Ürün Tanıtımı
Kolajenaz, özellikle Pro-X-Gly-Pro dizisini (kollajende sıklıkla bulunur ve diğer proteinlerde nadiren bulunur) tanıyabilen ve bu dizideki nötr amino asit (X) ile glisin (Gly) arasındaki peptit bağını kesebilen ve bağ dokusundaki kolajeni hidrolize edebilen bir endonükleaz sınıfıdır.
Birçok proteaz, tek sarmallı ve denatüre kolajen peptitlerini hidrolize edebilir, ancak kolajenaz, üç sarmallı süper sarmal yapıya sahip doğal kolajen liflerini parçalayabilen tek proteazdır ve bağ dokularında yaygın olarak bulunur; bunların en güçlüsü, anaerobik bakteri Clostridium histolyticum tarafından salgılanan "ham" kolajenazdır.
Yeasen kolajenaz, doğal kolajeni ve retiküler lifleri parçalayabilen kolajenazın yanı sıra, bağ dokusu ve epitel dokusunun hücre dışı matrisindeki diğer proteinleri, polisakkaritleri ve lipitleri etkili bir şekilde hidrolize edebilen polisakkaridazlar, lipazlar vb. gibi bazı diğer proteazları da içeren, "kaba" bir enzim özütü olan Clostridium histolyticum'dan elde edilir, bu nedenle doku sindirimi için daha uygundur.
Şu anda piyasada bulunan bakteriyel kolajenaz, kolajenaz aktivitesindeki farklılığa göre esas olarak beş türe ayrılır: kolajenaz tip I, tip II, tip III, tip IV ve tip V.
Kolajenaz seçimi
| Ürün adı | Dış görünüş | Enzim aktivitesi | Uygulama kapsamı |
| Tip I Kolajenaz） | Kahverengi veya açık kahverengi kristal toz | ≥250 U/mg katı | Epitel, akciğer, yağ ve adrenal doku hücrelerinin izolasyonu için (kolajenaz, kazeinaz, klostridia ve tripsin) aktivite içerir. |
| Tip II Kolajenaz） | Kahverengi veya ten rengi kristal toz | ≥125 U/mg katı | Daha fazla klostridaz aktivitesi içerir ve karaciğer, kemik, tiroid, kalp ve tükürük bezi doku hücrelerinin izolasyonu için uygundur |
| Tip III Kolajenaz） | Kahverengi veya açık kahverengi kristal toz | ≥100 U/mg katı | Sindirim dokusunun birleşme kısmında etkili olan düşük proteolitik aktiviteye sahiptir ve sıklıkla memeli doku hücrelerinin ayrışması için kullanılır. |
| Tip IV Kolajenaz） | Kahverengi veya ten rengi kristal toz | ≥125 CDU/mg katı* | Düşük tripsin aktivitesi içerir ve genellikle adacık ve reseptör bütünlüğü için hücre hazırlanmasında kullanılır |
| Tip V Kolajenaz） | Kahverengi veya açık kahverengi kristal toz | ≥125 CDU/mg katı* | Pankreas adacık dokusunun izolasyonu ve bağ dokusunun tek hücrelere ayrılması için kullanılabilen en az 7 proteaz bileşeni içerir |
*CDU = kollajen sindirim birimleri
Ürün Özellikleri
- Yüksek sindirim etkinliği: Clostridium histolyticum'un ham enzim özütü dokular için yüksek sindirim etkinliğine sahiptir.
- Aktivatörlere bağımlı: Kolajenazın Ca gibi iki değerlikli katyonlar gibi aktive edici enzimlerin aktivitesine güvenmesi gerekir2+ve Çinko2+.
- İnhibitörlerden etkilenenler: Kolajenaz inhibitörleri arasında EDTA, EGTA vb. bulunur; ikincisi ise ağır metal iyonlarıdır (Hg2+, Kurşun2+, Çd2+); Ayrıca kollajenaz üzerinde inhibitör etkisi olan Sistein, Histidin, DTT, 2-merkaptoetanol, o-fenantrolin vb. gibi bazı kimyasal maddeler de bulunmaktadır.
- Güçlü girişim direnci: Kolajen, hücre kültüründe kullanılan serumdan etkilenmez.
Kullanım önlemleri
- Kullanım: Hank's, Earle's veya diğer dengeli tuz çözeltilerinde çözün, önerilen çalışma konsantrasyonu %0,05 ~%0,5'tir (ağırlık/hacim)
- Depolama sıcaklığı: 2-8°C
- Kullanım önerileri:
(1) Kolajen yapısı ve biyosentezinin incelenmesi için genellikle daha yüksek saflıktaki kollajenaz preparatları kullanılır ve başka hiçbir proteolitik aktivite kullanılmaz.
(2) Doku ayrışması için elastaz, tripsin veya papain gibi ham kolajenaz preparatları sıklıkla kullanılır.
SSS
- Deney sırasında zayıf sindirim
(1) Zayıf enzim aktivitesinden veya yetersiz kalsiyum iyonlarından kaynaklanıyorsa, kolajenaz düşük sıcaklıkta ve kuru koşullarda saklanmalı ve kolajenaz çözeltisi, alikotlandıktan sonra dondurulmalıdır.
(2) Yetersiz kalsiyum iyonlarından kaynaklanıyorsa, kolajenaz çözeltisindeki kalsiyum iyonlarının konsantrasyonu 5 mM olmalıdır.
- Kullanım sırasında hücre ölümü meydana gelir
(1) Proteaz fazlalığı varsa, proteaz temas süresi azaltılmalı veya albümin veya inaktif serum eklenmelidir.
(2) pH değişirse, bir tampon (örneğin HBSS) kullanılmalıdır; pH'ınızı sık sık kontrol edin ve yeniden ayarlayın
(3) Çok az oksijen varsa, sindirim solüsyonu steril hava ile havalandırılmalıdır.
- Deney sırasında hücreler hasar gördü
Eğer çok fazla proteazdan kaynaklanıyorsa, proteaz miktarı azaltılmalı veya albümin veya inaktif serum eklenmelidir.
Sipariş verme
| Katalog numarası | Ürün adı | Boyut |
| 40507ES60 | Kolajenaz I | 100 mg，1 gr |
| 40508ES60 | Kollajenaz II | 100 mg，1 gr |
| 40509ES60 | Kolajenaz III | 100 mg |
| 40510ES60 | Kollajenaz IV | 100 mg，1 gr |
| 40511ES60 | Kolajenaz V | 100 mg |
İlgili ürün önerileri
| Katalog numarası | Ürün adı | Boyut |
| 40123ES60 | PerfCel™l Tripsin-EDTA (%0,25), Fenol kırmızısı | 100 ml |
| 40124ES60 | PerfCell™ Tripsin-EDTA yok (0.%25), fenol kırmızısı yok | 100 ml |
| 40126ES60 | PerfCell™ Tripsin (%0,25), fenol kırmızısı | 100 ml |
| 40127ES60 | PerfCell™ Tripsin-EDTA (%0,25), Fenol kırmızısı | 100 ml |
| 40101ES25 | Tripsin 1:250(toz) | 25 gr |
| 40512ES10/60 | PerfCell™ Rekombinant Tripsin (toz) | 10 mg/100 mg |
| 20416ES60 | Rekombinant Tripsin (MS-SAFE) | 100 µg |
| 40134ES60 | PerfCell Tryzyme™Ekspres | 100 ml |
| 40135ES60 | PerfCell Tryzyme™Ekspres | 100 ml |
| 40506ES60 | DOĞRULAMA | 100 ml |
| 40104ES60/80 | Dağılma II | 100 mg/1 gr |