近年来随着分子生物学技术的飞速发展, 基于核酸的诊断方法已广泛建立并应用于人类疾病的实验室检测。与其他核酸扩增技术相比,等温扩增具有快速、高效、特异性强、无需专门设备等优点。因此,自其出现以来,已被许多学者视为可能与PCR相媲美的检测方法。
因此,相信基于等温扩增技术的诊断仪器和试剂盒的开发和应用将会为分子诊断中的即时诊断(POCT)带来新的方向。
主流等温扩增技术原理介绍
1、环介导等温扩增
(LAMP)技术
原则:环介导等温扩增(LAMP)技术利用具有链置换活性的Bst DNA聚合酶,针对目标基因的6个区域设计4种特异性引物,在恒温条件下高效、快速、特异性地扩增目标序列,可在60-65℃恒温条件下进行扩增,15-60分钟内可扩增10个核酸序列。9 至 1010 次即可实现。
优点及应用:由于 反应迅速、特异性强、设备简单易操作、结果易于解释等温扩增技术已用于检测 致病细菌、寄生虫、病毒、疾病和转基因产品有望在临床传染病诊断、环境监测、食品安全等领域得到广泛应用,成为一种适合分子诊断即时检测(POC)的理想方法。即时检验) 平台。
分类:LAMP检测方法分为几种类型,包括比浊法、pH指示剂法、荧光染料法(如NHB、钙黄绿素、SYBR Green、Syto等)和荧光探针法。
2、重组酶聚合酶扩增(RPA)技术
原则:重组酶与引物结合后会形成蛋白质-DNA复合物,可在双链DNA中寻找同源序列。一旦引物找到同源序列,就会发生链交换反应,从而形成并启动DNA合成,从而使模板上的目标区域呈指数级扩增。移位的DNA链与单链结合(SSB)蛋白结合,以防止进一步移位。在该系统中,合成事件由两个相反的引物启动,主要依赖于重组酶、Bsu酶和SSB蛋白的活性。该技术可在37至42°C的温度下在10-30分钟内快速检测感兴趣的目标。
优点及应用:RPA 拥有 灵敏度高,特异性强,对专业设备的依赖性低以及多种检测模式的融合,特别适合基层和现场即时检测,可广泛应用于体外诊断、动物疾病、食品安全、生物安全、农业等领域。
分类:RPA 检测方法分为几种类型,包括凝胶电泳法、EXO 探针法、Fpg 探针法、侧流试纸 (LF-RPA)、絮凝分析等。
产品性能展示
01 pH敏感染料RT-LAMP试剂
pH敏感染料RT-LAMP采用可视化染料作为敏感指示剂,在60-65℃等温条件下,使用恒温水浴或标准PCR仪即可完成一步法RNA核酸扩增,仅需30分钟,即可根据反应后的颜色变化判断是否有病原体感染,结果更直观(阳性为橙黄色,阴性为洋红色),适合大群体快速检测。
推荐产品:
RT-LAMP pH敏感染料试剂盒(13906ES)
RT-LAMP pH敏感染料显色版冻干试剂盒(13920ES)
业绩展示:




02 荧光染料 RT-LAMP 试剂
荧光染料法RT-LAMP采用荧光染料(如SYBR Green、Syto等)作为荧光标记物,在扩增反应中与双链DNA结合后,荧光信号增强800-1000倍。使用荧光定量PCR仪,在60-65℃恒温条件下检测,约30分钟后即可根据扩增结果判断是否有病原体感染。此方法也可结合微流控芯片或便携式检测仪进行快速检测。
推荐产品:
RT-LAMP染料测定试剂盒(UDGplus)(13762ES)
业绩展示:
1.RT-LAMP/RPA 混合物选择指南
产品分类 | RT-LAMP 混合 | RPA 组合 | ||
产品名称 | RT-LAMP pH 敏感染料试剂盒 | RT-LAMP pH敏感染料显色版可冷冻干燥套件 | 快速保险丝放大器 | |
产品编号 | 13762ES | 13906ES | 13920ES | 16702ES |
产品类别 | 荧光染料 | pH敏感染料 | pH敏感染料 | 探测 |
产品组件 | 2 个组件 缓冲液、酶混合物 | 3 个组件 缓冲液、RT酶、Bst酶 | 4 个组件 缓冲液、RT酶、Bst酶、冻干保护剂 | 4 个组件 缓冲液、酶混合物、醋酸镁 |
支持冷冻干燥 | 不 | 是的,不含冻干保护剂 | 是的,含有冻干保护剂 | 不 |
2.LAMP/RT-LAMP 酶选择指南
产品分类 | Bst 酶 | 逆转录酶 | UDG 酶 | |||
产品名称 | III 逆转录酶, 不含甘油 | UDG,不含甘油 | ||||
产品编号 | 14402ES | 14405ES | 11111ES | 11297ES | 14455ES | 14001ES |
酶活性 | 40单位/微升 | 60单位/微升 | 200单位/微升 | 600单位/微升 | 1单位/微升 | 1单位/微升 |
产品组件 | 3 个组件 | 2 个组件 | 2 个组件 | 单组分 | 单身的- 成分 | 单组分 |
支持冷冻干燥 | 不 | 是的 | 不 | 是的 | 不 | 是的 |
3、RPA酶选择指南
产品分类 | 北苏 | T4X | T4是 | 单边带 | CK | EXO |
产品名称 | 北苏 | T4 紫外线 | T4 紫外线 | GP32 | 肌酸激酶 | 外切酶III |
产品编号 | 11078ES | 11079ES | 11080ES | 11081ES | 14502ES | 14525ES |
酶活性 | 5单位/微升 | 2微克/微升 | 2微克/微升 | 5微克/微升 | 2微克/微升 | 100单位/微升 |
产品组件 | 单组分 | 单组分 | 单组分 | 单组分 | 单组分 | 2 个组件 |
支持冷冻干燥 | 不 | 不 | 不 | 不 | 不 | 不 |