概述

腔肠素是一种天然荧光素,在自然界中含量丰富,是大多数海洋发光生物(超过 75%)的光能储存分子。腔肠素可作为许多荧光素酶的底物,例如海肾荧光素酶 (Rluc)、Gaussia 分泌荧光素酶 (Gluc) 和包括水母发光蛋白和 Obelia 在内的发光蛋白。与萤火虫荧光素/荧光素酶系统不同,腔肠素/荧光素酶系统不需要三磷酸腺苷 (ATP),这使得研究体内生物荧光更加容易。因此,腔肠素通常用作基于荧光检测的报告基因检测和活体动物检测的发光底物。

目前商业化的腔肠素主要为腔肠素天然产物,也有合成的腔肠素衍生物如腔肠素h、腔肠素400a、腔肠素cp、腔肠素f、腔肠素hcp、腔肠素n等,理论上这些腔肠素可用于同一种实验,但由于其发光波长、细胞膜通透性、光量子效率等存在差异,导致它们在同一种应用中表现出不同的实验效果。

腔肠素的种类

腔肠素天然产物

又称腔肠素游离酸,是海肾荧光素酶(Rluc)、高斯荧光素酶(Gluc)等多种荧光素酶的底物,也是水母发光蛋白的辅助因子。

应用场景: 活细胞内钙离子浓度检测、基因报告分析、BRET(生物发光共振能量转移)研究、ELISA、HTS及化学发光检测组织或细胞内的ROS水平等。

腔肠素

它是海肾荧光素酶(Rluc)和高斯荧光素酶(Gluc)等多种荧光素酶的底物,也是水母发光蛋白的辅助因子。

应用场景: 发光强度比Coelenterazine Native高10倍以上,适用于报告基因分析和活细胞内钙离子浓度检测。

腔肠素

它是Coelenterazine Native的衍生物之一,Coelenterazine hcp-Aequorin复合物的荧光强度比Coelenterazine Native复合物高190倍,具有量子产率高、Ca2+释放快等特点。2+ 反应速度快,非常适合检测钙离子水平。

应用场景: 适用于钙离子水平检测。

腔肠素400a

又称DeepBlue CTM,是Coelenterazine Native的衍生物之一,是海肾荧光素酶(Rluc)的良好底物,其发射波长在400nm左右,对GFP受体蛋白的信号干扰小,且不能被高斯分泌型荧光素酶(Gluc)氧化。

应用场景: 它是BRET(生物发光共振能量转移)研究的首选腔肠素底物。

腔肠素

它是水母发光蛋白的首选底物,与Coelenterazine Native唯一的结构差异是其R-1酚基上的羟基被氟(F)取代。与Coelenterazine Native-Apoaequorin复合物产生的光子总数相比,该复合物仅产生80%的光子能量。 其优点是生成水母发光蛋白复合物所需的时间非常短。 当它与 Ca 接触时2+,其发光速度快、产量高,生产强度是Coelenterazine Native的20倍。 此外,它还具有良好的细胞通透性。

应用场景: 当 Ca 含量极高时2+ 研究水母蛋白质再生实验需要提高检测灵敏度,建议使用底物。

腔肠素

它是Coelenterazine Native的衍生物。与Apoaequorin蛋白形成的发光蛋白复合物比Coelenterazine Native发光15倍,并且具有更快的Ca2+ 反应速率。

应用场景: 可用于G蛋白偶联受体(GPCRs)药物的高通量筛选。

腔肠素

其荧光强度在所有腔肠素衍生物中较弱,与Ca的反应速率2+ 明显低于Coelenterazine Native。

腔肠素

Coelenterazine Native 的衍生物,结构上比 Coelenterazine Native 多一个乙基。作为 Renilla 荧光素酶的底物,其荧光强度是 Coelenterazine Native 的 137%。Coelenterazine e 具有较高的水母发光蛋白体外反应性和双发射峰(405 和 465),可以测定 Ca2+ 通过双波长比值法测定pCa5-7范围内的浓度,该方法不受腔肠素浓度影响,提高了检测精度,但由于该衍生物的细胞通透性较差,对于细胞内相关实验不具备这一优势。

应用场景: 非常有用的 Ca 底物2+ 低灵敏度检测。

2-甲基腔肠素

它是一种强效的细胞抗氧化剂,能有效作用于细胞内的活性氧,如单线态氧和超氧阴离子,而氧化应激是细胞凋亡过程中的中间环节。另外该化合物具有无毒性和膜通透性的特点,因此可以用于研究细胞凋亡。

产品应用:

1)作为研究细胞凋亡的重要工具;

2)还可用于化学发光检测超氧阴离子和过氧亚硝酸根阴离子水平。

产品名称

分子量

分子式

发射率 (纳米)

RLC*

相对强度

半上升时间 (ms)**

腔肠素天然产物

423.四十六

466

1.00

1

6-30

腔肠素

407.48

466

0.75

16

6-30

腔肠素

399.48

445

0.65

500

2-5

腔肠素

415.48

442

0.63

二十八

2-5

腔肠素

425.46

472

0.80

20

6-30

腔肠素

457.52

468

0.25

0.15

6-30

腔肠素

449.5

405 和 465

0.5

4

0.15-0。3

2-甲基腔肠素

331.37

/

/

/

/

腔肠素 400a

391.48

400

/

/

/


产品信息

产品名称

目录编号

规格

D-荧光素钠盐

40901ES01/02/03/08

100毫克/500毫克/1克/5克

D-荧光素钾盐

40902ES01/02/03/09

100毫克/500毫克/1克/5克

D-荧光素萤火虫,游离酸

40903ES01/02/03

100毫克/500毫克/1克

腔肠素天然产物

40904ES02/03/08

1×500微克/2×500微克/5毫克

腔肠素400a

40905ES02/03

1×500微克/2×500微克

腔肠素

40906ES02/03/08

1×500微克/2×500微克/5毫克

腔肠素

40908ES02/03

1×500微克/2×500微克

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