巨噬细胞在身体的不同部位发挥着独特而关键的作用,然而,精确去除巨噬细胞已成为一项关键的研究工具,以便更好地研究巨噬细胞在特定区域的具体功能及其对疾病发展的影响。氯膦酸盐脂质体是最成熟、最具成本效益和最理想的巨噬细胞去除工具之一。氯膦酸盐脂质体可通过腹膜内、尾静脉和其他各种方式给药,以去除不同组织中的巨噬细胞。
接下来我们将分享一系列主题来展示不同部位巨噬细胞清除的方法和效果,希望为研究人员提供有用的参考和借鉴。
注射方法介绍
尾静脉注射
尾静脉注射24小时后达到最大耗竭。应注意检测的时间点。
1、将小鼠放入倒置的饭盒中,从孔口拉出尾巴,有两个 动脉和三 老鼠尾巴上的静脉,两条 尾部背部和腹部有三条动脉, 叶脉分布呈锯齿状,一般利用左、右两边叶脉;
2、将纱布浸泡在70℃左右的温水中(或浸泡在酒精中),取出后包扎尾部,以达到尾部血管扩张和软化表皮角质的目的;
3、进行尾部静脉注射,用左手拇指和食指前后按住大鼠尾部,留出约2cm的一段,使皮肤紧张,静脉较为饱满,右手握住1mL针头注射器,使针头与静脉平行(夹角小于30°),从尾部下1/4处插入针头,开始注射药物时要缓慢,仔细观察,若没有阻力,没有白色皮节出现,则表示血管已被刺穿,可以正式注射药物。
4、有些实验需要连续几天重复尾静脉注射,注射部位应尽量从尾端开始,并依次向尾根部移动,变换血管位置进行注射。拔出针头后,用棉球按压注射部位1 - 2分钟止血。

腹腔注射
腹腔注射 48 小时后达到最大消耗 - 72小时。应注意检测时间点。
1、首先用背抓法抓住小鼠,使其头稍后仰、腹部向上,用小指固定小鼠左后肢,再用75%酒精棉球对注射部位进行消毒。
2、小鼠腹腔注射部位为0.5 在小腹部正中线两侧各留出1cm的空间(与大腿根部平齐),为避免损伤脏器,捞鼠时应将小鼠头向后仰,使小腹部脏器向上移动。
3、将注射器针头刺入皮肤,进入皮下,沿皮下方向将针头向前推2 - 3 mm,然后以针与皮肤呈45度角刺入小鼠腹腔。注意:刺入腹膜后,针尖的阻力消失。
4、将针塞拔回,如无回血或回液,即可注射药物。
5、注射后,轻轻旋转针头,然后缓慢拔出注射器,避免液体泄漏。

不同研究部位也会有不同的注射方法,如:皮下注射、气管给药、颅内注射等。您应该参考相关文献并咨询
加药周期及剂量
短期给药:单次注射氯磷酸盐脂质体200 µL (20 - 我们通过在特定时间使用单个或多个巨噬细胞(25 g重量)来检测巨噬细胞清除效率或用于下游实验。
长期给药:需要一周以上才能实现巨噬细胞清除。例如,在野生小鼠中,200 µL (20 - 25 克重量)通常作为第一剂,然后 200 µL 每2 - 3天一次。
参考测试协议
器官/巨噬细胞 | 剂量(20-25g/只) |
脾脏/红髓巨噬细胞 | 单剂量:200 µL/小鼠(IV 或 IP)。 |
肝脏/Kuffer 细胞 | 单剂量:200 µL/小鼠(IV 或 IP)。 |
肺/肺泡巨噬细胞 | 静脉注射(150-200 µL)与气管内或鼻腔内注射(50 µL)相结合可获得最佳效果。 |
淋巴结 | 注射(100-200 µL)/小鼠,具体给药方案可参见文献。 |
大脑/小胶质细胞 | 脑室内进入脑脊液,10 µL/小鼠,50 µL/大鼠。 |
血液/单核细胞 | 150-200 µL/小鼠(IV),24 小时内达到最大消耗率,但 1 - 7 天内的最大消耗率取决于菌株。 |
注:以上内容仅供参考,请查阅相关文献或咨询
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