İlk doğrulanmış maymun çiçeği vakası Mayıs ayının başlarında Birleşik Krallık'ta bildirildi ve salgın olmayan ülke ve bölgelerde hızla yayıldı. 21 Eylül 2022 itibarıyla dünya çapında 106 ülke/bölge doğrulandı ve toplam 63.117 vaka görüldü. 16 Eylül'de Çongçing, anakara Çin'deki ilk vaka olan ithal bir maymun çiçeği vakasını doğruladı ve bu durum sosyal endişeye yol açtı.

Şekil 1. 2022 Maymun Çiçeği Salgını Küresel Haritası (CDC'den)

1. Maymun Çiçeği Hastalığı Nedir?
2. Maymun Çiçeği Hastalığının Tarihi
3. Nasıl Yayılır
4. Belirti ve Semptomlar
5. Tespit Yöntemi
6. Ürün Eşleşmesi
7. Ürün Siparişi

1. Maymun Çiçeği Hastalığı Nedir?

Maymun çiçeği virüsü, toplam uzunluğu yaklaşık 197 kb olan çift sarmallı bir DNA virüsüdür. Poxviridae ailesinin Orthopoxvirus cinsine aittir. Virüs). Maymun çiçeği virüsünün iki dalı vardır (Batı Afrika dalı ve Kongo Havzası dalı). Bunlar arasında Batı Afrika dalının vaka ölüm oranı yaklaşık %3,6'dır ve Kongo Havzası dalının vaka ölüm oranı %10,6'ya ulaşabilir. Mayıs 2022'den bu yana endemik olmayan bölgelerde bulunan maymun çiçeği vakalarının örnekleri, dizileme analizi Batı Afrika kladının^[1].

Şekil 2. Maymun çiçeği resmi (CCDC'den alınan resim)

2. Maymun Çiçeği Hastalığının Tarihi

Maymun çiçeği, araştırma için tutulan maymun kolonilerinde iki kez çiçek benzeri bir hastalığın ortaya çıkmasıyla 1958'de keşfedildi. Hastalığın kaynağı "maymun çiçeği" olarak adlandırılmasına rağmen hala bilinmiyor. Ancak Afrika kemirgenleri ve insan olmayan primatlar (maymunlar gibi) virüsü barındırabilir ve insanları enfekte edebilir^[2].
Maymun çiçeğinin ilk insan vakası 1970'te kaydedildi. 2022 salgınından önce, maymun çiçeği birkaç Orta ve Batı Afrika ülkesindeki insanlarda bildirilmişti. Daha önce, Afrika dışındaki insanlardaki neredeyse tüm maymun çiçeği vakaları, hastalığın yaygın olarak görüldüğü ülkelere yapılan uluslararası seyahatlerle veya ithal edilen hayvanlarla bağlantılıydı. Bu vakalar birden fazla kıtada görüldü^[2].

3. Nasıl Yayılır

Hayvanlardan insanlara, insanlardan insanlara ve çevreden insanlara yayılabilir.
Artık maymun çiçeğinin insanları 3 şekilde enfekte edebileceği açıktır: Birincisi enfekte hayvanlardan insanlara. Virüs vücuda kırık deri, solunum yolu veya mukoza zarlarından (gözler, burun veya ağız) girebilir. İkincisi, cinsel ilişki, öpüşme, sarılma veya maymun çiçeğinin vücut kısımlarına dokunma ve virüs bulaşmış giysiler, yatak takımları, havlular veya sofra takımları ve enfekte olabilen diğer eşyalarla temas dahil olmak üzere insanlar arasındaki yakın temas yoluyla bulaşır. Üçüncüsü, solunum damlacıklarının bulaşmasıdır^[3].

4. Belirti ve Semptomlar

Başlıca klinik bulgular ateş, döküntü ve lenfadenopatidir.
Erken evrede en sık görülen semptomlar ateş, baş ağrısı, kas ağrıları ve şişmiş lenf düğümleridir. Döküntü, hastalığın başlangıcından 1 ila 3 gün sonra ortaya çıkar. Tipik döküntü ilk olarak yüzde görülür ve giderek uzuvlara ve diğer bölgelere yayılır. Döküntü çoğunlukla santrifüjlüdür., Yüz ve uzuvlardaki döküntüler gövdeden daha yaygındır, döküntüler avuç içlerinde ve ayak tabanlarında da görülebilir ve döküntülerin sayısı birkaç taneden binlercesine kadar değişebilir; ayrıca ağız mukozası, sindirim sistemi, genital organlar, konjonktiva ve korneayı da tutabilir.
Semptomlar genellikle 14 ila 21 gün sürer ve hastalar bunları genellikle kendi başlarına çözerler. Kabuklar düştükten sonra eritem veya hiperpigmentasyon veya hatta yara izleri kalabilir. Kabuk düşene ve altında yeni bir deri tabakası oluşana kadar kabuğun bulaşıcı kaldığını belirtmekte fayda var^[3].

5. Tespit Yöntemi

Maymun çiçeği salgınını etkili bir şekilde önlemek ve kontrol altına almak ve virüsün ithal edilmesini ve yayılmasını önlemek için küresel IVD şirketleri aktif bir şekilde yanıt verdi. IVD tespit reaktifi üretim hammaddelerinin tedarikçisi olarak ve reaktif çözümleri, YEASEN maymun çiçeği virüsünü etkili bir şekilde tespit etmeye yardımcı olmak için eksiksiz bir çözüm sunar. Nükleik asit ekstraksiyonundan reaktif bileşenlerine (enzim reaktifleri ve psödovirüsler) ve yarı mamul kitlere (primer probları, enzim reaktifleri ve plazmid kontrolleri) kadar YEASEN size istikrarlı bir şekilde tedarik sağlayabilir.

Şekil 3. Virüs tespit yöntemi

5.1 Yöntem Avantajı

• Verimli ve rahat kullanım: Zahmetli işlemler olmadan, tek adımda eklemeyle tüm bileşenleri içeren bir kit seti
• Yüksek tespit hassasiyeti—Genetiği değiştirilmiş antikor yöntemi sıcak başlatmalı Taq enzimi, 1 kopya/reaksiyon da tespit edilebilir
• Güçlü reaktif kararlılığı—1 hafta boyunca 37℃'de saklayın, tekrarlanan dondurma ve çözme işlemlerinden sonra stabil performans
• UDG Kirliliğinin Önlenmesi—Aerosol kontaminasyonu riskini etkin bir şekilde önlemek için sisteme dUTP/UDG sistemi eklenmiştir.
• Birden fazla platforma uygulanabilir—Bio-Rad CFX96, ABI Q5 ve Slan için uygundur

5.2 Ürün Eşleşmesi

• Nükleik asit ekstraksiyon reaktifleri: MolPure™ Manyetik Çubuk Viral DNA/RNA Kiti (Kat#18300ES)
• Maymun çiçeği hastalığının tespit reaktifi: Maymun Çiçeği Virüsü Gerçek Zamanlı qPCR Kiti(Kedi#13862ES/Kedi#13863ES)
• Monkeypox psödovirüsü: Monkeypox virüsü Pseudovirus(Cat#12099ES/Cat#12100ES)

6. Önerilen Ürünler

6.1 Maymun Çiçeği Virüsü Gerçek Zamanlı qPCR Kiti (Kat#13862ES)

Ürün Avantajları:
Verimli ve rahat kullanım
Yüksek duyarlılık ve iyi özgüllük
Süper stabilite
İyi tekrarlanabilirlik

6.1.1 Vaka Gösterimi:

• 37℃ için Süper Termal Kararlılık

MPXV, Cat#13862ES'i 7 gün boyunca 37℃'ye yerleştirerek çoğaltıldı. Sonuçlar, Ct değerinin ve floresan değerinin 37℃'de 7 gün boyunca önemli ölçüde etkilenmediğini ve termal kararlılığın güçlü olduğunu gösterdi.

Şekil 4. Yeasen (Cat#13862ES) 37℃ hızlandırılmış 7 günlük kararlılık doğrulaması

• Süper Donma-Çözülme Kararlılığı

MPXV, Cat#13862ES'nin -20℃'de sırasıyla 10 kez, 20 kez ve 50 kez dondurulması ve çözülmesiyle çoğaltıldı.Sonuçlar, -20℃’de 10 kez, 20 kez ve 50 kez dondurma ve çözme işlemlerinin Ct değeri ve floresans değeri üzerinde önemli bir etkisinin olmadığını, dondurma ve çözme kararlılığının güçlü olduğunu göstermiştir.

Şekil 5. Yeasen(Cat#13862ES)-20℃ donma-çözülme kararlılığının doğrulanması

• Ultra yüksek hassasiyet, 1 Kopya/μL de tespit edilebilir

Yeasen maymun çiçeği ürünü (Cat#13862ESES) kullanılarak, 1000 kopya/μL, 100 kopya/μL, 10 kopya/μL, 1 kopya/μL ve negatif boş (NTC) MPXV'yi tespit etmek için kullanıldı. Tek bir kopyanın da tespit edilebileceği görülebilir (Ct değeri yaklaşık 38'dir) ve 48 kuyulu NTC testi, stabil bir temel çizgi, negatif NTC tepe noktaları ve kuyruklanma fenomeni olmadan, yüksek duyarlılık ve yüksek özgüllükle tekrarlandı.

Şekil 6. MPXV hassasiyet tespiti

Şekil 7. MPXV özgüllüğünün tespiti

• Reaktifler Kararlı ve Tekrarlanabilirdir

Yeasen maymun çiçeği tespit kiti (Cat#13862ESES), düşük, orta ve yüksek konsantrasyonlarda pozitif örnekler için 10 tekrarlı test gerçekleştirmek üzere seçildi. Sonuçlar, FAM kanalındaki pozitif örneklerin CV'sinin %2'den az veya ona eşit olduğunu ve boş kontrolün tepe noktası ve kuyruklanma fenomeni olmadığını gösterdi. , iyi tekrarlanabilirlik.

Şekil 8. Tekrarlanabilirlik Testi

6.2 Maymun Çiçeği Virüsü Gerçek Zamanlı qPCR Kiti (UDG Plus)(Kedi#13863ES)

Ürün Avantajları:

⑴ Verimli ve rahat kullanım
⑵ Yüksek duyarlılık ve iyi özgüllük
⑶ Süper stabilite
⑷ İyi tekrarlanabilirlik
⑸ UDG Kirlilik Önleme

6.2.1 Vaka Gösterimi:

• 37℃ için Süper Termal Kararlılık

MPXV, Cat#13863ES'i sırasıyla 7 gün ve 14 gün boyunca 37℃'ye yerleştirerek çoğaltıldı. Sonuçlar, 37℃'de 7 gün ve 14 gün sonra Ct değeri ve floresan değeri üzerinde önemli bir etki olmadığını ve termal kararlılığın güçlü olduğunu göstermektedir.

Şekil 9. Yeasen(Cat#13863ES) 37℃ hızlandırılmış 7 günlük, 14 günlük kararlılık doğrulaması

• Süper Donma-Çözülme Kararlılığı

Cat#13863ES, MPXV'yi yükseltmek için 50 kez -20℃'de donduruldu ve çözüldü. Sonuçlar, 50 kez -20℃'de dondurulup çözülmesinin Ct değeri ve floresan değeri üzerinde önemli bir etkisi olmadığını ve donma ve çözülme kararlılığının güçlü olduğunu gösterdi.

Şekil 10. Yeasen(Cat#13863ES) -20℃ donma-çözülme kararlılığının doğrulanması

• Yüksek Duyarlılık ve Özgüllük

MPXV'nin 5 kopyası/μL ve negatif boş (NTC), Yeasen maymun çiçeği ürünü (Cat#13863ESES) kullanılarak test edildi. Sonuçlar, başlangıç ​​seviyesinin stabil olduğunu, FAM tespit oranının %100 olduğunu, minimum tespit sınırının 5 kopya/μL olduğunu ve NTC'nin 48 kuyulu tekrarlanan testi sırasında, FAM ve VIC kanallarının başlangıç ​​seviyesinin stabil olduğunu, NTC negatif zirvesinin herhangi bir kuyruklanma fenomenine sahip olmadığını ve yüksek Duyarlılığa ve yüksek özgüllüğe sahip olduğunu gösterdi.

Şekil 11.MPXV Hassasiyet tespiti

Şekil 12. MPXV özgüllüğünün tespiti

• Reaktiflerin İyi Doğrusallığı

Pozitif şablon 1×105 kopya/μL konsantrasyonundan 10 kat seyreltildi ve tespiti iki kez tekrarlamak için Yeasen qPCR maymun çiçeği kiti (Cat#13863ES) kullanıldı. Başlangıç ​​kopya sayısının logaritması apsistir ve Ct değeri ordinattır. Standart eğri oluşturuldu ve sonuçlar maymun çiçeği geninin FAM kanalının 10～1×105 kopya/μL doğrusal aralığına sahip olduğunu ve R2>0,99 olduğunu gösterdi; bu da iyi bir doğrusal ilişkiye sahipti.

Şekil 13. Doğrusallık Testi

• Kararlı ve Tekrarlanabilir Reaktifler

Yeasen qPCR maymun çiçeği kiti (Kat#13863ES), düşük, orta ve yüksek konsantrasyonlarda pozitif için 10 tekrarlı test ve negatif kontrol (NC) ve boş kontrol (NTC) için 20 tekrarlı test gerçekleştirmek üzere seçildi. Sonuçlar şunları göstermektedir: FAM kanalı Pozitif örneklerin CV'si %3'ten azdır ve negatif kontrol ve boş kontrolde tepe noktası ve kuyruklanma olayı yoktur; VIC kanalı NC'nin Ct değerlerinin hepsi 35'ten azdır, CV %0,3'ten azdır ve NTC'de tepe noktası ve kuyruklanma olayı yoktur ve tekrarlanabilirlik iyidir.

Şekil 14. Tekrarlanabilirlik Testi (FAM)

Şekil 15. Tekrarlanabilirlik Testi (VIC)

7. Ürün Siparişi

2014 yılında kurulan Yeasen Biotechnology (Shanghai) Co., Ltd., alet enzim hammaddeleri ve antijen antikorlarının Ar-Ge ve üretimiyle uğraşan bir yüksek teknoloji kuruluşudur. Ürünleri arasında moleküler tanı enzimleri, proteinler ve ilaçlarda, gıda güvenliği testlerinde, üremede, adalette ve diğer endüstrilerde kullanılan antikorlar yer almaktadır. Yaşam bilimleri alanındaki müşterilere yüksek kaliteli ürünler ve hizmetler sunmaya kararlıyız. Monkeypox Virüsü için ürün satın alma yönergeleri aşağıdaki gibidir:

Tablo 1.İlgili ürünler

Referanslar

[1] Çin Hastalık Kontrol ve Önleme Merkezi: Maymun Çiçeği Sağlık İpuçları
[2] CDC:Maymun Çiçeği Hakkında | Maymun Çiçeği | Poksvirüs | CDC
[3] Yulin Akşam Haberleri: Çin anakarasındaki ilk maymun çiçeği vakasının kaynağı tespit edildi! Guangxi Hastalık Kontrolü Acil Durum Hatırlatması