Ürün Uygulama Senaryoları

1. Biyolojiklerdeki Kalan Nükleik Asitlerin Giderilmesi: Virüsler, aşılar ve proteinler gibi biyolojiklerin üretimi sırasında, kalan nükleik asitleri parçalamak için UltraNükleaz eklenebilir. Bu adım yalnızca virüslerin verimini artırmakla kalmaz, aynı zamanda kalan nükleik asitlerin içeriğini de önemli ölçüde azaltır, böylece ilaçların güvenliği ve etkinliği sağlanır.
2. Viskozite Azalması: Nükleik asitlerin parçalanmasıyla hücre lizatlarının viskozitesi azalır, bu da virüsler, AAV vektörleri ve inklüzyon cisimleri gibi hücre kaynaklı parçacıkların saflaştırılması sırasında filtrasyon/ultrafiltrasyon işlemlerini kolaylaştırır.
3. Gelişmiş Çözünürlük ve Kurtarma: ELISA, iki boyutlu elektroforez ve immünoblotlama analizlerinde çözünürlüğü ve kurtarmayı iyileştirir.
4. Hücre Agregasyonunun Önlenmesi: UltraNuclease, insan periferik kan mononükleer hücrelerinin (PBMC) agregasyonunu etkili bir şekilde önleyebilir.

Farklı reaksiyon koşullarının enzim aktivitesi üzerindeki etkisi

UltraNuclease için optimum çalışma koşullarını araştırmak amacıyla çeşitli tamponlama sistemlerinin enzim aktivitesi üzerindeki etkilerini inceledik.

Rekabet eden ürünlerin karşılaştırmalı analizi (A şirketinden)

UltraNuclease'in performansı Şirket A ile uyumludur ve ikame etkisi sağlayabilir.

Kalite kontrol standardı GMP üretim standardına uygundur

Algılama öğeleri	Kalite standartları	Tespit yöntemi
Enzim aktivitesi	250-300 U/uL	Üniversal alt tabaka yöntemi
Belirli aktivite	≥1.5×106 U/mg	Üniversal alt tabaka yöntemi
Protein saflığı	≥%99	SDS-SAYFA
Proteaz	Gereksinimleri karşılar	Üniversal alt tabaka yöntemi
Bakteriyel endotoksin	Gereksinimleri karşılar	Jel yöntemi
Konak proteini	Negatif	ELISA yöntemi
Ev sahibi DNA'sı	Negatif	qPCR yöntemi
Steril test	Steril büyüme	Genel Kural 1101
Patojen tespiti	Negatif (tespit edilmedi)	Dahili yönteme bakın
Mikoplazma testi	Negatif (tespit edilmedi)	Dahili yönteme bakın
Ağır metal testi	Gereksinimleri karşılar	Genel Kural 0821

UltraNuclease kullanımına uyum sağlamak için Yeasen, UltraNuclease için bağımsız olarak, kalıntı enzimi etkili bir şekilde tespit edebilen ve riskleri azaltabilen özel bir tespit kiti de geliştirdi. Yeasen UltraNuclease Kalıntı Tespit Kiti, 2020 Çin Farmakopesi <9101> Analitik Yöntem Doğrulama Kılavuzları referans alınarak geliştirildi ve çok parametreli testler için temel gereklilikleri (doğrusal aralık, özgüllük, doğruluk, kesinlik, duyarlılık, hızlandırılmış kararlılık, vb.) sıkı bir şekilde takip eder.

Kalıntı UltraNükleaz Tespiti

Normal saflaştırma adımlarında, UltraNuclease kolayca safsızlıklar olarak uzaklaştırılır. Omnipotent UltraNuclease'ın belirli kalıntı miktarını tespit etmek için, endüstride genellikle standart bir ürün olarak kullanılır ve eşleşen bir ELISA kiti geliştirilir.

UCF.ME® UltraNükleaz Yeasen tarafından bağımsız olarak geliştirilen ELISA Kiti, numunelerdeki UltraNuclease kalıntı miktarını doğru bir şekilde tespit edebilen çift antikor sandviç enzim bağlı immünoassay (sandviç ELISA) prensibini benimser. Kit doğrusallık, tekrarlanabilirlik, geri kazanım oranı ve özgüllük açısından stabildir.

Yeasen UltraNuclease ELISA Kitinin Prensibi (İki bölgeli immünoenzimetrik analiz)

Ürün Özellikleri:

Mevzuata Uygunluk: Mevzuata uygun gerekliliklere göre tam olarak doğrulanmıştır, doğrulama raporları mevcuttur; Kalite Güvencesi: Kit için tüm hammaddeler bağımsız olarak geliştirilir ve kalite kontrolü sağlanır;

Yüksek Hassasiyet: Kantitatif sınır 23 kadar düşüktür.5 pg/mL;

Yüksek Hassasiyet: Yüksek parti içi tekrarlanabilirlik ve düşük partiler arası değişkenlik;

Güçlü Özgüllük: Diğer tasarlanmış hücre proteinleriyle çapraz reaksiyon yok

Performans parametreleri:

Ürün parametreleri	içerik
Deneme zamanı	3,5 saat
Deneme prensibi	İki bölgeli immünoenzimetrik deney
Sinyal amplifikasyonu	Biyotin-streptavidin sistemi
Algılama dalga boyu	450nm ve 630nm
Hassasiyet	23,5pg/mL
Algılama aralığı	0,047~3 ng/mL
Algılama nesnesi	UltraNükleaz
Uygulanabilir enstrüman	Moleküler Aygıtlar: M ve i Serisi
Başvuru	Hücre ve gen terapisi ve rekombinant adeno-ilişkili virüs aşılarının saflaştırma süreçlerinde kalan UltraNükleazın tespiti

Ürün verileri:

Reaktif kiti standart eğrisi:

Gerçek numune kurtarma deneyi:

UltraNuclease, 5 μg/mL hücre lizis solüsyonlarına (HEK293, E.coli, CHO ve Vero) bağımsız olarak 1,5 ng/mL'lik son bir spike konsantrasyonuyla eklendi. Farklı hücre örneklerindeki doğruluk, diğer satıcılardan daha mükemmel olduğunu gösterdi.

Özgüllük gösterimi

Sonuç: Test kiti çapraz reaksiyona neden olmadan yüksek özgüllüğe sahiptir; çiftler arası karşılaştırmalar, “*” Negatif örneklemden anlamlı fark; “NS” Negatif örneklemde anlamlı bir fark yok.

Kesinlik:

Tekrarlanabilirlik:

Konsantrasyon ng/mL	Aynı plakada 6 adet çoğaltılmış tarih						CV değeri
3	2.412	2.390	2.323	2.367	2.476	2.291	%2,53
1.5	1.780	1.883	1.884	1.908	1.876	1.883	%2,19
0,75	1.123	1.215	1.166	1.183	1.140	1.109	3.12%
0,375	0,691	0,706	0,708	0,722	0.722	0,679	%2,21
0,1875	0,449	0,462	0,453	0,460	0,447	0,433	%2,13
0,094	0,306	0,308	0,304	0,311	0,295	0,302	%1,65
0,047	0,242	0,241	0,240	0,241	0,256	0,240	2.37%
0	0,183	0,192	0,189	0,187	0,189	0,189	1.43%

Sonuç: Standart eğrideki her konsantrasyonda 6 tekrar test edildi ve tüm CV% değerleri %5'in altında bulundu.

Orta düzey hassasiyet:

Orta düzey hassasiyet
Örnek konsantrasyonu	1,5 ng/mL	0,375 ng/mL	0,094 ng/mL
Analist 1	1.388	0,382	0,079
Analist 2	1.458	0,363	0,068
Analist 3	1.318	0,37	0,063
Ortalama	1.388	0,372	0,07
SD	0,070	0,010	0,008
CV değeri	5.04%	%2,59	11.69%

UCF.ME™ UltraNuclease ELISA deneyini 3 analist yürüttü ve CV% %15'ten düşüktü

Ürün Bilgisi:

Ürün Adı	Ürün sayı	Ürün Özellikleri
UCF.ME®UltraNuclease GMP sınıfı (Benzonaz)	20157ES25/50/60/80/90	25KU/50KU/100KU/1MU/5MU
UÇF.ME® UltraNükleaz ELISA Kiti	36701ES59	96T

Diğer ilgili ürünler

Ürün Adı	Ürün sayı	Ürün Özellikleri
Tuz Aktif UltraNükleaz GMP sınıfı	20159ES25/50/60/80/90	25KU/50KU/100KU/1MU/5MU
Tuz Aktif UltraNükleaz ELISA kiti	36703ES96	96T