巨噬细胞是免疫系统中的重要细胞,在组织中发挥多种作用,包括病原体清除、组织修复和免疫调节。在某些病理条件下,如慢性炎症、自身免疫性疾病或肿瘤发展,巨噬细胞的异常激活或功能障碍可能对机体产生不利影响。氯膦酸盐脂质体是一类专门消耗或清除巨噬细胞的药物或化合物。氯膦酸盐脂质体是目前最成熟、最方便、最经济的巨噬细胞清除工具,可有效清除动物多种组织和部位的巨噬细胞,包括肝脏、脾脏、肺脏和血液,是目前应用最广泛的巨噬细胞清除方法。
不同组织的做法(仅供参考)
器官/巨噬细胞 | 剂量(20-25g/只) |
脾脏/红髓巨噬细胞 | 单剂量:200 µl/小鼠(IV 或 IP)。 |
肝脏/Kuffer 细胞 | 单剂量:200 µl/小鼠(IV 或 IP)。 |
肺/肺泡巨噬细胞 | 静脉注射(150-200 µl)与气管内或鼻腔内注射(50 µl)相结合可获得最佳效果。 |
淋巴结 | 注射(100-200 µl)/小鼠,具体给药方案可参见文献。 |
大脑/小胶质细胞 | 脑室内进入脑脊液,10 µl/小鼠,50 µl/大鼠。 |
血液/单核细胞 | 150-200 µl/小鼠(IV),24 小时内达到最大消耗率,但 1-7 天内的最大消耗率取决于菌株。 |
常问问题
问题 1:接受氯膦酸盐脂质体治疗后我应该做什么?
A:收到氯膦酸盐脂质体后,如不能立即使用,需放置于4℃冰箱内。严禁冷冻!以原液使用,不得稀释。脂质体易产生沉淀,建议使用前轻轻混匀。另外,4℃氯膦酸盐脂质体不能立即使用,需恢复至室温后再注射。
问题 2:如何从小瓶中转移脂质体?
答:从小瓶中转移脂质体的最佳方法是使用无菌针头注射器。这样,小瓶中剩余的脂质体悬浮液将保持密封和清洁。您也可以使用带有无菌尖端的移液器进行转移,但最好在干净的环境中进行,例如在 BSC 罩内。
Q3:氯膦酸盐脂质体可以用于体外巨噬细胞清除吗?
A:本品可用于体外巨噬细胞清除,但此方法更适合体内实验。主要原因是体外培养时,死细胞释放或脂质体“漏出”的氯磷酸会残留在培养基中,但在体内,氯磷酸的半衰期很短,很快被肾脏清除。游离的氯磷酸虽然不会进入细胞或脂质体,但一旦在培养基中积累就会慢慢进入细胞。
问题4:动物静脉注射氯膦酸盐脂质体后很快死亡的原因是什么?
A:一方面可能是给动物注射的脂质体悬浮液不均匀,建议使用前轻轻摇匀。脂质体在体外放置一段时间后会沉淀,如果长时间内一次给多只动物注射,脂质体会在注射器中沉淀,形成不均匀的悬浮液,这样第一次注射的测量值与最后一次注射的测量值就会有明显差异。另一方面可能是脂质体刚从冰箱中取出,还未恢复到室温。
Q5:注射氯膦酸盐脂质体后多少天动物死亡?
答:这可能是由于细菌污染造成的。巨噬细胞从体内清除会增加病毒颗粒、细菌或酵母等感染的机会。
Q6:氯膦酸盐脂质体没有达到预期的效果?
A:氯膦酸盐脂质体是大批量生产的,每一批产品在出售给客户之前都会进行氯膦酸盐浓度以及多种可能的污染物检测,以确保其正确无误。另外,脂质体易受极端温度影响,正确的运输和储存方式为4~8°C。混悬液既不能冷冻也不能加热到30°C以上。从收到货之日起需在3个月内用完,否则可能会影响使用效果。
Q7:静脉注射时,可以增加注射量吗?
答:静脉注射应根据动物体重,不超过0.1mL/10mg,腹腔注射可适当增加注射量。皮下注射需根据注射部位的体积决定。
Q8:使用脂质体时应注意什么?
答:由具有饱和烃链的脂质制成的脂质体其实强度很高,但应注意以下几点。
①请勿与有机溶剂混合,如氯仿、甲醇、乙醇、DMSO、乙醚等。
② 除非必须裂解脂质体,否则不要添加表面活性剂。
③ 不要加热至接近或高于脂质的主要相变温度,除非进行药物加载,这需要在相变温度以上进行孵育。
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