新一代测序（NGS）技术因检测灵敏度高、特异性强、可定性、定量检测等特点，在病原体检测、肿瘤突变检测、生殖遗传等领域展现出极其广阔的临床和科研应用前景。 文库构建作为NGS的核心步骤，直接影响测序质量。 依据体外诊断产品注册审查指导原则，需提供主要原材料的研究资料，结合原材料的基本信息、参数指标、供应来源等因素进行综合分析论证，确定最合适的原材料来源。 常规DNA和RNA文库构建过程主要包括cDNA合成、DNA片段化、接头连接、文库扩增等关键步骤， 各个步骤涉及的原料酶种类较多，原料酶的筛选程度延长了研究周期。 在此基础上，性价比高、操作简便的建库模块产品成为了IVD产品开发的新选择。
图1. 常规DNA文库构建流程（左）和RNA文库构建流程（右），以Illumina平台为例
逆转录合成是核心部分 RNA 测序， 新的 高类型 高效逆转录酶，集高灵敏度、高 屈服 cDNA的转录调控机制及其与复杂结构模板的兼容性是目前研究的热点。 ZymeEditor™酶修饰平台
图2. 13488ES在RNA-seq中的应用效果
由于测序平台读长较短，建库前需要将DNA随机片段化。 早期酶碎裂研究面临诸多困难，存在均匀性和偏差性问题。
图3. 不同DNA片段化酶的片段化效果：强力片段化酶（左）和温和片段化酶（右）
文库转化率是评价文库质量的重要指标,较高的文库转化率一定程度上意味着文库丰富度更好、测序数据的一致性更好。 常规T4 DNA连接酶注重优化高效连接，但片段容易发生自连接，从而降低文库转化率，影响文库丰富度和测序质量。 这
图 4. 热稳定性和接头残基分析 12996ES
NGS 文库制备方法中需要所有 PCR 扩增酶。 大多数高保真 DNA 聚合酶具有 5'→3' 聚合酶活性和 3'→5' 外切酶活性， 它可以在 5'→3' 方向合成 DNA，同时纠正错误掺入的碱基， 因此，它能够快速、高保真地扩增 DNA 片段。 但很少有酶专门为NGS设计， 目前，既高效、精准、特异，又能无偏向性扩增不同大小和GC含量的靶标，同时具备提前预混引物能力的文库扩增产品并不多。
图5. 12980ES稳定性及扩增误差率分析
除以上系列NGS建库模块产品外， 我们还提供一站式原料酶产品， 满足不同客户的组合需求。
| 产品类别 | 产品名称 | 货号 | 评论 |
| 高效 cDNA 合成 | 希菲尔™ 超逆转录酶（200 U/μL） | 14604ES | 逆转录酶 |
| 希夫NGS™ 双链cDNA合成试剂盒 | 13488ES | cDNA合成模块 | |
| 脱氧核糖核酸 碎片化、末端修复和 A 尾 | 希夫™ 斯玛特酶 | 12907ES | DNA碎片酶 |
| 12619ES | 脱氧核糖核酸 碎片化、末端修复和 A 尾模块 | ||
| 修复和尾矿处理 | Hieff NGS® 快速末端修复/dA-Tailing 模块 | 12608ES | 末端修复和尾部修复模块 |
| 接头连接 | 10299ES | T4 DNA连接酶 | |
| 文库扩增 | 2× Ultima HF 放大混合物 | 13344ES | 高保真酶 |