Ultra-CLEAN UCF.ME™热稳定RNase H：精确切割，以进行更有效的实验！

最适合： rRNA去除 和 mRNA 加帽 效率检测！

耐热 RNase H 具有出色的耐热性，其特异性和效率均优于普通 RNase H！

RNase H 简介

大肠杆菌 RNase H（大肠杆菌核糖核酸酶 H）是一种特异性降解 RNA-DNA 杂交链中 RNA 成分的酶。它通过切割 RNA 链来维持 DNA 模板的完整性和稳定性，在 DNA 复制、修复和转录等过程中起着至关重要的作用。这使得它广泛应用于分子生物学实验，包括 cDNA 合成、rRNA 去除和 RNA 干扰研究。然而，大肠杆菌 RNase H 有一些局限性：

  • 它可能导致单链RNA或DNA的非特异性切割，从而降低实验结果的准确性。
  • 由于其热稳定性差，无法在高温下保持活性，不适合进行高温逆转录或 PCR 等需要高温的实验。

这些缺点促使研究人员开发耐热RNase H，以拓宽其应用范围并提高实验效率。

Figure 1: RNase H Mechanism

图 1：RNase H 机制

来自嗜热菌的耐热 RNase H

耐热 RNase H 源自嗜热菌，是大肠杆菌 RNase H 的同源物，具有相似的核糖核酸酶功能。它能够精确识别并有效切割 RNA：DNA 杂交体中 RNA 链的磷酸二酯键，同时保持 DNA 链的完整性。深入的结构分析表明，尽管其整体稳定性分布类似于大肠杆菌 RNase H，但嗜热菌 RNase H 在整体稳定性和局部残基稳定性方面均表现出显著改善。

耐热 RNase H 的最佳活性温度高于 65°C，在较高反应温度下可提供更高的特异性和效率，从而最大限度地减少非特异性切割。这一特性使其在分子生物学实验中具有巨大潜力，包括：

  • rRNA去除
  • mRNA封盖率检测
  • 去除与 poly(dT) 杂交的 mRNA poly(A)
  • cDNA 第二链合成过程中 mRNA 的去除
  • 提高高温逆转录、等温扩增和 PCR 实验中的扩增效率
Figure 2: Three-Dimensional Structure Comparison of Thermostable RNase H and E. coli RNase H [1]

图2：耐热RNase H与大肠杆菌RNase H的三维结构比较 [1]

缅因大学™耐热 RNase H (Cat14545)

热稳定性 RNase H 经常用于病原体检测实验，例如宏基因组测序 (mNGS) 和病原体靶向测序 (tNGS) 中的 rRNA 去除。酶中残留的宿主或背景细菌核酸会严重影响检测准确性。为了解决这个问题， Yeasen 个人简介技术 介绍 UCF.ME™ 采用其专有的 UCF.ME 开发的耐热 RNase H (Cat14545)™ 超洁净工艺技术。UCF.ME 制作™ 超洁净分子酶设施，该产品经过严格的质量控制——从材料选择和环境管理到工艺优化和测试——确保背景细菌 gDNA 和核酸酶残留量最少。这保证了实验结果的准确、可靠和可重复。

产品优势：

  • 高活性和优异的批次间一致性
  • 极低的宿主 gDNA 残留：<0.02 拷贝/U
  • 无外切酶、内切酶或 RNase 残基
  • 出色的稳定性：在 4°C 下放置 32 天、在 25°C 下放置 16 天或在 37°C 下放置 7 天后酶活性无明显损失

UCF.ME 的表演展示™ 耐热 RNase H (Cat14545)

1. 高活性和批次一致性

三批 UCF.ME™ 将耐热 RNase H 与 RNA:DNA 底物一起孵育，并通过琼脂糖凝胶电泳分析条带变化。结果表明，仅 0.05 U 该酶即可有效裂解 20 pmol RNA:DNA 底物中的 RNA，且批次间一致性极佳，凸显了其稳定性和可靠性。

Figure 3: Activity Detection Results of UCF.ME® Thermostable RNase H &nbsp;

图3：UCF.ME活性检测结果™ 耐热 RNase H

注：反应条件：50°C，20分钟；RNA：DNA底物-20 pmol

2. 低宿主 gDNA 残留：<0.02 拷贝/U

宿主（大肠杆菌）gDNA 残留检测显示，UCF.ME 的三个批次™ 耐热 RNase H 的残留水平远低于 0.02 Copies/U，确保了高纯度和实验可靠性。

Figure 4: Host gDNA Residue Results of UCF.ME® Thermostable RNase H

图 4：UCF.ME 的宿主 gDNA 残留结果™ 耐热 RNase H

3. 无外切酶、内切酶或 RNase 残留

25 佛罗里达大学 ™ 将耐热RNase H与核酸底物孵育，通过琼脂糖凝胶电泳检测条带变化，三批样品中均未检测到外切酶、内切酶或RNase残留，为结果的准确性和可靠性提供了有力的保证。

Figure 5: Detection Results of Exonuclease, Endonuclease, and RNase Residues in UCF.ME® Thermostable RNase H

图5：UCF.ME中外切酶、内切酶和RNase残留物的检测结果™ 耐热 RNase H

4.稳定性优良

缅因大学™ 耐热 RNase H 经过稳定性测试：4°C 32 天、25°C 16 天、37°C​​ 7 天。酶活性测量结果未显示明显下降，证明其在宽温度范围内具有出色的稳定性，适合长期储存和各种实验条件。

Figure 6: Accelerated Stability Results of UCF.ME® Thermostable RNase H

图 6：UCF.ME 的加速稳定性结果™ 耐热 RNase H

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来源

产品名称

猫N哦。

嗜热杆菌

缅因大学™ 耐热 RNase H

14545ES

E.大肠杆菌

核糖核酸酶H

12906ES

参考

1. Hollien J, Marqusee S. 嗜热酶的稳定性结构分布[J]. 美国国家科学院院刊，1999, 96(24): 13674-13678。

2. Wolf EJ, Dai N, Chan SH. 利用位点特异性内切核糖核酸酶进行DNA探针定向富集对mRNA 5′末端进行选择性表征[J]. [2025-03-03]。

3. 顾华, 孙玉华, 李新征. 针对禽类物种开发的新 rRNA 消耗方法，用于总 RNA 测序和核糖体分析 [J]. 家禽科学, 2021, 100(7): 101321。DOI:10.1016/j.psj.2021.101321。

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