อง Theranostics 22 มกราคม 2021;11(8):3580-3594 PMID: 33664849 ถ้า: 11.556

[14] Sun J และคณะ ความเป็นพิษต่อเซลล์ของเถ้าลอยจากการเผาขยะมูลฝอยเทศบาลที่เสถียร/แข็งตัว J Hazard Mater. 15 กุมภาพันธ์ 2022;424(Pt A):127369 doi: 10.1016/j.jhazmat.2021.127369 Epub 29 กันยายน 2021 PMID: 34879564  ถ้า: 10.588

[15] Zhu C และคณะ ไฮโดรเจลที่ไวต่อความร้อนแบบอเนกประสงค์สำหรับปรับเปลี่ยนสภาพแวดล้อมจุลภาคในโรคข้อเข่าเสื่อมโดยการทำให้แมคโครฟาจมีขั้วและกำจัด RONS J Nanobiotechnology 7 พฤษภาคม 2022;20(1):221 ถ้า: 10.435

[16] Pan X และคณะ นาโนสเฟียร์สังกะสีออกไซด์สำหรับการกำจัดไฮโดรเจนซัลไฟด์และเฟอร์โรพโทซิสของมะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนัก J Nanobiotechnology 27 พฤศจิกายน 2021;19(1):392 doi: 10.1186/s12951-021-01069-y PMID: 34838036; PMCID: PMC8626909   ถ้า: 10.435

[17] He J และคณะ นาโนเชลล์ทองคำ-เงินช่วยส่งเสริมการสมานแผลจากการติดเชื้อแบคทีเรียที่ดื้อยา และช่วยให้สามารถติดตามผลได้โดยใช้การถ่ายภาพการกระเจิงรามานที่ปรับปรุงพื้นผิว Biomaterials 2020 มี.ค.; 234:119763 PMID: 31978871   ถ้า: 10.317

[18] Cheng Q และคณะ Nanotherapeutics ขัดขวางภาวะสมดุลรีดอกซ์ของเซลล์เพื่อการบำบัดด้วยแสงที่มีประสิทธิภาพมากขึ้น Biomaterials 2019 ธ.ค.; 224:119500 doi: 101016/j.biomaterials.2019.119500. Epub 2019 ก.ย. 17. PMID: 31557591.  ถ้า: 10.273

[19] Zhong D และคณะ α ลูกบาศก์รวมที่กระตุ้นด้วยเลเซอร์-Fe2O3@Au nanoวัสดุผสมสำหรับการถ่ายภาพด้วยคลื่นแม่เหล็กไฟฟ้าและการบำบัดแบบเสริมฤทธิ์ด้วยความร้อนจากแสง/รังสี Biomaterials ต.ค. 2562; 219:119369 PMID: 31351244   ถ้า: 10.273

[20] Sun C และคณะ การกำจัดเซลีโนไซด์ช่วยควบคุมความเครียดออกซิเดชันเพื่อปรับปรุงประสิทธิภาพในการต่อต้านเนื้องอก Biomaterials 2019 ธ.ค.; 225:119514 doi: 10.1016/j.biomaterials.2019.119514 Epub 24 ก.ย. 2019 PMID: 31569018    ถ้า: 10.273

สินค้าแนะนำ

ชื่อสินค้า

หมายเลขแคตตาล็อก

ขนาด

ชุดทดสอบชนิดออกซิเจนที่มีปฏิกิริยา

50101ES01

1 ชุด (1,000 ทดสอบ)

การสอบถาม