蛋白质纯化是生物化学和分子生物学中的一项基本技术，广泛应用于研究、诊断和治疗应用。要研究特定蛋白质，第一步是从生物样本中分离和纯化它。然而，鉴于蛋白质的多样性和生物系统的复杂性，获得高纯度蛋白质可能是一个挑战。了解蛋白质纯化的核心原理并为您的研究选择正确的技术可以大大提高您的工作流程效率和产量。
蛋白质纯化基础知识
蛋白质纯化依赖于蛋白质的物理和化学性质的差异，例如大小、电荷、疏水性和对特定配体的亲和力。通过利用这些差异，研究人员可以有效地将目标蛋白质与其他生物成分分离，从而最大限度地减少污染。
以下是基于不同分离机制的主要蛋白质纯化技术：
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| 凝胶过滤 | 离子交换 | 疏水相互作用 | 亲和力 |
| 分离机制 | 尺寸 | 蛋白质表面电荷 | 疏水性 | 特异性亲和力 |
| 选择性 | 中等的 | 高的 | 高中 | 非常高 |
| 负载能力 | 低的 | 高的 | 高的 | 高的 |
| 净化速度 | 中低 | 高的 | 高的 | 高的 |
| 生物相容性 | 非常好 | 好的 | 中等至良好 | 好的 |
| 目标蛋白质产量 | 高的 | 高的 | 中高 | 高的 |
每种技术都可以通过选择合适的材料和色谱柱进行优化。理想的方法取决于蛋白质的特性和下游应用所需的纯度水平。
使用 Y 优化蛋白质纯化工作流程伊森 生物产品
在
His标签蛋白纯化 （目录号：20502ES)：
在重组蛋白表达中， 他的标签 (通常为6×His)由于其尺寸小、免疫原性低、对蛋白质功能的影响极小而被广泛使用。 His标签蛋白可以通过与镍离子螯合的亲和树脂（例如Ni-NTA树脂）进行有效纯化。 HisSep Ni-NTA 琼脂糖树脂 （目录号：20502ES）由 Y 提供伊森 生物学 采用高度交联的琼脂糖凝胶为基质，结合四配位的氮三乙酸（NTA）配体，形成稳定的镍离子螯合物，组合结构保证了高效的蛋白质结合和洗脱性能。
标签抗体亲和纯化
标签抗体亲和纯化是利用抗体与特定标签之间的高特异性结合来实现融合蛋白的纯化。常见的标签包括 标记, HA, Myc等，利用相应的抗体亲和介质可以从复杂样品中有效地分离出目的蛋白质。
- 反旗帜亲和力 凝胶 （目录号：20584ES）：
采用优质鼠IgG2b单克隆抗体，经4%高交联琼脂糖凝胶电泳制备ugh供应耦合，它具有较高的Flag-tag融合蛋白负载能力，适用于Flag-tag蛋白的免疫沉淀和纯化。Yeasen .com
- 抗 HA 亲和凝胶（猫号#20586ES)：
采用优质鼠IgG1单克隆抗体与Sepharose 4B凝胶经抗原偶联制备而成，具有较高的HA-tag融合蛋白负载量，适用于HA-tag蛋白的免疫沉淀纯化。Yeasen 。com
- 抗 Myc 亲和凝胶（猫号#20587ES）：
高质量的鼠IgG1单克隆抗体与Sepharose 4B凝胶偶联，专门用于Myc标签蛋白的纯化，具有高特异性和高结合能力。
- 抗标记免疫磁珠（目录号：20565ES）：
该免疫磁珠采用高品质鼠源IgG2b单克隆抗体偶联磁性琼脂糖微球，在磁场作用下可快速纯化Flag标签蛋白，适合小样本的纯化。
抗体亲和纯化（Cat#36401ES）：
抗体亲和纯化 是利用抗体与抗原的特异性结合进行蛋白纯化的方法。耐碱性重组蛋白A琼脂糖纯化树脂（Cat#36401ES）是常用的抗体亲和纯化介质，广泛应用于抗体的纯化和富集。
蛋白酶
在蛋白质研究中，蛋白酶用于切割融合标签，恢复目标蛋白质的自然状态。将这些蛋白酶纳入蛋白质纯化工作流程可以提高目标蛋白质的质量和功能，促进高级研究和开发项目。
- 重组肠激酶（Cat#20401ES）：
肠激酶，也称为肠肽酶，是一种丝氨酸蛋白酶，专门在氨基酸序列 DDDDK 后进行切割。
- 升PNGase F（目录号：20407ES）：
PNGase F 是一种酰胺酶，可特异性地切割 N 连接糖蛋白最内层的 GlcNAc 和 Asn 残基。
- 重组胰蛋白酶 (MS-SAFE)（Cat#20416ES）：
胰蛋白酶是一种丝氨酸蛋白酶，可切割赖氨酸和精氨酸残基羧基侧的肽键。
| 纯化 方法 | 试剂类型 | 产品类型 | 推荐产品 |
| 凝胶过滤 | 葡聚糖 凝胶 色谱法 | 脱盐填料 预装脱盐柱 脱盐重力柱离心柱
| 脱盐塔G25M（目录号：20590ES） 旋转脱盐柱，0.5 mL （编号：20599ES） 重力脱盐塔，8.3 毫升（目录号：20741ES） |
| 琼脂糖 凝胶 色谱法 | 填料 预装柱 | Geldex 200 PG 高分辨率琼脂糖凝胶层析填料（10-600 kDa）（Cat#20598ES） Geldex 200 PG 层析柱 （编号：20593ES） | |
| 离子交换 | 阴离子交换 色谱法 | 填料 预装柱 | Q 琼脂糖 HP（Q 强阴离子交换层析填料 HP）（Cat#20460ES） Q HP 强阴离子交换预装柱，5 毫升（货号：20462ES） |
| 阳离子交换色谱法 | SP 琼脂糖 HP（SP 强阳离子交换层析填料 HP）（Cat#20463ES） SP HP 强阳离子交换预装柱，5 毫升（目录号：20465ES） | ||
| 疏水作用色谱法 | 弱疏水性 色谱法 | 填料 预装柱 | 高分辨率丁基弱疏水色谱介质（Cat#20484ES） 丁基 HP 弱疏水色谱预装柱，5 毫升（目录号：20485ES） |
| 强疏水性 色谱法 | 高分辨率苯基强疏水色谱介质（Cat#20486ES） 苯基 HP 强疏水色谱预装柱，5 毫升（Cat#20487ES） | ||
| 亲和纯化 | His标签 蛋白质纯化 | 树脂 预装柱 纯化磁珠
| His-tag 蛋白琼脂糖纯化树脂 （编号：20502ES） His-tag 蛋白纯化预装柱，5 mL（货号：20504ES） His-tag 蛋白纯化磁珠（Cat#20561ES） |
| 消费税-标签 蛋白质纯化 | 树脂 预装柱 纯化磁珠
| 谷胱甘肽琼脂糖树脂（用于 GST 标记蛋白纯化）（Cat#20507ES） GST 标记蛋白质纯化预装柱，5 毫升（目录号：20510ES） GST 标记蛋白质纯化磁珠（Cat#20562ES） | |
| 骨髓移植-标签 蛋白质纯化 | 树脂 预装柱
| MBP 标记蛋白高交联纯化树脂 (Cat#20515ES) MBP 标记蛋白质纯化预装柱，5 毫升（货号：20517ES） | |
| 链球菌(二） 标签 蛋白质纯化 | 树脂 预装柱
| Strep(II) 标记蛋白琼脂糖纯化树脂 (Cat#20495ES) | |
| 比奥蒂-标签 蛋白质纯化 | 树脂 预装柱 免疫磁珠 | 链霉亲和素琼脂糖纯化树脂（Cat#20512ES） 生物素分子纯化预装柱，5 毫升（货号：20514ES） 链霉亲和素 (SAV) 免疫磁珠（Cat#47503ES） | |
| 标签抗体亲和纯化 | 凝胶 免疫磁珠 | 抗标记亲和纯化凝胶 （编号：20584ES） 抗 HA 亲和纯化凝胶 （编号：20586ES） 抗 Myc 亲和纯化凝胶 （编号：20587ES） 抗标记免疫磁珠 （编号：20565ES） | |
| 抗体亲和纯化 | 树脂 预装柱 免疫磁珠 | 重组蛋白A琼脂糖纯化树脂 （编号#36401ES） 蛋白 G 琼脂糖纯化树脂（Cat#36405ES） Protein A/G 琼脂糖纯化树脂（Cat#36403ES） 蛋白 A/G 免疫磁珠 （编号：36417ES） | |
| 其他抗体亲和纯化 | 树脂 预装柱
| 内毒素高效去除纯化树脂（Cat#20518ES） 肝素亲和纯化培养基（Cat#20493ES） | |
| 其他产品 | 蛋白酶 | 标签裂解酶 糖苷酶 质谱级酶 | E.大肠杆菌表达重组肠激酶（无标签） （编号：20401ES） 牛凝血酶（高活力，>2000 IU/mg）（Cat#20402ES） rTEV 蛋白酶重组烟草蚀刻病毒蛋白酶（Cat#20403ES） PNGase F、N-糖苷酶 F（100000 U/mL） （编号：20407ES） 重组胰蛋白酶 (MS-SAFE) 重组胰蛋白酶 (质谱级) （编号：20416ES） |
| 色谱耗材 | 重力流空柱 输入空列 YXK柱 透析袋 | 12 mL 重力色谱空柱（Cat#20523ES） 5 mL C 型空柱（连接至 Akata、注射器或蠕动泵）（目录号：20526ES） YXK16/70色谱空柱（Cat#20443ES） 27mm 透析袋（MWCO 50 kDa）（Cat#20534ES） |
结论：根据您的需求定制您的工作流程
优化蛋白质纯化工作流程对于获得高纯度、高产量的蛋白质以供研究或应用至关重要。通过了解纯化原理并选择合适的工具，您可以简化流程并避免常见的陷阱。
要了解有关我们的产品如何增强您的蛋白质纯化过程的更多信息，请访问我们的产品页面或联系我们的团队获取个性化建议。