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利用TdT转移酶将荧光素-dUTP与缺口DNA结合是检测细胞凋亡最常用的方法之一，罗氏公司的原位细胞死亡试剂盒即是基于此原理，产品中的TdT转移酶活性直接影响标记效率。
目前全球有120多个研究小组正在使用该产品，并在Theranostics、EMBO Molecular Medicine等权威期刊发表多篇英文文章。
检测机制
在细胞凋亡的后期，染色体DNA双链断裂或单链断裂产生大量粘性的3-OH末端，在脱氧核糖核苷酸末端转移酶（TdT）作用下，荧光素/酶标记的dUTP结合到DNA的3末端，这样通过检测荧光就能够完成对细胞凋亡的检测，这种方法称为脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记技术（TUNEL），其原理如图1所示。
图1：末端脱氧核苷酸转移酶介导的缺口末端标记（TUNEL）示意图
产品特性
- 适用范围广泛
可用于石蜡包埋的组织切片、冷冻组织切片、培养的细胞和从组织分离的细胞。
- 高检测灵敏度
可以检测到极少量的凋亡细胞。
- 背景干扰低
高信噪比。
- 观察的多功能性
荧光显微镜观察，流通检测。
数据呈现
1、小鼠前脂肪细胞（3T3-L）Tunel实验
图2：小鼠前脂肪细胞3T3-L凋亡检测。第一行代表阴性对照，第二行代表阳性对照。 检测试剂：Cat No.40306 TUNEL细胞凋亡检测试剂盒（FITC）
2、石蜡切片样本隧道检测
图3：LY3009120单独使用或与Vemurafenib和Obatoclax联合使用可在皮下移植肿瘤模型中有效延缓甲状腺癌。 IF=8.8。样本类型：石蜡包埋肿瘤组织（取自裸鼠）。检测试剂：Cat No. 40307 TUNEL 凋亡检测试剂盒（Alexa Fluor 488）。
3、Tunel检测细胞爬行
图4：硫酸锌对不同亚组内皮细胞凋亡的影响。 样本类型：HUVEC（人脐静脉内皮细胞）。检测试剂：Cat No. 40308 TUNEL 凋亡检测试剂盒（Alexa Fluor 640）
4、流式细胞术检测细胞凋亡
图5：PA处理可有效降低重编程过程中细胞凋亡的发生。IF=3.7。样品类型：iPS细胞。检测试剂：Cat No. 40307 TUNEL细胞凋亡检测试剂盒（Alexa Fluor 488）。
文献引用
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常见问题
问： 出现非特异性荧光标记？
1）组织/细胞本身具有高水平的核酸酶或聚合酶活性，这很容易导致非特异性荧光标记的出现，例如平滑肌细胞。 解决办法是在取样后立即固定细胞或组织，并充分固定它们，以阻止这些酶引起假阳性。
2）使用不合适的固定剂，如某些酸性固定剂，会导致假阳性，建议使用新鲜配制的4%中性多聚甲醛固定剂。
3）TUNEL实验反应时间过长，细胞或组织表面无法保持湿润，也可能产生非特异性荧光，应注意控制反应时间，确保TUNEL实验反应液充分覆盖样本。
问： 荧光背景很高？
1) 分裂和增殖速度快、转录水平高的细胞有时也会出现细胞核中的 DNA 断裂。
2）长时间暴露在激发光下会导致假阳性。
问： 标记效率低？
1）用乙醇或甲醇固定会导致标记效率低。
2）固定时间过长，导致交联度过高，建议减少固定时间。
3）组织切片太厚，固定效果不理想，最好控制在10μm以内。
（4）荧光猝灭：在正常光照下10分钟内荧光就会发生严重猝灭。解决方法是避免光照操作。
产品详情
| 产品名称 | 货号 | 规格 |
| Annexin V-FITC/7-AAD细胞凋亡检测试剂盒 | 40311ES20/50/60 | 20吨/50吨/100吨 |
| 40302ES20/50/60 | 20吨/50吨/100吨 | |
| Annexin V-PE/7-AAD细胞凋亡检测试剂盒 | 40310ES20/50/60 | 20吨/50吨/100吨 |
| 40303ES20/50/60 | 20吨/50吨/100吨 | |
| Annexin V-YSFluor™ 488/7-AAD 细胞凋亡检测试剂盒 | 40313ES60 | 100吨 |
| 40305ES20/50/60 | 20吨/50吨/100吨 | |
| 40304ES20/50/60 | 20吨/50吨/100吨 | |
| Annexin V-YSFluor™ 647/7-AAD 细胞凋亡检测试剂盒 | 40312ES20/50/60 | 20吨/50吨/100吨 |
| 40306ES20/50/60 | 20吨/50吨/100吨 | |
| 40307ES20/50/60 | 20吨/50吨/100吨 | |
| 40308ES20/50/60 | 20吨/50吨/100吨 |