细胞培养是许多研究应用的基石，从药物开发到基因治疗。然而，如果没有正确的方法和工具，维持健康、增殖的培养物可能具有挑战性。无论您是经验丰富的科学家还是细胞培养新手，优化过程的每一步都会产生很大的影响。在本指南中，我们将向您介绍五个基本技巧，以确保您的细胞培养蓬勃发展，从消化到污染预防。
1. 完善细胞消化
细胞消化是细胞培养实验中的关键步骤，有助于细胞从培养表面脱离并分离成单细胞悬浮液，以便进行传代培养和后续分析。选择合适的消化酶可以提高细胞分离效率，减少细胞损伤，确保实验顺利进行。为了帮助您选择最合适的消化酶，我们整理了几种常用的酶产品及其特性。您可以根据细胞类型、实验要求和下游应用选择最合适的产品。
常见的消化酶
- 胰蛋白酶（用于水解细胞间蛋白质）
- 重组胰蛋白酶（不含动物源污染，适用于生物制药应用）
- 胶原酶（用于降解胶原纤维，适合组织消化）
- 复合胰蛋白酶（如 Accutase，可以更好地保存细胞表面抗原）
- 胰蛋白酶替代品（如 TrypLE™，非常适合无血清细胞培养）
- Dispase II（用于分离各种组织和细胞）。
每种酶都有其独特的应用和优势，选择正确的酶可以显著提高实验效率和结果质量。
| 产品名称 | 猫号 | 规格 |
| 性能™l 胰蛋白酶-EDTA (0.25%)， 不 酚红 | 40123ES60 | 100 毫升 |
| 性能单元™ 胰蛋白酶-无EDTA（0.25%），无酚红 | 40124ES60 | 100 毫升 |
| 性能单元™ 胰蛋白酶 (0.25%)、酚红 | 40126ES60 | 100 毫升 |
| 性能单元™ 胰蛋白酶-EDTA (0。25%)、酚红 | 40127ES60 | 100 毫升 |
| 胰蛋白酶1：250（粉末） | 40101ES25 | 25 克 |
| 性能单元™ 重组胰蛋白酶（粉末） | 40512ES10/60 | 10 毫克/100 毫克 |
| 20416ES60 | 100 μ克 | |
| PerfCel Tryzyme™ Express 酶 (1X)，酚红 | 40134ES60 | 100 毫升 |
| PerfCel Tryzyme™ 快速酶 (1X)， 不 酚红 | 40135ES60 | 100 毫升 |
| ACCUTASE 细胞解离溶液 | 40506ES60 | 100 毫升 |
| 分散酶Ⅱ | 40104ES60/80 | 100毫克/1克 |
2. 创造理想的培养环境
健康的培养始于适当的环境。这包括适合您的细胞类型的合适温度、pH 值和最佳培养基。
无血清细胞培养 已成为生物研究中的关键技术，确保可重复性、一致性和道德标准。 传统细胞培养依赖于胎牛血清 (FBS)，这会带来实验结果的差异性和动物来源的伦理风险。为了应对这些挑战，越来越多的研究人员选择无血清培养基。
在免疫学研究中， 淋巴细胞培养 淋巴细胞在免疫应答、疫苗研发和癌症免疫治疗等领域发挥着重要作用。淋巴细胞作为免疫系统的重要组成部分，需要在特定的培养条件下才能在体外增殖和激活。
此外， 类器官培养 代表着细胞培养技术的另一项重要进展。类器官是一种可以在体外模拟人体组织和器官功能的三维细胞结构，为疾病建模、药物筛选和再生医学提供了新的研究平台。类器官的三维结构更好地复制了人体器官的复杂性和生理功能，已成为研究器官发育、疾病机制和治疗反应的重要工具。
| 产品名称 | 猫号 | 规格 |
| CelCulSF™ 昆虫细胞培养基（无血清） | 40140ES | 1000 毫升 |
| CelCulSF™ 293 细胞培养基（无血清） | 40141ES | 1000 毫升 |
| CelCulSF™淋巴细胞培养基（无血清） | 40142ES | 1000 毫升 |
| CelCulSF™杂交瘤细胞培养基（无血清） | 40143ES | 1000 毫升 |
| CelCulSF 间充质干细胞（硕士）培养基（无血清） | 40144ES | 500 毫升 |
| CelCulSF™ 贴壁细胞培养基（血清还原） | 40145ES | 1000 毫升 |
| 思博瑞® 肠道类器官生长培养基（小鼠） | 41426ES60/76 | 100/500毫升 |
| 思博瑞® 肠癌类器官生长培养基（人） | 41427ES50/60/76 | 50/100/500 毫升 |
| 思博瑞® 胃癌类器官生长培养基（人） | 41428ES50/60/76 | 50/100/500 毫升 |
| 思博瑞® 肝癌类器官生长培养基（人） | 41429ES50/60/76 | 50/100/500 毫升 |
| 思博瑞® 乳腺癌类器官生长培养基（人类） | 41430ES50/60/76 | 50/100/500 毫升 |
| 思博瑞® 肺癌类器官生长培养基（人） | 41431ES50/60/76 | 50/100/500 毫升 |
| 思博瑞® 食管 癌症类器官生长培养基（人类） | 41432ES50/60/76 | 50/100/500 毫升 |
| 思博瑞® 卵巢癌类器官生长培养基（人） | 41433ES50/60/76 | 50/100/500 毫升 |
| Cebrary® 胰腺癌类器官生长培养基（人） | 41434ES50/60/76 | 50/100/500 毫升 |
3.高效转染，实现高质量基因表达
细胞转染是生物医学研究中的一项重要技术，可将外源核酸（如 DNA、mRNA、siRNA 和 miRNA）引入细胞，用于基因表达、沉默或功能研究。由于细胞类型和核酸种类繁多，选择合适的转染试剂对于实验成功至关重要。
化学转染试剂，包括 脂质体、聚乙烯亚胺和磷酸钙基配方，各有其独特的优势。
| 猫号 | 产品名称 | 核酸 | 应用 |
| 40802ES | 脱氧核糖核酸 | 高效脂质体转染试剂 | |
| 40804ES | 路威酩轩 | 增强慢病毒感染能力。 | |
| 40806ES | siRNA、miRNA、反义寡核苷酸 | 具有高敲低效率的 siRNA 和 miRNA 特异性转染试剂。 | |
| 40808ES | DNA、siRNA、miRNA | 升级版的脂质体转染试剂，可对多种细胞类型进行DNA和RNA转染，对难以转染的细胞依然表现出良好的效果。 | |
| 40809ES | 信使核糖核酸 | mRNA特异性转染试剂，在多种细胞类型中具有高转染效率。 | |
| 40815ES | 脱氧核糖核酸 | 广泛适用于蛋白质表达和病毒包装（粉末形式）。 | |
| 40816ES | 脱氧核糖核酸 | ||
| 40820ES | 脱氧核糖核酸 | 专用于病毒包装的转染试剂，能够实现更高的 AAV 和 LV 病毒包装产量 | |
| 40821ES | 脱氧核糖核酸 | ||
| 40823ES | 脱氧核糖核酸 | 最高的转染效率。特别适合悬浮培养生产AAV，产量更高。 |
4. 冷冻保存细胞以供长期使用
细胞冷冻是长期保存细胞的关键技术，其目的包括防止污染、保持实验一致性、方便运输和建立细胞库。冷冻过程中的主要风险包括 冰晶形成和溶液损害。为了减轻这些风险，采用慢速冷冻和快速解冻方案是必不可少的。甘油或二甲基亚砜 (DMSO) 等冷冻保护剂通常用于减少冰晶形成和渗透压。
| 产品名称 | 猫号 | 规格 |
| 哺乳动物细胞储存冷冻 | 40128ES50 | 5×10毫升 |
| 哺乳动物细胞储存冷冻 | 40128ES60 | 100 毫升 |
| 昆虫细胞冷冻保存 | 40129ES50 | 5×10毫升 |
| 昆虫细胞冷冻保存 | 40129ES60 | 100 毫升 |
| 无血清细胞冷冻培养基 | 40151ES | 50 毫升/100 毫升 |
| 无血清细胞冷冻培养基（不含DMSO） | 40152ES | 100 毫升 |
| 无血清细胞冷冻培养基（用于干细胞） | 40153ES | 100 毫升 |
| 无血清细胞冷冻培养基（适用于干细胞，不含 DMSO） | 40154ES | 100 毫升 |
5. 预防污染，保证培养物健康
污染是细胞培养中普遍存在的问题，经常导致结果受损并浪费研究时间。识别各种类型的污染对于有效预防和补救至关重要。
普通单元 污染物
- 细菌
- 真菌
- 支原体
- 原生动物
- 黑色斑点
- 病毒
- 跨物种
预防措施包括使用抗生素、定期对设备进行消毒、遵守无菌技术以及保持工作区域清洁。一旦检测到污染，通常建议丢弃受影响的培养物，除非它们是稀有或有价值的；在这种情况下，应采取措施消除污染物。建议建立备用细胞系或获取新培养物。在某些情况下，针对特定污染物的专门处理可能有助于恢复细胞培养。保持适当的卫生条件、确保设备严格分离以及维持无菌环境对于防止污染和确保细胞培养实验成功至关重要。
| 类型 | 产品名称 | 猫号 | 规格 |
| 抗菌 | 青霉素-链霉素 (100×), 适用于细胞培养 | 60162ES76 | 100 毫升 |
| 60230ES07/60 | 3.2/100克 | ||
| 庆大霉素硫酸盐 | 60214ES03/08/25 | 1/5/25 克 | |
| 甲硝唑 | 60223ES25/60 | 25/100毫克 | |
| 抗真菌 | 两性霉素B | 60238ES01/03 | 100毫克/1克 |
| 制霉菌素 | 60219ES08 | 5 克 | |
| 60231ES03/08 | 1/5毫克 | ||
| 支原体检测 | 40601ES10/20 | 10 /20 次检测 | |
| 40612ES25/60 | 25/100吨 | ||
| 支原体去除 | 迈凯威™ 喷雾（即用型） | 40605ES02/03/08 | 1/2/10×500 毫升 |
| 40607ES03/08 | 1/5 毫升 | ||
| 40608ES03/08 | 1/5 毫升 | ||
| 40609ES60 | 100 毫升 | ||
| 40610ES60 | 100 毫升 |
结论
优化细胞培养过程对于产生可靠、可重复的结果至关重要。从选择正确的消化酶到防止污染，工作流程中的每个步骤都很重要。通过结合来自
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