--Yeasen TUNEL deney kiti daha güzel floresans gösteriyor
Fluorescein-dUTP'nin TdT transferaz tarafından çentikli DNA'ya bağlanması, apoptozu tespit etmek için en yaygın yöntemlerden biridir, örneğin Roche'un In Situ Cell Death Kit'i bu prensibe dayanmaktadır. Üründeki TdT transferaz aktivitesi etiketleme verimliliğini doğrudan etkiler. Enzim üretimine dayanan Yeasen Biologicals, enzimlere dayalı yüksek kaliteli ürünler geliştirmeye çalışır ve müşterilerimizin yüksek kalite gereksinimlerini karşılamak için üç floresin (Alexa Fluor 640, Alexa Fluor 488 ve FITC) etiketli Tunel testi başlattı.
Şu anda 120'den fazla araştırma grubu bu ürünü kullanıyor ve Theranostics ve EMBO Molecular Medicine gibi yetkili dergilerde çok sayıda İngilizce makale yayınlanmıştır.
Tespit Mekanizması
Apoptozisin geç evresinde, kromozomal DNA çift zincir kırıkları veya tek zincir kırıkları çok sayıda yapışkan 3-OH ucu üretir ve deoksiribonükleotid terminal transferinin (TdT) etkisi altında, floresan/enzimle işaretlenmiş dUTP, DNA'nın 3-terminal ucuna bağlanır, böylece apoptozisin tespiti, deoksiribonükleotid terminal transferaz aracılı çentik ucu etiketlemesi olarak adlandırılan floresansın tespiti yoluyla gerçekleştirilebilir. Bu yönteme Terminal-Deoksinükleotidil Transferaz Aracılı Çentik Ucu Etiketleme (TUNEL) adı verilir ve prensip Şekil 1'de gösterilmiştir.
Şekil 1: Terminal-Deoksinükleotidil Transferaz Aracılı Nick Uç Etiketleme (TUNEL) şematik diyagramı
Ürün Özellikleri
- Geniş uygulama yelpazesi
Parafine gömülmüş doku kesitleri, dondurulmuş doku kesitleri, kültür hücreleri ve dokulardan izole edilen hücreler için kullanılabilir.
- Yüksek algılama hassasiyeti
Çok az miktarda apoptotik hücre tespit edilebilir.
- Düşük arka plan paraziti
Yüksek sinyal-gürültü oranı.
- Gözlem çok yönlülüğü
Floresan mikroskopisi gözlemi, akış-geçiş tespiti.
Veri sunumu
1、Fare preadiposit (3T3-L) Tünel testi
Şekil 2: Fare preadiposit 3T3-L apoptoz tespiti. İlk sıra negatif kontrolü, ikinci sıra ise pozitif kontrolü temsil eder. Tespit reaktifi: Kat No. 40306 TUNEL Apoptoz Tespit Kiti (FITC)
2、Parafin kesit numunelerinin tünel tespiti
Şekil 3: LY3009120 tek başına veya Vemurafenib ve Obatoclax ile birlikte kullanıldığında deri altı greft tümör modelinde tiroid kanserini etkili bir şekilde geciktirdi. IF=8.8. Örnek türü: parafine gömülmüş tümör dokusu (çıplak farelerden alınmıştır). Tespit reaktifi: Katalog No. 40307 TUNEL Apoptoz Tespit Kiti (Alexa Fluor 488).
3、Hücre taramalarının tünel tespiti
Şekil 4: Çinko sülfatın farklı alt gruplardaki endotel hücrelerinin apoptozu üzerine etkisi. Örnek türü: HUVEC (insan göbek kordonu endotel hücreleri). Tespit reaktifi: Kat No. 40308 TUNEL Apoptoz Tespit Kiti (Alexa Fluor 640)
4、Apoptozu tespit etmek için akış sitometrisi
Şekil 5: PA tedavisi yeniden programlama sırasında apoptozis oluşumunu etkili bir şekilde azaltabilir. IF=3.7. Örnek türü: iPS Hücreleri. Tespit reaktifi: Kat No. 40307 TUNEL Apoptozis Tespit Kiti (Alexa Fluor 488).
Edebiyat Alıntısı
[1] Li C, Wang Q, Gu X ve diğerleri. Gözenekli Se@SiO2 nanokompoziti, bir sıçan modelinde kemik kırığı iyileşmesini hızlandırmak için sıçan kemik iliği mezenkimal kök hücrelerinin göçünü ve osteogenik farklılaşmasını teşvik eder[J].Uluslararası Nanotıp Dergisi, 2019, 14: 3845. (EĞER 4.76)
[2] Miao T, Qian L, Yu F, ve diğerleri. Hidroksisaflor sarısının yüksek oksitlenmiş düşük yoğunluklu lipoprotein kaynaklı insan koroner arter endotel hücre yaralanmaları üzerindeki koruyucu etkileri[J]. Development, 2019, 22: 581-589.(EĞER 6.208)
[3] Wen Y, Liu G, Zhang Y, ve diğerleri. MicroRNA-205, androjen reseptörünü aşağı düzenleyerek diyabet mellitusu kaynaklı erektil disfonksiyonla ilişkilidir[J]. Hücresel ve moleküler tıp dergisi, 2019, 23(5): 3257-3270.(EĞER 4.41)
[4] Xu T, Ding W, Ao X ve diğerleri. ARC, mPTP açılmasının inhibisyonu yoluyla programlanmış nekrozu ve miyokardiyal iskemi/reperfüzyon hasarını düzenler[J]. Redox Biology, 2019, 20: 414-426.(EĞER 8.37)
[5] Li P, Hao L, Guo YY ve diğerleri. Klorokin, otofajiyi engeller ve hipoksik sıçan nöronlarında mitokondriyal disfonksiyonu ve apoptozu kötüleştirir[J]. Life Sciences, 2018, 202: 70-77.(EĞER 3.40)
[6] Chen H, Guan B, Chen X ve diğerleri. Baicalin, gecikmiş t-PA tedavisi gören iskemik felçli sıçanlarda kan-beyin bariyeri bozulmasını ve hemorajik dönüşümü hafifletir ve nörolojik sonuçları iyileştirir: ONOO-MMP-9 yolunun katılımı[J]. Translasyonel İnme Araştırması, 2018, 9(5): 515-529.(Eğer 4.87)
[7] Liu Q, Qian Y, Li P, ve diğerleri. Meme kanserinin tedavisinde 131iyodin etiketli çok işlevli bakır sülfür yüklü mikrokürelerin birleşik terapötik etkileri[J]. Acta Pharmaceutica Sinica B, 2018, 8(3): 371-380.(EĞER 6.88)
[8] Han YQ, Ming SL, Wu HT ve diğerleri. Miyostatin nakavtının, yüksek reaktif oksijen türleri üretimi yoluyla insan serviks kanseri hücrelerinde apoptozu indüklediği[J]. Redox Biology, 2018, 19: 412-428.(EĞER 8.37)
[9] Wang S, Xu Y, Weng Y, ve diğerleri. Astilbin, oksidatif stresi ve iltihabı azaltarak sisplatin kaynaklı nefrotoksisiteyi iyileştirir[J]. Gıda ve Kimyasal Toksikoloji, 2018, 114: 227-236.(EĞER 3.78)
[10] Liu L, Pang XL, Shang WJ, ve diğerleri. Aşırı ifade edilen mikroRNA-181a, CRY1'e bağlanarak TLR/NF-κB yolunun aşağı düzenlenmesi yoluyla kronik böbrek hastalığı olan sıçanlarda glomerüler sklerozu ve renal tübüler epitel hasarını azaltır[J]. Molecular Medicine, 2018, 24(1): 49.(EĞER 3.46)
[11] Li G, Yin Q, Ji H, ve diğerleri. Servikal kanser hücrelerinde CD55'e özgü ligand peptidinin taranması ve antitümör etkisi üzerine bir çalışma[J]. İlaç Tasarımı, Geliştirme ve Terapi, 2018, 12: 3899.(EĞER 3.27)
[12] Qian Y, Wang Y, Jia F, ve diğerleri. Kanser tedavisini ve apoptozis izlemeyi artırmak için AIE özelliğine sahip tümör-mikroçevre kontrollü nanomiseller[J]. Biyomalzemeler, 2019, 188: 96-106.(Eğer 9.85 ise)
[13] Li Z, Li D, Li Q, ve diğerleri. Tümör hedefli kemoterapi için yerinde düşük immünojenik albümin-konjuge edici-korona kılavuz nanopartiküller[J]. Biyomalzeme Bilimi, 2018, 6(10): 2681-2693.(EĞER 5.31)
[14] Liu Y, Zhi X, Hou W, ve diğerleri. Gelişmiş floresan/MRI ikili görüntüleme ve antitümör tedavisi için bir fotosensitizörle yüklenen Gd3+-İyon kaynaklı karbon noktalarının kendiliğinden bir araya gelme kümeleri[J]. Nanoscale, 2018, 10(40): 19052-19063.(EĞER 7.17)
[15] Liu Q, Qian Y, Li P, ve diğerleri. 131 Hepatik arter embolizasyonu yoluyla hepatik tümörleri tedavi etmek için I etiketli bakır sülfür yüklü mikro küreler[J]. Theranostics, 2018, 8(3): 785.(EĞER 8.12 )
Sıkça Sorulan Sorular
Q: Spesifik olmayan floresan işaretlemenin görünümü?
1) Doku/hücrelerin kendileri yüksek nükleaz veya polimeraz aktivitesine sahiptir ve bu da düz kas hücreleri gibi spesifik olmayan floresan etiketlemelerin ortaya çıkmasına kolayca yol açabilir. Çözüm, hücreleri veya dokuları aldıktan hemen sonra düzeltmek ve bu enzimlerin yanlış pozitiflere neden olmasını engelleyecek kadar düzeltmektir.
2) Bazı asidik fiksatifler gibi uygunsuz fiksatiflerin kullanımı yanlış pozitif sonuçlara yol açar. Taze hazırlanmış %4 nötr paraformaldehit fiksatifi önerilir.
3) TUNEL testinin reaksiyon süresi çok uzun olduğunda ve hücre veya doku yüzeyi ıslak tutulamadığında da spesifik olmayan floresans meydana gelebilir. Reaksiyon süresini kontrol etmeye dikkat edin ve TUNEL testi reaksiyon solüsyonunun numuneyi iyi kapladığından emin olun.
Q: Floresan arka planı çok yüksek mi?
1) Yüksek oranda bölünen ve çoğalan, yüksek transkripsiyon seviyelerine sahip hücrelerde bazen çekirdekte DNA kırıkları da görülür.
2) Uyarıcı ışığa uzun süre maruz kalmak yanlış pozitif sonuçlara yol açar.
Q: Düşük etiketleme verimliliği?
1) Etanol veya metanol ile fiksasyon düşük etiketleme etkinliğine yol açar.
2) Fiksasyon süresi çok uzundur, bu da çok yüksek derecede çapraz bağlanmaya neden olur. Fiksasyon süresinin azaltılması önerilir.
3) Doku kesiti çok kalın olduğundan fiksasyon etkisi yetersizdir, 10 μm içinde kontrol etmek daha iyidir.
(4) Floresan söndürme: Floresan, 10 dakikalık normal ışıkta ciddi şekilde söndürülür. Çözüm, ışık operasyonunu önlemektir.
Ürün Detayları
| Ürün Adı | Ürün No. | Şartname |
| Annexin V-FITC/7-AAD Apoptozis Tespit Kiti | 40311ES20/50/60 | 20T/50T/100T |
| 40302ES20/50/60 | 20T/50T/100T | |
| Annexin V-PE/7-AAD Apoptozis Tespit Kiti | 40310ES20/50/60 | 20T/50T/100T |
| 40303ES20/50/60 | 20T/50T/100T | |
| Annexin V-YSFluor™ 488/7-AAD Apoptozis Tespit Kiti | 40313ES60 | 100T |
| 40305ES20/50/60 | 20T/50T/100T | |
| 40304ES20/50/60 | 20T/50T/100T | |
| Annexin V-YSFluor™ 647/7-AAD Apoptozis Tespit Kiti | 40312ES20/50/60 | 20T/50T/100T |
| 40306ES20/50/60 | 20T/50T/100T | |
| 40307ES20/50/60 | 20T/50T/100T | |
| 40308ES20/50/60 | 20T/50T/100T |