随着 页蛋白质 s随着科学的发展，蛋白质纯化技术在生物研究和生物技术产业领域中的地位越来越重要。作为一项核心技术，它涉及通过基因工程的方法将目标蛋白质的编码信息整合到宿主细胞中，从而诱导其高效生产所需的蛋白质，随后经过一系列复杂的体外操作步骤，实现蛋白质的高纯度提取。蛋白质纯化使科学家能够分离单一类型的蛋白质，这对于深入研究蛋白质的结构和功能、开发新药、疾病诊断以及推动生物技术的应用至关重要。这项技术不仅保证了科学实验的准确性，而且不断推动着生命科学的发展。
图1.亲和层析示意图[1]
融合标签是蛋白质工程领域中一种强大的工具，可与目标蛋白质结合，实现多种实验目的。下表列出了常见融合标签的功能，供参考。 然而这些标签在发挥了最初的辅助作用后一旦残留在融合蛋白上，就可能对后续实验产生不利影响，如干扰动物免疫学实验、影响蛋白的生物活性等，因此去除这些不必要的融合标签对保证蛋白的正常功能和实验的准确性至关重要。
表1. 常见融合标签功能及酶切方法介绍
| 融合标签 | 尺寸 （KD一个） | 功能 | 常见的酶切方法 |
| 他的 | 0.84 | 有利于纯化，可以纯化可溶性/包涵体蛋白。 | TEV蛋白酶 |
| 旗帜 | 1.01 | 与F融合的目的蛋白落后 标签可以被F抗体识别落后，使得含有 F 的融合蛋白落后 tag可用Western Blot、ELISA等方法检测和识别。 | 肠激酶 |
| 消费税 | 二十六 | 增强蛋白质溶解度，只能纯化可溶性蛋白质，屏蔽毒性蛋白质。 | 凝血酶 |
| 骨髓移植 | 44.4 | 增强蛋白质溶解度 并屏蔽有毒蛋白质。 | TEV蛋白酶 |
| 新加坡国民航空局 | 55 | 增强蛋白质溶解度 并屏蔽有毒蛋白质。 | 凝血酶 |
| 相扑 | 11.2 | 增强蛋白质的溶解性，促进蛋白质的水解 水解，提高蛋白质的稳定性。 | SUMO蛋白酶 |
今天，我们很高兴向您介绍一种高效、精确去除融合标签的尖端产品 - UCF.ME商标 rTEV蛋白酶。该酶实验步骤简单、易操作，可以方便地从融合蛋白中切除不需要的标签，从而获得高纯度的目的蛋白。
缅因大学商标 重组病毒蛋白酶
TEV Protease 是一种广泛用于重组蛋白融合标签切割的蛋白酶，具有较高的位点特异性。它严格识别七氨基酸序列 EXXYXQ↓(G/S)，并在谷氨酰胺和甘氨酸或丝氨酸之间进行精确切割。最常见的七氨基酸序列是 Glu-Asn-Leu-Tyr-Phe-Gln↓-Gly。这种特异性确保了蛋白质处理过程的准确性和效率。
图2. TEV蛋白酶作用机理示意图[2]
缅因大学商标 rTEV蛋白酶是经过基因工程改造和精细纯化的重组蛋白酶，不仅保留了天然TEV酶的全部功能活性，而且在更宽的温度范围内表现出优异的稳定性和特异性。 这 宿主 gDNA 残基 的他的产品是 非常 低，保证实际应用中蛋白融合标签有较高的切割效率，并有效降低引入外源物质残留的风险。 缅因大学商标 rTEV蛋白酶在pH 7.0和30°C条件下表现出最佳活性。但它甚至可以在pH 6.0-8.5和温度4-30°C的宽范围内保持活性，以满足不同的蛋白质加工要求。值得一提的是，UCF.ME商标 rTEV Protease的N端带有6×His标签，可以利用Ni-NTA树脂高效去除该标签，从而实现目标蛋白的精准纯化。
性能展示
1. 切割效率高：蛋白质标签切割更彻底
使用含有 UCF.ME 的融合蛋白（3 μg）商标 rTEV蛋白酶切割位点作为底物，UCF.ME商标 分别加入10、5、3 U rTEV Protease，30℃反应1 h，琼脂糖凝胶电泳检测酶切效果。结果表明，Y伊森的 UCF.ME商标 当投入量大于3U时，rTEV Protease就能高效切割底物，切割效率可达90%以上。
图3. UCF.ME酶切活性验证商标 重组病毒蛋白酶
2. 低宿主gDNA残留：有效降低引入外源物质残留的风险
通过测试主机（大肠杆菌) 不同批次 UCF.ME 中的 gDNA 残留量商标 rTEV Protease，结果表明，宿主 gDNA 残基 UCF.ME商标 rTEV 蛋白酶远低于<1 拷贝/U。
图4. UCF.ME中宿主gDNA残基检测结果商标 重组病毒蛋白酶
3. 适用条件广泛：能够满足不同蛋白质的加工要求。
通过验证UCF.ME的切割活性商标 rTEV Protease在不同条件下的活性分析结果表明UCF.ME商标 rTEV蛋白酶在4-30℃条件下均具有较强的活性，可以满足客户不同的应用需求。
| 反应时间 （时长） | 不同温度下的裂解活性 （％） | |||
| 4℃ | 16℃ | 21℃ | 30℃ | |
| 1 | 三十四 | 58 | 56 | 85 |
| 2 | 58 | 80 | 78 | 90 |
| 3 | 71 | 99 | 99 | 99 |
| 3.5 | 84 | 99 | 99 | 99 |
是伊森推荐的融合标签切割蛋白产品
| 产品 姓名 | 产品 否棕色 | |
| 测试车辆 蛋白酶 | 缅因大学商标 重组病毒蛋白酶 | 20427ES |
| 肠激酶 | 重组肠激酶 | 20395ES |
| SUMO蛋白酶 | SUMO蛋白酶 | 20410ES |
| 3C蛋白酶 | 3C蛋白酶 | 20409ES |
参考：
[1] Parikh I，Cuatrecasas P.亲和色谱法[J].Vox Sanguinis，1972，23(1-2):141-146.DOI：10.1159/000466530。
[2] Paththamperuma C, Page R C. 荧光淬灭测定TEV蛋白酶活性[J]. 分析生物化学, 2022, 659: 114954。