Tanım
Hifair™ Multiplex Tek Adımlı RT-qPCR Prob Kiti (Udg Artı) şablon olarak RNA'ya dayalı bir multipleks kantitatif PCR kitidir. Deney sürecinde ters transkripsiyon ve kantitatif PCR aynı tüpte gerçekleştirildiğinden deneysel işlem basitleştirilmiş ve kontaminasyon riski azaltılmıştır.
Bu kitte, ilk iplik cDNA'sı ısıya dayanıklı Hifair ile verimli bir şekilde sentezlendiT.M. V Ters Transkriptaz ve UNICON tarafından kantitatif olarak çoğaltıldı™ HotStart Taq DNA Polimerazı. Kit esas olarak optimize edilmiş MP tamponu, enzim karışımı vb. içerir. Tampon çözeltisi zaten Mg içerir2+ ve dNTP. Ek olarak, spesifik olmayan PCR amplifikasyonunu etkili bir şekilde engelleyebilen ve çoklu qPCR reaksiyonlarının amplifikasyon verimliliğini artırabilen faktörler eklenir, bu da amplifikasyon verimliliğini garanti edebilir ve çoklu amplifikasyon reaksiyonlarına kadar gerçekleştirilebilir. dUTP/UDG sistemi, aerosol kontaminasyonu riskini etkili bir şekilde önlemek için eklendi.
Özellikler
1. Gçok yönlülük: Patojenik mikroorganizmaların, insan genomlarının, bitkilerin ve diğer türlerin nükleik asitlerinin qPCR amplifikasyonu ve tespiti için uygundur.
2. Yüksek hassasiyet: Dikkatlice optimize edilmiş tampon sistemi, düşük konsantrasyonlu şablonların tespit hassasiyetini 250 kopya/mL'ye kadar artırır.
3. dUP/UDG sistemi: dUTP/Isıya duyarlı UDG kirlilik önleme sistemi, ürünlerin aerosol kirliliğini etkili bir şekilde azaltmak, yanlış pozitifleri azaltmak ve otantik sonuçları garantilemek için tanıtıldı.
4. Destekinmek hızlı program: hızlı 40 dakikalık programla uyumludur.
5. Süper stabilite: istikrarlıve 37℃'de 14 gün boyunca bekletildi, 10 kez dondurulup çözüldü.
Bileşenler
Bileşenler | İsim | 16630ES60 (100 TL) | 16630ES80 (1000 TL) | 16630ES92 (10000 TL) |
16630-A | 5×Hifair MP Tamponu | 500 μL | 5 ml | 50 ml |
16630-B | Hifair Enzim Karışım | 100 μL | 1 ml | 10 ml |
16630-C | GC-Geliştirici | 500 μL | 5 ml | 50 ml |
Not: 1) 5×HifairT.M. MP Arabellek kısaltmasıdır HifairT.M. V Multiplex Tek Adımlı RT-qPCR Prob Tamponu, dNTP'ler, dUTP, Mg'yi içerir2+, dengeleyiciler, güçlendiriciler ve daha fazlası.
2) Hifair Enzim Karışımı esas olarak içerir ısıya dayanıklı HifairT.M. V ters transkriptaz, UNICONT.M. HotStart Taq DNA polimerleri ve UD Gazı.
3) GC geliştiricisi isteğe bağlıdır. Lütfen GC geliştiricisinin ücretsiz versiyonunu bulun: Kedi: 16901ES.
4) 16630-A ve 16630-B, 16901-A ve 16630-B'ye eşdeğerdir. 16901-B sırasıyla.
Özellikler
PCR yöntemi | Tek adımlı RT-qPCR |
Örnek türü | RNA |
Depolamak
TO ürün gerekir olmak saklandı de -25°C~-15°C için 1 yıl.
Rakamlar
Şekil 1. Yüksek tespit oranı
Talimatlar
1. Tepki Kompozisyon
Bileşenler | Hacim ((milimetre) | Son Konsantrasyon |
5×Hifair™ MP Arabellek | 5 | 1 × |
Hifair Enzim Karışımı | 1 | - |
GC-Geliştirici | 0-5 | - |
Primer Karışımı (10 μM) | 0,4 her biri | 0,16 μM |
Prob Karışımı (10 μM) | 0,2 her biri | 0,08 μM |
RNA | 1-5 | - |
RNazsız H2O | 25'e kadar | - |
Not:Kullanmadan önce iyice karıştırdığınızdan emin olun, şiddetli titreşimlerden kaynaklanan aşırı kabarcıklardan kaçının.
a) Primer konsantrasyonu: Astar multipleks primer içeren karışım, Duruma bağlı olarak optimum primer konsantrasyonu 0,1 ile 1,0 μM arasında olabilir.
b) Prob konsantrasyonu: Multipleks prob etiketleme farkı floresan grubunu içeren prob karışımında, duruma bağlı olarak optimum prob konsantrasyonu 0,05 ile 0,05 arasında olabilir.5 μM.
c) Şablon seyreltmesi: qPCR oldukça hassastır ve şablonun seyreltilmesi önerilir. Kontrol Ct değeri 20 ile 35 arasında uygundur.
D) Sistem hazırlığı: Filtre elemanlı un başlığı. Çapraz kontaminasyon ve aerosol kontaminasyonundan kaçının.
2. Optimize Edilmiş Döngü Protokolü
Tepki aşaması | Sıcaklık | Zaman | Döngü | |
1 | Ters transkripsiyon | 50°CA | 15 dakika | 1 |
2 | İlk denatürasyon | 95°C | 5 dk | 1 |
3 | Amplifikasyon reaksiyonu | 95°C | 15 saniye | 45 döngü |
60°CB | 30 saniyeC |
Not:a) Sever transkripsiyon: Sıcaklık 42'yi seçebilir°C veya 50°C 10-15 dakika boyunca.
b) Amplifikasyon reaksiyonu: Tasarlanan primerlerin Tm değerine göre sıcaklık ayarlanır.
C) Floresan sinyal edinimi: Lütfen deneysel prosedürü cihaz kılavuzunda belirtilen gereksinimlere göre ayarlayın.
Ödeme ve Güvenlik
Ödeme bilgileriniz güvenli bir şekilde işlenir. Kredi kartı ayrıntılarını saklamıyoruz veya kredi kartı bilgilerinize erişimimiz yok.
Sorgu
Ayrıca sevebilirsiniz
SSS
Ürün yalnızca araştırma amaçlıdır ve insanlarda veya hayvanlarda terapötik veya teşhis amaçlı kullanım için tasarlanmamıştır. Ürünler ve içerikler, Yeasen Biotechnology'nin sahip olduğu patentler, ticari markalar ve telif haklarıyla korunmaktadır. Ticari marka sembolleri, tüm bölgelerde tescilli olmayıp, menşe ülkesini gösterir.
Bazı uygulamalar üçüncü tarafların ek fikri mülkiyet haklarına ihtiyaç duyabilir.
Yeasen, araştırmalarımızın güvenlik ve etik standartları sağlarken kritik soruları ele alması gerektiğine inanarak etik bilime kendini adamıştır.