在生物医学研究领域,蛋白质纯化是探索生命奥秘的关键技术。然而,传统的纯化方法效率低、成本高,尤其是结构生物学研究的重点——膜蛋白。这些蛋白质结构复杂,在细胞膜上的表达水平低,对环境条件敏感,纯化难度特别大。现在, Yeasen 生物科技凭借卓越的研发实力,推出了升级版 抗 DYKDDDDK(Flag)亲和凝胶 (编号:20584ES)这是一种高效、便捷的蛋白质纯化强效工具,甚至可以纯化具有挑战性的膜蛋白。

产品性能

1. 高特异性和高结合能力:目标蛋白捕获的关键优势

Yeasen 抗 DYKDDDDK(Flag)亲和凝胶 (编号:20584ES) 是由高品质鼠IgG2b单克隆抗体与4%高交联琼脂糖凝胶共价偶联而成,这种独特的制造工艺赋予了产品极高的特异性,使其能够精准识别并结合带有Flag标签的融合蛋白。无论是N端经Met修饰的Flag融合蛋白(蛋氨酸标记蛋白)、N 端 Flag 融合蛋白 (旗蛋白),或 C 端 Flag 融合蛋白 (蛋白质标记),凝胶就能轻松处理它们。

在膜蛋白纯化中,这种特异性尤为重要,因为这些蛋白质结构复杂,容易与其他蛋白质发生非特异性结合。Flag 凝胶的高特异性有效地减少了非特异性蛋白质的干扰,确保了纯化膜蛋白的高纯度。此外,该凝胶对 Flag 标记的融合蛋白具有很高的结合能力(至少 1.1 毫克蛋白质/毫升 这意味着即使目标蛋白的表达水平较低,仍然可以使用Flag凝胶有效地捕获和纯化它。

2. 高纯度、高产量:实现下游应用

Yeasen 抗 DYKDDDDK(Flag)亲和凝胶 (编号:20584ES) 杂质的非特异性结合极少,纯化后蛋白样品纯度高,这对于后续的生物活性检测、结构分析等应用至关重要,高纯度的蛋白样品可以提供更准确的实验数据,为科研人员的研究打下坚实的基础。

3. 优化实验工作流程:简化蛋白质纯化挑战

蛋白质纯化需要在温和的条件下进行,以避免蛋白质的结构损伤,特别是复杂的膜蛋白。 Yeasen 抗 DYKDDDDK(Flag)亲和凝胶 (编号:20584ES) 的设计考虑到了这一点。其存储缓冲区是 含 50% 甘油的 TBS pH 值为 7。4、既保护了凝胶的活性又为蛋白质纯化提供了温和的环境。

使用 Flag 凝胶的纯化过程简单高效。为了方便使用 1×Flag 肽洗脱,产品包装中附赠 1×Flag 肽(Cat#20572ES)。这使得洗脱过程温和(几乎不损害蛋白质)且非常方便(进一步提高了实验的简易性)。

4. 多种尺寸和灵活的运输选择:满足多样化的实验需求

考虑到不同实验室的规模和需求不同, Yeasen 提供多种尺寸的 Flag 凝胶,包括 1 毫升、5 毫升、25 毫升和 100 毫升无论是小规模的初步探索,还是大规模的蛋白生产,都有合适的选择。对于大批量的年度采购,客户可以选择分批收货,既能享受价格优惠,又能避免库存过剩的压力。

测试数据

Figure 1.   Yeasen Anti-DYKDDDDK(Flag) Affinity Gel purification results for low-expressing proteins (Flag-N (a), Flag-M (b), Flag-C (c)) shown in SDS-PAGE.

M:蛋白质标记物

图 1:Flag-N/Flag-M/Flag-C蛋白柱前粗样

2:Flag-N/Flag-M/Flag-C 蛋白的柱后流出

3:洗脱(pH2.7洗脱)

4:洗脱(pH 12洗脱)

5:洗脱(1×标志肽洗脱)

6:纯化凝胶(pH 2.7 洗脱)

7:纯化凝胶(pH 12 洗脱)

8:纯化凝胶(1×标志肽洗脱)

一个旗帜-N   b旗帜-M   丙旗帜-C

图 1   Yeasen 抗 DYKDDDDK(Flag)亲和凝胶 SDS-PAGE 显示低表达蛋白质 (Flag-N (a)、Flag-M (b)、Flag-C (c)) 的纯化结果。

  Figure 2.  Comparison of Yeasen (a) withBrand S* (b) and Brand G* (c) Anti-Flag gels in purifying low-expressing proteins (e.g., membrane proteins) shown in SDS-PAGE.

M:蛋白质标记物

图1:Flag-C蛋白柱前粗样

2:Flag-C 蛋白的柱后流出

3:洗脱(pH2.7洗脱)

4:洗脱(pH 12洗脱)

5:洗脱(1×标志肽洗脱)

6:纯化凝胶(pH 值 2.7 洗脱)

7:纯化凝胶(pH 12 洗脱)

8:纯化凝胶(1×标志肽洗脱)

一个Yeasen b品牌 S*   丙品牌 G*

数字 2. 比较 Yeasen (a)与rand S*(b)和 rand G* (c)SDS-PAGE 显示 Anti-Flag 凝胶在纯化低表达蛋白质(例如膜蛋白)中的作用。

结论:

1. Yeasen 抗 DYKDDDDK(Flag)亲和凝胶 (编号:20584ES) 具有高度特异性,可以与各种位置的Flag标签结合(N端Flag融合蛋白、Met修饰的N端Flag融合蛋白、C端Flag融合蛋白)。

2. 在靶蛋白表达极低(例如膜蛋白)的情况下, Yeasen 抗 DYKDDDDK(Flag)亲和凝胶 (Cat#20584ES)与竞争对手相比,产量和纯度明显更高。使用 Yeasen 使用免费的1×Flag肽(Cat#20572ES)进行洗脱可提供更好的结果。

Flag标记融合蛋白的完整解决方案:

重组肠激酶(Cat#20395ES):一种特异性蛋白酶,可切割赖氨酸的羧基末端,其前面是四个天冬氨酸:Asp-Asp-Asp-Asp-Lys。此序列是八肽 Flag 标签 (DYKDDDDK) 的一部分。重组肠激酶 (rEK) 可轻松从融合蛋白中去除 Flag 标签,使其成为研究天然蛋白质结构和功能的理想工具。

反DYKDDDDK(旗帜)磁珠 (编号:20565ES): 用高品质鼠抗DYKDDDDK(Flag)单克隆抗体与硅基磁珠共价偶联制备的聚合物磁性微球(直径 200nm)。这些珠子适用于带有Flag标签的蛋白质的免疫沉淀(IP)或共免疫沉淀(Co-IP)。

产品信息

产品名称

产品编号

规格

抗 DYKDDDDK(Flag)亲和凝胶

20584ES03/08/25

1 毫升/5 毫升/25毫升

在酵母中表达的重组牛肠激酶 His

20395ES60/76/90

100 /500 单位/5000单位

反DYKDDDDK(旗帜)磁珠

20565ES03/08

1 毫升/5 毫升

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