ลดเวลาอย่างมีประสิทธิภาพให้แน่ใจว่ามีคุณภาพด้วยการอัพเกรดล่าสุดเป็นกระบวนการถอดความ mRNA onePot!

ในช่วงไม่กี่ปีที่ผ่านมา การพัฒนาและการประยุกต์ใช้เทคโนโลยี mRNA ยังคงได้รับความสนใจอย่างต่อเนื่อง ยา mRNA เกี่ยวข้องกับการฉีด mRNA ที่เข้ารหัสโปรตีนแอนติเจนเข้าไปในร่างกายมนุษย์ โดยการใช้สารพันธุกรรมภายในเซลล์ของมนุษย์ ยาจะแสดงและสังเคราะห์โปรตีนแอนติเจน กระบวนการนี้กระตุ้นและกระตุ้นระบบภูมิคุ้มกันของร่างกายผ่านโปรตีนแอนติเจน โดยมีจุดมุ่งหมายเพื่อป้องกันและรักษาโรค ยา mRNA มีข้อดี เช่น ความปลอดภัย ประสิทธิภาพ และวงจรสั้น ยาเหล่านี้สามารถกระตุ้นภูมิคุ้มกันแบบฮิวมอรัลและแบบเซลล์พร้อมกันได้ และถูกนำไปใช้ในข้อบ่งชี้ต่างๆ รวมถึงเนื้องอก โรคติดเชื้อ โรคหายาก โรคหัวใจและหลอดเลือด และอื่นๆ อีกมากมาย

กระบวนการทั้งหมดของการพัฒนายา mRNA สามารถแบ่งได้คร่าวๆ เป็นหลายขั้นตอน:

การกำหนดลำดับและการออกแบบ—การถอดรหัส mRNA ในหลอดทดลอง—การเตรียมการห่อหุ้ม

การ ธรรมดา ขั้นตอนของการถอดรหัส mRNA ในหลอดทดลอง (IVT) ประกอบด้วย:

การสกัดและการสร้างเส้นตรงของพลาสมิด DNA-การฟอกพลาสมิดดีเอ็นเอ—การถอดรหัสในหลอดทดลอง (การปิดทับการถอดรหัสร่วม) —การทำให้บริสุทธิ์ — สารละลายสต็อก mRNA

การ วันพอต กระบวนการถอดรหัส mRNA ในหลอดทดลอง (IVT) ประกอบด้วย:

การสกัดและการสร้างเส้นตรงของพลาสมิด DNA-การถอดรหัสในหลอดทดลอง (การปิดทับการถอดรหัสร่วม) — การทำให้บริสุทธิ์ — สารละลายสต็อก mRNA

ในปัจจุบัน กระบวนการที่มีอยู่ส่วนใหญ่เกี่ยวข้องกับขั้นตอนการทำให้บริสุทธิ์ครั้งเดียวสำหรับ DNA พลาสมิดหลังจากการแยกด้วยเอนไซม์ก่อนขั้นตอน IVT Yeasen Biotechlogy ซึ่งใช้ศูนย์พัฒนาการประยุกต์ใช้ mRNA ที่มีการพัฒนามาอย่างยาวนาน ได้พัฒนากระบวนการ "Onepot mRNA Transcription" ขึ้น ในกระบวนการนี้ DNA พลาสมิดวงกลมจะไม่ถูกทำให้บริสุทธิ์หลังจากการแยกด้วยเอนไซม์ แต่จะถูกนำไปใช้โดยตรงสำหรับการถอดรหัสในหลอดทดลอง ส่งผลให้ได้สารละลายสต็อก mRNA คุณภาพสูง กระบวนการทั้งหมดนี้ช่วยให้ระยะเวลาของกระบวนการที่มีอยู่สั้นลง แม้ว่าจะรับประกันคุณภาพของผลิตภัณฑ์และกระบวนการก็ตาม

ข้อดีของกระบวนการ:

1. เพิ่มประสิทธิภาพกระบวนการ ลดขั้นตอน IVT เพื่อการดำเนินงานที่ง่ายขึ้น
2. ลดต้นทุนวัสดุ ช่วยลดความจำเป็นในการทำให้บริสุทธิ์หลังการแยกและการตรวจสอบคุณภาพ
3. รักษาคุณภาพและผลผลิตของ mRNA

ข้อมูล:

1. ผลผลิตและ ความซื่อสัตย์-

การใช้ พลาสมิด 2K, 4K และ 9K เชิงเส้นขนาด 1 μg กระบวนการ onepot สามารถสร้าง mRNA ได้ 150-200 μg

ความยาว	ผลผลิต	ความซื่อสัตย์
2K	200 ไมโครกรัม	94.00%
4K	185 ไมโครกรัม	92.20%
9พัน	150 มก.	87.50%

การทดสอบความสมบูรณ์ดำเนินการโดยใช้อิเล็กโตรโฟรีซิสแบบแคปิลลารี (CE) เพื่อประเมินความสมบูรณ์ของชิ้นส่วนที่มีความยาว 2K, 4K และ 9K โดยชิ้นส่วน 2K และ 4K มีความสมบูรณ์มากกว่า 92% และชิ้นส่วน 9K มีความสมบูรณ์มากกว่า 87%

2. การตรวจจับประสิทธิภาพการปิด mRNA

ใช้ LC-MS เพื่อประเมินประสิทธิภาพการปิดฝาของลำดับ 2K และเผยให้เห็นประสิทธิภาพการปิดฝาที่ 99.5%

ภาพด้านบน: โครมาโทแกรม UV HPLC

ภาพล่าง: สเปกตรัมมวลโมเลกุลแบบดีคอนโวลูต

3. การตรวจจับประสิทธิภาพของโพลีอะดีไนเลชัน mRNA

LC-MS ถูกใช้เพื่อตรวจจับประสิทธิภาพโพลีอะดีไนเลชันของตัวอย่าง โดยแสดงผลที่กระจายตามปกติ

ภาพด้านบน: โครมาโทกราฟีของเหลว TIC โครมาโทแกรม

ภาพล่าง: สเปกตรัมมวลโมเลกุลแบบดีคอนโวลูต

4.การแสดงออกของ mRNA การวิเคราะห์

การถ่ายโอนยีนของเซลล์ 293T ด้วยผลิตภัณฑ์ mRNA ที่สังเคราะห์โดยใช้ทั้งสอง ธรรมดา กระบวนการ (ซ้าย พลาสมิดเชิงเส้น วด้วยการทำให้บริสุทธิ์) และกระบวนการหม้อเดียว (ขวา พลาสมิดเชิงเส้นโดยไม่ทำให้บริสุทธิ์) แสดงความแตกต่างในการแสดงออกของโปรตีนเรืองแสงหลังการเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 24 ชั่วโมง

ข้อมูลการสั่งซื้อ