Ürün Uygulama Senaryoları

1. Biyolojiklerdeki Kalan Nükleik Asitlerin Giderilmesi: Virüsler, aşılar ve proteinler gibi biyolojiklerin üretimi sırasında, kalan nükleik asitleri parçalamak için UltraNuclease eklenebilir. Bu adım yalnızca virüslerin verimini artırmakla kalmaz, aynı zamanda kalan nükleik asitlerin içeriğini de önemli ölçüde azaltır, böylece ilaçların güvenliği ve etkinliği sağlanır.
2. Viskozite Azalması: Nükleik asitlerin parçalanmasıyla hücre lizatlarının viskozitesi azalır, bu da virüsler, AAV vektörleri ve inklüzyon cisimleri gibi hücre kaynaklı parçacıkların saflaştırılması sırasında filtrasyon/ultrafiltrasyon işlemlerini kolaylaştırır.
3. Gelişmiş Çözünürlük ve Kurtarma: ELISA, iki boyutlu elektroforez ve immünoblotlama analizlerinde çözünürlüğü ve kurtarmayı iyileştirir.
4. Hücre Agregasyonunun Önlenmesi: UltraNuclease, insan periferik kan mononükleer hücrelerinin (PBMC) agregasyonunu etkili bir şekilde önleyebilir.

Ürün performans testi

Yüksek tuzlu ortamın enzim aktivitesi (Na+) üzerine etkisi

Salt Active UltraNuclease kullanımına uyum sağlamak için Yeasen ayrıca bağımsız olarak özel bir tespit kiti geliştirdi Tuz Aktif UltraNükleaz, enzim kalıntılarını etkili bir şekilde tespit edebilen ve riskleri azaltabilen. Salt Active UltraNuclease ELISA Kiti, 2020 Çin Farmakopesi'nin <9101> analitik yöntem doğrulama yönergelerine göre geliştirilmiş ve üretilmiştir ve çok parametreli testler için temel gerekliliklere (doğrusal aralık, özgüllük, doğruluk, hassasiyet, duyarlılık, hızlandırılmış stabilite vb.) sıkı sıkıya bağlıdır.

Bu amaçla, Yeasen Biotech, Tuz Aktif UltraNükleaz'ın tespiti için bir ELISA kiti geliştirdi. Kit, kalıntı miktarını tespit etmek için çift antikor sandviç enzim bağlı immünosorbent testi (ELISA) ilkesini kullanır Salt Active UltraNuclease. Salt Active UltraNuclease'in standart ve test örnekleri, anti-Salt Active UltraNuclease antikoru (36703-A) ile önceden kaplanmış enzim kaplı plakaya eklenir. Daha sonra, seyreltilmiş biotin etiketli nükleaz tespit antikoru (36703-C) eklenir, ardından Streptavidin-HRP (SA-HRP) (36703-D) eklenir. Bu, bir antikor + antijen + antikor-biotin + SA-HRP kompleksi oluşturur. Plakayı yıkadıktan sonra, renk gelişimi için TMB substrat çözeltisi (36703-H) eklenir. HRP enziminin katalizinde, TMB renksizden maviye döner ve son olarak durdurma çözeltisinin (36703-I) etkisi altında sarıya döner. Sarı rengin yoğunluğu, örnekte tespit edilen yüksek tuza dayanıklı evrensel nükleaz miktarıyla doğru orantılıdır.

Salt Active UltraNuclease ELISA Kiti kullanılarak kalıntı Salt Active UltraNuclease tespitinin deneysel süreci.

UltraNuclease ve Salt Active UltraNuclease ELISA kitinin özellikleri:

Mevzuata Uygunluk: Yasal gerekliliklere uygun olarak tam olarak doğrulanmış olup, doğrulama raporları mevcuttur;

Kalite Güvencesi: Kitin tüm hammaddeleri bağımsız olarak geliştirilir ve böylece kontrol edilebilir kalite sağlanır;

Yüksek Hassasiyet: Kantitatif sınır 23 pg/mL kadar düşüktür;

Yüksek Hassasiyet: Yüksek parti içi tekrarlanabilirlik ve düşük partiler arası değişkenlik;

Güçlü Spesifiklik: Diğer tasarlanmış hücre proteinleriyle çapraz reaksiyon yok

Performans parametreleri

Ürün parametreleri	içerik
Deneme zamanı	3,5 saat
Deneme prensibi	İki bölgeli immünoenzimetrik deney
Sinyal amplifikasyonu	Biyotin-streptavidin sistemi
Algılama dalga boyu	450nm ve 630nm
Hassasiyet	0,024ng/mL
Algılama aralığı	0.047 ng/mL~3 ng/mL
Algılama nesnesi	Tuz Aktif UltraNükleaz
Uygulanabilir enstrüman	Moleküler Aygıtlar: M ve i Serisi
Başvuru	Hücre ve gen terapisi ve rekombinant adeno-ilişkili virüs aşılarının saflaştırma süreçlerinde kalıntı Nükleazın tespiti

Ürün verileri:

Reaktif kiti standart eğrisi:

Özgüllük

Salt Active UltraNuclease antikoru ile kitteki yedi protein arasındaki çapraz reaksiyon, yedi işlemde eklenen proteinleri tespit etmek için bu kiti kullanarak değerlendirildi. Pozitif bir kontrol (PC-0,047 ng/mL) ve negatif bir kontrol (NC-0 ng/mL) kuruldu.

Sonuçlar, 7 işlemde eklenen proteinin negatif kontrole (NC-0 ng/mL) yakın olduğunu, tespit konsantrasyonunun bu kitin kantitasyon sınırından (0,047 ng/mL) düşük olduğunu ve çapraz reaksiyon oluşmadığını gösterdi. gözlemlendi.

Sturna balığı Kurtarma oranı:

Müşterinin spike kurtarma deneyi için sağladığı iki numuneye eşit oranlarda üç konsantrasyon standardı (yani, Std1 3 ng/mL, Std3 0,75 ng/mL ve Std5 0,188 ng/mL) ekleyin. Sonuçlar, spike kurtarma oranlarının %80 ile %120 arasında olduğunu göstermektedir. Spike kurtarma oranı % = (spike eklenmiş numunenin ölçülen değeri - spike eklenmemiş numunenin ölçülen değeri) / teorik değer (eklenen standart miktarı) * %100.

Örnek adı	Tuz Aktif UltraNükleazın test konsantrasyonu (ng/mL)	Standart miktarı (ng/mL)	Test sonucu (ng/mL)	Spike kurtarma oranı (%)
TS1	0,04	3	1.71	114,00%
		0,75	0,347	%92,53
		0,188	0,085	%90,43
TS2	0,08	3	1.772	118.13%
		0,75	0,405	108,00%
		0,188	0,104	110.64%

Kesinlik

1) Tekrarlanabilirlik

Tekrarlanan deneyler için yüksek, orta ve düşük konsantrasyonlu üç Salt Active UltraNuclease standart ürünü seçildi. Aynı deneyde, her konsantrasyondaki numuneler 10 kez test edildi ve CV%< 10%.

Toplu fark
Teorik konsantrasyon (ng/mL)	Tekrar sayısı	Ortalama (ng/mL)	Varyasyon Katsayısı CV (%)
1.5	10	1.444	2,97%
0,188	10	0,196	%2,27
0,047	10	0,051	%2,56

2) Orta Düzey Hassasiyet

3 deney için farklı kit grupları kullanıldı, her deney yüksek, orta ve düşük olmak üzere 3 konsantrasyonla gerçekleştirildi ve her konsantrasyon 10 kez tekrarlandı. Her konsantrasyon noktasından toplam 30 veri elde edildi ve her konsantrasyonun CV%'si %15'ten azdı.

Parti farkı
Teorik konsantrasyon (ng/mL)	Deney sayısı	Ortalama (ng/mL)	Varyasyon Katsayısı CV (%)
1.5	3	1.423	5.70%
0,188	3	0,212	5.59%
0,047	3	0,059	6.82%

Ürün Bilgileri

Ürün Adı	Ürün sayı	Ürün Özellikleri
Tuz Aktif UltraNükleaz GMP sınıfı	20159ES25/50/60/80/90	25KU/50KU/100KU/1MU/5MU
Tuz Aktif UltraNükleaz ELISA kiti	36703ES96	96T

Diğer ilgili ürünler

Ürün Adı	Ürün numarası	Ürün Özellikleri
UCF.ME®UltraNuclease GMP sınıfı (Benzonaz)	20157ES25/50/60/80/90	25KU/50KU/100KU/1MU/5MU
UCF.ME® UltraNükleaz ELISA Kiti	36701ES59	96T