UCF.ME™ UltraNuclease หรือที่เรียกอีกอย่างว่า Totipotent nuclease, broad-spectrum nuclease และ non-limiting Inhibitory endonuclease มีต้นกำเนิดจาก Serratia Marcescen แต่ต่อมาได้มีการออกแบบใหม่และผลิตโดย
1. Totipotent nuclease คืออะไร?
2. สถานการณ์การใช้งานของ Totipotent Nuclease มีอะไรบ้าง?
3. ข้อดีที่ Totipotent Nuclease ต้องมีคืออะไร?
4. คำถามที่พบบ่อย
5. สินค้าที่เกี่ยวข้อง
1. Totipotent nuclease คืออะไร?
นิวคลีเอสโทติโพเทนต์เป็นเอ็นโดนิวคลีเอสที่ดัดแปลงพันธุกรรมซึ่งมีความสามารถในการย่อยสลายกรดนิวคลีอิกได้หลากหลายรูปแบบ ซึ่งรวมถึงกรดนิวคลีอิกสายเดี่ยว สายคู่ เชิงเส้น ดั้งเดิม และกรดนิวคลีอิกที่ผ่านการเปลี่ยนสภาพ นิวคลีเอสเหล่านี้สร้างโอลิโกนิวคลีโอไทด์ 5' โมโนฟอสเฟตที่มีความยาวตั้งแต่ 3 ถึง 5 เบส และไม่แสดงการจดจำเบสที่เฉพาะเจาะจง นิวคลีเอสที่ใช้งานได้หลากหลายเหล่านี้แสดงความเสถียรที่แข็งแกร่งและกิจกรรมการย่อยในสภาวะต่างๆ ทำให้มีประสิทธิภาพสูงในการกำจัดสารตกค้างของกรดนิวคลีอิกในตัวอย่างหรือผลิตภัณฑ์ ซึ่งจะช่วยเพิ่มความบริสุทธิ์ของตัวอย่างและประสิทธิภาพทางชีวภาพของผลิตภัณฑ์ ทำให้นิวคลีเอสโทติโพเทนต์เป็นเอนไซม์เตรียมที่ต้องการสำหรับการวิจัยทางวิทยาศาสตร์ วัคซีน และอุตสาหกรรมต่างๆ เช่น โปรตีนและโพลีแซ็กคาไรด์ในยา
นอกจากนี้ นิวคลีเอสโททิโพเทนต์ยังมีบทบาทสำคัญในการกำจัดกรดนิวคลีอิกระหว่างการเตรียมวัคซีน แอนติบอดี การบำบัดด้วยเซลล์ และผลิตภัณฑ์ทางชีวภาพอื่นๆ ทำให้มั่นใจได้ว่าเป็นไปตามข้อบังคับของ FDA ที่กำหนดว่ากรดนิวคลีอิกที่เหลือในผลิตภัณฑ์ขั้นสุดท้ายเพื่อใช้ในการรักษาต้องไม่เกิน 10 pg ต่อโดส นิวคลีเอสโททิโพเทนต์จะลดความหนืดของไลเสตของเซลล์โดยการย่อยสลายกรดนิวคลีอิก ทำให้กระบวนการกรองสารละลาย/อัลตราฟิลเตรชันง่ายขึ้นในระหว่างการทำให้บริสุทธิ์ของอนุภาคที่ได้จากเซลล์ เช่น ไวรัส เวกเตอร์ AAV และอินคลูชันบอดี ซึ่งจะทำให้กระบวนการแปรรูปมีประสิทธิภาพมากขึ้น ปรับปรุงการปั่นเหวี่ยง เพิ่มประสิทธิภาพการแยกตะกอนและของเหลวเหนือตะกอน และเพิ่มประสิทธิผลของการทำให้บริสุทธิ์ด้วยโครมาโทกราฟี ซึ่งในที่สุดจะเพิ่มผลผลิตและความบริสุทธิ์ของผลิตภัณฑ์
2. สถานการณ์การใช้งานของ Totipotent Nuclease มีอะไรบ้าง?
UltraNuclease มีการประยุกต์ใช้งานที่หลากหลาย และต่อไปนี้คือสถานการณ์การใช้งานที่เฉพาะเจาะจง
2.1 การกำจัดไวรัส (lentivirus, AAV, วัคซีน adenovirus แบบ recombinant, ไวรัสที่ไม่ทำงาน, ไวรัส oncolytic ฯลฯ)
การใช้ไวรัสในภาคชีวการแพทย์กำลังขยายตัวอย่างมาก โดยครอบคลุมถึงการใช้งานต่างๆ เช่น วัคซีน การบำบัดด้วยเซลล์ การบำบัดด้วยยีน และสาขาอื่นๆ อีกมากมาย เซลล์โฮสต์ที่รับผิดชอบในการผลิตไวรัสส่วนใหญ่เป็นเซลล์ที่ผ่านเซลล์ต่อเนื่อง (continuous passage cells หรือ CCL) CCL มีแนวโน้มทางพันธุกรรมที่จะเติบโตอย่างไม่ควบคุม ซึ่งทำให้สามารถแพร่พันธุ์ได้อย่างไม่มีกำหนด อย่างไรก็ตาม การมี DNA ที่เหลืออยู่จาก CCL อาจก่อให้เกิดความเสี่ยง เช่น การแพร่กระจายของเซลล์มนุษย์อย่างไม่มีการควบคุมซึ่งนำไปสู่การสร้างเนื้องอก นอกจากนี้ ชิ้นส่วน DNA ที่เหลืออยู่เหล่านี้อาจมีจีโนมของไวรัสที่ทำให้เกิดการติดเชื้อได้ ซึ่งทำให้เกิดความกังวลเกี่ยวกับความเสี่ยงต่อการติดเชื้อควบคู่ไปกับการเกิดเนื้องอก ดังนั้น จึงจำเป็นต้องมีมาตรการควบคุมที่เข้มงวดเพื่อจัดการ DNA ที่เหลืออยู่ในผลิตภัณฑ์ทางชีวภาพ เพื่อให้แน่ใจว่าผลิตภัณฑ์เหล่านั้นปลอดภัย ในเรื่องนี้ UCF ของเราME™ UltraNuclease นำเสนอโซลูชันที่ปลอดภัยสำหรับการทำความสะอาดไวรัส
เกลือมีบทบาทสำคัญในการลดการรวมตัวของโปรตีนหรือไวรัส ช่วยให้แยก DNA และ RNA ออกจากโปรตีนและส่วนประกอบของเซลล์อื่นๆ ได้ Salt Active UltraNuclease ซึ่งเป็นเอ็นโดนิวคลีเอสแบบไม่จำเพาะเจาะจง จะแสดงกิจกรรมที่เหมาะสมที่สุดที่ความเข้มข้นของเกลือสูง ในสภาวะที่มีเกลือสูง เอนไซม์จะเข้าถึง DNA และ RNA ที่ปลดปล่อยออกมาได้ดีขึ้น ทำให้การย่อยสลายของ DNA และ RNA ดีขึ้น นิวคลีเอสที่มีกิจกรรมสูงขึ้นในสภาพแวดล้อมที่มีเกลือสูงพิสูจน์แล้วว่ามีประสิทธิภาพมากกว่าในการปรับปรุงกระบวนการทำให้บริสุทธิ์ Salt Active UltraNuclease สามารถนำมาใช้เพื่อลดความหนืดในของเหลวเหนือตะกอนของเซลล์และไลเสต ช่วยเพิ่มประสิทธิภาพในการทำให้บริสุทธิ์ภายใต้สภาวะที่มีเกลือสูง เอนไซม์นี้ยังลดปริมาณกรดนิวคลีอิกของโฮสต์ให้เหลือเพียงระดับพิกกรัม จึงช่วยเพิ่มประสิทธิภาพและความปลอดภัยของการใช้งานผลิตภัณฑ์ทางชีวภาพต่างๆ รวมถึงการทำให้บริสุทธิ์ไวรัส การผลิตวัคซีน และการผลิตโปรตีนและโพลีแซ็กคาไรด์ในยา
2.2 การทำให้บริสุทธิ์ของโปรตีนรีคอมบิแนนท์ที่แสดงออกใน E. coli
โปรตีนบางชนิดที่แสดงออกใน E. coli มีแนวโน้มที่จะรวมตัวกันเป็นอินคลูชันบอดี ทำให้กระบวนการทำให้บริสุทธิ์มีความซับซ้อน เนื่องจากโปรตีนเหล่านี้มักจะพันกันกับดีเอ็นเอของโฮสต์ เซลล์แบคทีเรียที่แตกออกอาจมีความหนืดสูง ทำให้ประสิทธิภาพในการทำให้บริสุทธิ์ของโปรตีนลดลงอย่างมาก อย่างไรก็ตาม การนำ UCF.ME™ UltraNuclease 10-50 U/mL เข้าไปในสารละลายแบคทีเรียระหว่างการรบกวนด้วยคลื่นอัลตราโซนิก และฟักตัวอย่างที่อุณหภูมิ 37°C เป็นเวลา 30 นาทีหรือ 4°C ข้ามคืนหลังจากรบกวนเสร็จแล้ว จะสามารถลดความหนืดในสารละลายแบคทีเรียได้อย่างมีประสิทธิภาพ ซึ่งในทางกลับกันก็ช่วยเพิ่มประสิทธิภาพในกระบวนการทำให้บริสุทธิ์ได้อย่างมาก สรุปได้ว่า คุณสามารถไว้วางใจ UCF.ME™ UltraNuclease ของเราในการอำนวยความสะดวกในการทำให้บริสุทธิ์ของโปรตีนได้อย่างมีประสิทธิภาพ
2.3 ป้องกันการจับตัวเป็นก้อนของเซลล์
ในช่วงไม่กี่ปีที่ผ่านมา การใช้เซลล์เม็ดเลือดขาวโมโนนิวเคลียร์ที่แช่แข็ง (PBMC) ในการทดสอบภูมิคุ้มกันเพิ่มขึ้นอย่างมาก ลักษณะเด่นที่สุดของเซลล์ PBMC คือจับตัวกันได้ง่ายมากหลังจากการฟื้นคืนชีพ ซึ่งอาจนำไปสู่คุณภาพเซลล์ที่ต่ำและผลการทดสอบที่ไม่น่าเชื่อถือ เมื่อเซลล์ฟื้นคืนชีพแล้ว จะมีการเติม UCF.ME™UltraNuclease ในความเข้มข้นที่เหมาะสม (25-50 U/mL) ลงในอาหารเลี้ยงเชื้อ และเพาะเลี้ยงเซลล์ร่วมกัน ซึ่งสามารถป้องกันการเกาะตัวกันของเซลล์ได้อย่างมีประสิทธิภาพ ดังนั้น คุณจึงใช้ประโยชน์จาก UCF.ME™ UltraNuclease ของเราได้อย่างเต็มที่เพื่อเพิ่มโอกาสในการประสบความสำเร็จ
3. ข้อดีที่ Totipotent Nuclease ต้องมีคืออะไร?
3.1 มีขอบเขตการใช้งานที่กว้างขวาง
UCF.ME™ UltraNuclease สามารถตัดและย่อยสลาย DNA และ RNA ในรูปแบบต่างๆ ภายใต้เงื่อนไขการทดลองที่หลากหลาย และนำไปใช้เพื่อกำจัดกรดนิวคลีอิกที่เหลืออยู่ในผลิตภัณฑ์ทางชีวภาพต่างๆ ได้
3.2 ความบริสุทธิ์สูง กิจกรรมเอนไซม์สูง
สำหรับ UCF.ME™ UltraNuclease ของเรา ความบริสุทธิ์ของเอนไซม์จะมากกว่าหรือเท่ากับ 99% (HPLC) และมีกิจกรรมของเอนไซม์มากกว่าหรือเท่ากับ 1.5*106 U/mg (โดยใช้วิธีเชิงปริมาณสัมบูรณ์สำหรับสารตั้งต้นทั่วไป)
3.3 ความสามารถในการปรับตัวที่แข็งแกร่ง
UCF.ME™ UltraNuclease มีเสถียรภาพสูงในการจัดเก็บและการแช่แข็งและละลาย เราจัดเก็บ UCF.ME™ UltraNuclease ที่อุณหภูมิ -20 °C, 4 °C และ 37 °C เพื่อตรวจจับแนวโน้มของกิจกรรมเอนไซม์ เมื่อวางไว้ที่อุณหภูมิ 37 °C เป็นเวลา 2 สัปดาห์ ไม่มีการเปลี่ยนแปลงที่สำคัญในกิจกรรมเอนไซม์ในขณะเดียวกันเพื่อให้แน่ใจถึงความเสถียรของเอนไซม์ เราใช้น้ำแข็งแห้งและน้ำแข็งอัดรวมกัน ขนส่ง UCF.ME™ UltraNuclease สำหรับสถานที่ของคุณ นอกจากนี้ยังมีความทนทานสูงและสามารถปรับให้เข้ากับสภาพการทำงานที่หลากหลาย
3.4 ปฏิบัติตามเภสัชตำรับ
UCF.ME™ UltraNuclease ผลิตใน UCF.ME (Ultra Clean Factory. Molecular Enzyme) ซึ่งเป็นเอนไซม์ประเภทหนึ่งที่สะอาดเป็นพิเศษ เอนไซม์ที่สะอาดเป็นพิเศษคืออะไร เอนไซม์ประเภทนี้เป็นเอนไซม์ระดับโมเลกุลที่ได้มาตรฐานคุณภาพ คือ ไม่มี HCD, HCR, HCP, ปราศจาก DNASE, ปราศจาก RNASE, ไม่มีสารตกค้างของโปรตีเอส, ไม่มีสารตกค้างของจุลินทรีย์, ไม่มีเชื้อก่อโรค, ไม่มีแหล่งกำเนิดจากสัตว์, มลพิษจากยาปฏิชีวนะ, มีสารตกค้างของเอนโดทอกซินต่ำเป็นพิเศษ, มีกิจกรรมของเอนไซม์สูง และมีความบริสุทธิ์สูง เป็นต้น ดังนั้น คุณจึงสามารถไว้วางใจในผลิตภัณฑ์ของเราได้อย่างปลอดภัยและเชื่อถือได้
3.5 การผลิตตามมาตรฐาน GMP
กระบวนการทั้งหมดของการผลิต UltraNuclease เสร็จสมบูรณ์ในเวิร์กช็อปการผลิต GMP และแผนการตรวจสอบคุณภาพจะดำเนินการอย่างเคร่งครัดโดย เภสัชตำรา วิธีการที่ตอบสนองความต้องการขนาดใหญ่ตั้งแต่การวิจัยและพัฒนาไปจนถึงการผลิต
UCF.ME™ พันธมิตรของ UltraNuclease —— ชุดตรวจ ELISA UltraNuclease
ในขั้นตอนการฟอกปกติ UCF.ME™ อุลตรานิวคลีเอส จะถูกกำจัดสิ่งเจือปนออกได้ง่าย เพื่อตรวจจับสารตกค้างของ UCF.ME™ อุลตรานิวคลีเอส
อุลตรานิวคลีเอส ชุดตรวจ ELISA
ช่วงเชิงเส้นอยู่ระหว่าง 0.047 ถึง 3 ng/mL และ R2 มากกว่า 0.99 ด้วยความสามารถในการทำซ้ำระหว่างชุดที่ดี เราจึงเพิ่มความเข้มข้นคงที่ของ UltraNuclease ลงในตัวอย่างและใช้ชุด ELISA 3 ชุดที่แตกต่างกันในการตรวจจับ อัตราการกู้คืนการตรวจจับอยู่ระหว่าง 70% ถึง 110% เมื่อความเข้มข้นของ nuclease อยู่ระหว่าง 3 ถึง 0.186 ng/mL และ CV น้อยกว่า 10% ยิ่งไปกว่านั้น อัตราการกู้คืนตัวอย่างจำลองของ UltraNuclease ที่มีความเข้มข้นต่างกันทั้งหมดอยู่ระหว่าง 70% ถึง 130% และดีกว่าแบรนด์อื่น ๆ นอกจากนี้ยังมีความจำเพาะสูงที่เราประเมินการจับแบบไม่จำเพาะของแอนติบอดี UltraNuclease กับตัวอย่างทั่วไป 8 ตัวอย่าง ผลของกลุ่มรบกวนและกลุ่มควบคุมทับซ้อนกันและไม่พบการรบกวน
หลังจากการยื่น DMF ของ UltraNuclease
เลขที่การยื่นฟ้องคือ:
| ตัวเลข | ชื่อสินค้า | หมายเลขการยื่นฟ้อง |
| 1 | อุลตรานิวคลีเอส | MF037298 |
| 2 | เกลือแอคทีฟอัลตร้านิวคลีเอส | MF037815 |
4. คำถามที่พบบ่อย
คำถามที่ 1: จะต้องเพิ่ม UltraNuclease ในขั้นตอนใด?
A: ขึ้นอยู่กับตัวอย่างที่คุณกำลังจัดการอยู่ ในการฟอกไวรัส โดยทั่วไปจะเติมลงไปหลังจากฟอกไวรัสแล้ว ในการฟอกโปรตีนของอีโคไล สามารถเติมลงไปได้เมื่อเซลล์แตกสลาย ในการจัดการกับการจับตัวเป็นก้อนของเซลล์ สามารถเติมลงในอาหารเลี้ยงเชื้อโดยตรงเพื่อเพาะเลี้ยงร่วมกับเซลล์
คำถามที่ 2: ถ้าอุณหภูมิปฏิกิริยาไม่สามารถถึง 37°C จะใช้ได้อย่างไร?
ก: กิจกรรมของเอนไซม์ของ UltraNuclease ได้รับผลกระทบจากอุณหภูมิ เวลาในการรักษา และหน่วยกิจกรรมของเอนไซม์ หากอุณหภูมิไม่สามารถถึง 37°C ได้ ก็สามารถเติมเอนไซม์ในปริมาณที่เหมาะสม หรือขยายเวลาการบ่มเพาะได้
คำถามที่ 3: UltraNuclease เข้ากันได้กับสารยับยั้งโปรตีเอสหรือไม่?
ก: เข้ากันได้ แต่ควรทราบว่าสารยับยั้งโปรตีเอสหลายชนิดมี EDTA เมื่อ EDTA เริ่มมีความเข้มข้นสูงกว่า 1 มิลลิโมลาร์ EDTA จะยับยั้งการทำงานของนิวคลีเอสบางชนิด
ไตรมาสที่ 4: จะกำจัด UltraNuclease ได้อย่างไร?
ก: สามารถกำจัดออกได้ด้วยวิธีต่างๆ เช่น TFF, ไดอะไลซิส และคอลัมน์โครมาโทกราฟี
คำถามที่ 5: ชุดทดสอบ UltraNuclease ELISA สามารถใช้ตรวจหากรดอะมิโนโทติโพเทนต์นิวคลีเอสของยี่ห้ออื่นได้หรือไม่
ก: เราไม่แนะนำให้ทำเช่นนี้ ชุดทดสอบ ELISA ได้รับการพัฒนาขึ้นอย่างสมบูรณ์โดยอิงตาม UltraNuclease และสามารถวัดปริมาณ UltraNuclease ได้อย่างแม่นยำ นิวคลีเอส Altipotent ของแบรนด์อื่นอาจแตกต่างจาก UltraNuclease ในแง่ของลำดับและกระบวนการผลิต และผลการทดสอบอาจไม่แม่นยำ
5. สินค้าที่เกี่ยวข้อง
ผลิตภัณฑ์ที่จัดทำโดย
ตารางที่ 1 สินค้าที่เกี่ยวข้อง
| ชื่อสินค้า | รหัสสินค้า | ข้อมูลจำเพาะ |
| 20157ES25/60/80/90 | 25KU/100KU/1MU/5MU | |
| 20159ES25/60/80/90 | 25KU/100KU/1MU/5MU | |
| 36701ES59 | 96ที | |
| เกลือแอคทีฟ ชุดตรวจ ELISA อัลตร้านิวคลีเอส | 36703ES96 | 96ที |