เครื่องมือวิจัย RNA แบบวงกลม -rnase R

เครื่องมือวิจัย RNA แบบวงกลม -RNAse R

—— เร่งพัฒนายา RNA แบบหมุนเวียน

ในช่วงไม่กี่ปีที่ผ่านมา วัคซีน/ยา mRNA ค่อยๆ เข้ามาอยู่ในสายตาของสาธารณชน วัคซีน/ยา mRNA มีข้อดีคือออกแบบได้รวดเร็ว ต้นทุนต่ำ และผลิตได้ง่าย แต่เนื่องจาก mRNA เองย่อยสลายได้ง่าย ปัจจุบันจึงปรับปรุงความเสถียรของการเตรียม mRNA เป็นหลักโดยการเพิ่มหมวกและหาง และการแปล mRNA ที่ช่วยเหลือ ในช่วงไม่กี่ปีที่ผ่านมา นักวิจัยได้ค้นพบ RNA ชนิดใหม่ - RNA แบบวงกลม (Circular RNA, circRNA) RNA ดังกล่าวมีโครงสร้างวงแหวนปิดแบบโคเวเลนต์ ซึ่งไม่ง่ายที่จะย่อยสลาย เมื่อเปรียบเทียบกับ mRNA แล้ว circRNA จะมีเสถียรภาพมากกว่าและสามารถแปลแบบไม่ขึ้นอยู่กับหมวกได้ ดังนั้น การค้นพบ CIRCRNA จึงทำให้สามารถพัฒนาวัคซีนและยา RNA รุ่นใหม่ที่มีเสถียรภาพมากขึ้นและง่ายขึ้น

รูปที่ 1: กระบวนการการผลิตวัคซีนอาร์เอ็นเอ 1

กระบวนการผลิต CIRCRNA ประกอบด้วย: การเตรียมเทมเพลต การถอดรหัสในหลอดทดลอง การกำจัดเทมเพลต DNA การหมุนเวียนและการทำให้บริสุทธิ์ หลังจากที่ RNA ถูกหมุนเวียนแล้ว จำเป็นต้องใช้ไรโบนิวคลีเอส R (Ribonuclease R, RNASE R) เพื่อย่อย RNA ที่ไม่มีมนุษย์ควบคุมเพื่อให้บรรลุวัตถุประสงค์ในการเสริมคุณค่าให้กับ CirCRNA Yeasen มีวิศวกรรมเอนไซม์ระดับโมเลกุลและแพลตฟอร์มวิวัฒนาการเชิงเหตุผล ช่วยให้มั่นใจถึงคุณภาพของผลิตภัณฑ์ในเวลาเดียวกัน Yeasen ทีม R&D ประสบความสำเร็จในการพัฒนาเอนไซม์ RNASE R ที่มีความบริสุทธิ์สูงและกิจกรรมสูง

RNASE อาร์ (CAT#14606ES) เป็นเอนไซม์ ribonucleic acid exonuclease 3 '→ 5' ที่มี Mg2+ เป็นองค์ประกอบ ซึ่งได้มาจาก E. coli สามารถย่อย RNA เชิงเส้นทั้งหมดได้ และไม่ย่อย CirCRNA, lariat RNA มักใช้เพื่อกำจัดโมเลกุล RNA เชิงเส้น และบรรลุวัตถุประสงค์ในการเพิ่มจำนวน RNA ที่ไม่ใช่เชิงเส้น เช่น CirCRNA และ lariat RNA

คุณสมบัติ

ความบริสุทธิ์ของโปรตีน (SDS-PAGE) ≥95%

รูปที่ 2: การตรวจจับความบริสุทธิ์ของโปรตีน: ปริมาตรที่แตกต่างกัน (1 μL, 2 μL, 3 μL) ของผลิตภัณฑ์ (Cat#14606ES) แสดงให้เห็นความบริสุทธิ์สูง ≥95%

ไม่มีสิ่งตกค้าง เอ็กโซนิวคลีเอส

รูปที่ 3: เติม RNASE R 20 U ลงใน λDNA-Hind III Digest 0.5 μg ฟักที่อุณหภูมิ 37 ℃ เป็นเวลา 4 ชั่วโมง ผลการทดลองแสดงให้เห็นว่าไม่มีสารตกค้าง ตรวจพบเอ็กโซนิวคลีเอสจากผลิตภัณฑ์ RNASE R (CAT#14606ES)

ความสามารถในการย่อย RNA เชิงเส้นและ เซอร์คอาร์เอ็นเอ

รูปที่ 4: RNASE R (CAT#14606ES) สามารถย่อยโมเลกุล RNA เชิงเส้นได้
รูปที่ 5: CircRNA สามารถทนต่อการรักษา RNASE R (CAT#14606ES) ได้

ผลิตภัณฑ์

แมว

ขนาด

RNAse R (20U/μL)

14606ES

250U/2500U/10000U
RNase R (เกรด GMP, 20 U/μL) 14615ES 250U/2500U/10000U

โพลิเมอร์ RNA T7 เกรด GMP (250U/μL)

10625ES

10KU/100KU/2500KU
CleaScrip™ T7 RNA Polymerase (dsRNA ต่ำ 250 U/μL) 10628ES 10KU/100KU/2500KU

อ้างอิง

  1. Qu L, Yi Z, Shen Y และคณะ วัคซีน RNA แบบวงกลมเพื่อต่อต้าน SARS-CoV-2 และสายพันธุ์ที่เกิดขึ้นใหม่ เซลล์2022;185(10):1728-1744.e16. doi:10.1016/j.cell.2022.03.044
  2. Chen L, Wang C, Sun H และคณะ กล่องเครื่องมือชีวสารสนเทศสำหรับการค้นพบและวิเคราะห์ circRNA วารสาร Brief Bioinform. 2021;22(2):1706-1728. doi:10.1093/bib/bbaa001

การสอบถาม